PEDV和TGEV的S蛋白融合抗原表位核酸疫苗的研究

发布时间：2021-08-01 08:52

　　猪流行性腹泻病毒（PEDV）和传染性胃肠炎病毒（TGEV）均可感染各个年龄段的猪,尤其对哺乳仔猪的致死率极高,给我国养猪业造成严重影响。S蛋白是位于PEDV和TGEV病毒粒子囊膜表面的纤突糖蛋白,是诱导机体产生抗病毒中和抗体的主要靶标。S基因是目前研究PEDV和TGEV疫苗的重要靶标抗原基因。由于PEDV和TGEV的S基因容易发生变异,导致目前的灭活和弱毒苗的免疫保护效力降低,因此亟需更安全高效的疫苗。PEDV S蛋白中的COE区域和TGEV S蛋白的A、D抗原位点结构稳定、高度保守并且具有良好的免疫原性,是诱导机体产生中和抗体的主要结构域。核酸疫苗具备亚单位疫苗的安全性和弱毒疫苗的时效性,能够更好地激起机体的体液和细胞免疫应答。在小鼠模型中PEDV和TGEV的核酸疫苗均能够刺激小鼠产生保护性中和抗体及细胞免疫应答。如何有效的提高核酸疫苗抗原的免疫原性,一直是该疫苗研发的关键。大肠杆菌不耐热肠毒素B亚基（LTB）是一种能够增强机体免疫应答的新型疫苗免疫佐剂。目前为止未见有将LTB作为TGEV和PEDV核酸疫苗佐剂的相关研究报道。本研究开展了关于TGEV和PEDV的S蛋白的融合基因和LT... 

【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：70 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

PT、LTB基因的扩增Fig.4-1AmplificationproductsofPT、LTBgene

3 重组真核表达载体的酶切鉴定对阳性重组质粒 pPT、pLTB 和 pPT-LTB 质粒分别用 Nhe /EcoRI、SalI/NNotI/Nhe /EcoRI 进行酶切鉴定，结果如图 4-3，酶切的条带大小与预期相体构建成功。图 4-2 重组真核表达载体相关图谱Fig.4-2 The profile of recombinant eukaryotic expression vectorA：pIRES 图谱；B：pLTB 图谱；C：pPT 图谱；D：pPT-LTB 图谱

表达载体的酶切鉴定粒 pPT、pLTB 和 pPT-LTB 质粒分别用 Nhe I 进行酶切鉴定，结果如图 4-3，酶切的条带图 4-2 重组真核表达载体相关图谱-2 The profile of recombinant eukaryotic expressionpIRES 图谱；B：pLTB 图谱；C：pPT 图谱；D：pPT-LTB

【参考文献】：
期刊论文
[1]黏膜佐剂大肠埃希菌不耐热肠毒素B亚单位优化的淋病奈瑟菌孔洞蛋白B核酸疫苗的构建及其诱导小鼠的免疫应答[J]. 陈敏,胡四海,王玉峰,戴志兵,张愉快,余敏君,李忠玉,朱翠明,陆春雪.  中华传染病杂志. 2011 (04)
[2]猪传染性胃肠炎病毒TH-98株S基因核酸疫苗的构建及其免疫效力[J]. 任晓峰,尹杰超,司微,李一经,刘宝全.  中国兽医科学. 2006(03)

硕士论文
[1]TGEV S/M双基因减毒沙门氏菌核酸疫苗株初步构建研究[D]. 刘佳文.四川农业大学 2012
[2]猪流行性腹泻病毒重组沙门氏菌的构建及免疫原性分析[D]. 徐丽丽.华中农业大学 2011
[3]猪传染性胃肠炎和流行性腹泻二联核酸疫苗免疫效力研究[D]. 孟凡丹.东北农业大学 2011
[4]猪IL-12和IL-18对TGEV S基因核酸疫苗免疫效应的研究[D]. 李训良.东北农业大学 2011
[5]PEDV S与猪IL-18联合DNA疫苗免疫效果研究[D]. 斯琴高娃.东北农业大学 2011



本文编号：3315210