羊源多杀性巴氏杆菌ExbD基因克

发布时间：2021-08-02 18:37

　　旨在克隆和表达羊源多杀性巴氏杆菌的ExbD基因,并对其编码蛋白进行生物信息学分析。试验通过PCR成功扩增出目的基因片段,将所回收片段与pET-28a（+）载体进行连接,构建pET-28a（+）-ExbD重组质粒,将所得pET-28a（+）-ExbD重组质粒经双酶切鉴定后转至大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞,通过自诱导表达,SDS-PAGE和Western blot鉴定表达产物。结果显示:扩增出390 bp的目的基因,诱导表达得到约为19 ku的重组蛋白。经生物信息学分析,该蛋白为疏水性酸性蛋白,属于稳定蛋白,分子式为C₆₅₆H₁₀₆₈N₁₆₀O₁₉₃S₃,分子质量约为14.44 ku,消光系数(L·mol^-1·cm^-1=280 nm)为6 990,理论等电点是5.16,不稳定系数为35.28（<40）,总平均疏水性（GRAVY）为0.145,二级结构以α-螺旋和无规则卷曲为主。本试验通过对ExbD基因的克隆、表达和分析,为进... 

【文章来源】：畜牧与兽医. 2020,52(05)北大核心

【文章页数】：5 页

【部分图文】：

ExbD基因PCR扩增结果

pET-28a(+)-ExbD双酶切鉴定结果

重组蛋白SDS-PAGE分析

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3318070