BAMBI基因对猪卵母细胞发育的影响
发布时间：2021-08-03 19:54
BAMBI（BMP and Activin Membrane-bound Inhibitor）是转化生长因子-β（transforming growth factor-β,TGF-β）通路上的抑制型伪受体,与TGF-βⅠ型受体竞争性结合配体与TGF-βⅡ型受体复合物,可以抑制TGF-β通路的信号传导。最近在癌症等疑难病症中的研究发现BAMBI在TGF-β通路中的调控作用至关重要,尤其在卵巢癌中有显著的差异表达,但其在卵母细胞发育中的调控作用还鲜为人知。为了探究BAMBI基因对卵母细胞以及胚胎发育过程中的影响,本试验采取不同的基因超表达方式,分别从直接作用与间接作用的角度验证了BAMBI基因对卵母细胞发育的影响,并探明其调控机理,结果如下:（1）BAMBI基因可以促进卵母细胞成熟,同时抑制了周围颗粒细胞的增殖与贴壁能力,但促进了颗粒细胞的运动迁移能力。（2）结合卵丘卵母细胞的分离共培养试验,发现了破坏卵丘颗粒细胞和卵母细胞之间的间隙连接会影响BAMBI的作用,即这种间接作用依赖于间隙连接。（3）体外克隆BAMBI基因,连接真核载体,转录后注射体GV（未成熟的生发泡）时期的卵母细胞后发现B...
【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：48 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
TGF-β通路作用示意图(Massagué,2003)
图 3-1 BAMBI 基因对 COC 的影响Figure 3-1 Effect of gene BAMBI on COCA：在 20 个 COC 的体外成熟培养液中加入 0.5 μL 滴度为 1.26 ×1011PFU/ml 腺病毒 HBAD-BAMBIB：将 0.5μL 滴度为 1.58×1011PFU / ml 的 HBAD-GFP 添加到 20 个 COC 的成熟培养液中。C：没有病毒转染的 COC 培养。 然后观察处理后 44h 后颗粒细胞的贴壁增殖能力。与 GFP 组对比，BAMB降低了颗粒细胞的贴壁和增殖能力。D：上述处理后在荧光显微镜下的观察结果。A: 0.5 μL HBAD-BAMBI with a titer of 1.26 ×1011PFU/ml was added to in vitro maturation mediucontaining 20 COCs. B: 0.5 μL of HBAD-GFP at a titer of 1.58 x 1011PFU/ml was added to the maturatiomedium containing 20 COCs. C: COC culture without virus transfection. Then the adhesion anproliferation ability of the granular cells were observed after treatment for 44h. Compared to the GFP grouBAMBI reduced the ability of adhesion and proliferation of the granular cells. D: Observations under thfluorescence microscope after above treatment.
BAMBI 基因对猪卵母细胞发育的影响不同滴度的转基因腺病毒培养液中培养后，经过倍比稀释的度，进行 COC 的转基因培养。每组 20 个 COC，分为空白FP组，以及转基因对照GFP组。所选取的COC 形态与质量相、100%饱和湿度的培养箱中培养 44 小时后，观察各组的第的生长状况，从而对比分析 BAMB 基因对卵母细胞成熟发示：没有经过病毒处理的空白对照组的 COC 表现为颗粒细器轻轻吹打便可全部脱落（图 3-1 C），而使用腺病毒转染颗粒细胞扩散受阻，颗粒细胞贴壁增殖明显（图 3-1 B）。然组时发现这种颗粒细胞的贴壁增殖现象又的到了逆转，也就现象（图 3-1A）。综上所述，我们观察到在正常情况下的无扩散并脱落，而经腺病毒处理后的对照组中改变了颗粒细胞增殖能力增加，但是转入 BAMBI 基因后的试验组又有颗粒
【参考文献】：
期刊论文
[1]TGF-βRⅠ及Smad2表达情况对绵羊腔前卵泡发育的影响[J]. 常迪,董晓晨,郭勇,刘云海,齐晓龙,盛熙晖,倪和民. 中国农学通报. 2016(32)
[2]卵母细胞分泌因子在人卵丘颗粒细胞中的表达及其与卵母细胞发育潜能的关系[J]. 吴小华,程立立,张敏,焦保权,朱爱萍,常秀峰,徐清华,李冬秀,包莉莉,许鹏宇. 生殖与避孕. 2016(09)
[3]TGF-β信号传导通路及其生物学功能[J]. 刘镕,赵琴平,董惠芬,蒋明森. 中国病原生物学杂志. 2014(01)
[4]TGF-β超家族在人卵母细胞发生中的调控作用[J]. 冷少华,梁志清,王凤英. 重庆医学. 2009(14)
[5]韧带愈合过程中转化生长因子β1及其Ⅰ型受体表达的实验研究[J]. 张喜善,罗怀灿,鲁玉来,王信胜,董军. 中国矫形外科杂志. 2001(05)
硕士论文
[1]下调Dlg1对猪卵母细胞体外发育的影响[D]. 李科瑛.西北农林科技大学 2017
本文编号：3320235
【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：48 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
TGF-β通路作用示意图(Massagué,2003)
图 3-1 BAMBI 基因对 COC 的影响Figure 3-1 Effect of gene BAMBI on COCA：在 20 个 COC 的体外成熟培养液中加入 0.5 μL 滴度为 1.26 ×1011PFU/ml 腺病毒 HBAD-BAMBIB：将 0.5μL 滴度为 1.58×1011PFU / ml 的 HBAD-GFP 添加到 20 个 COC 的成熟培养液中。C：没有病毒转染的 COC 培养。 然后观察处理后 44h 后颗粒细胞的贴壁增殖能力。与 GFP 组对比，BAMB降低了颗粒细胞的贴壁和增殖能力。D：上述处理后在荧光显微镜下的观察结果。A: 0.5 μL HBAD-BAMBI with a titer of 1.26 ×1011PFU/ml was added to in vitro maturation mediucontaining 20 COCs. B: 0.5 μL of HBAD-GFP at a titer of 1.58 x 1011PFU/ml was added to the maturatiomedium containing 20 COCs. C: COC culture without virus transfection. Then the adhesion anproliferation ability of the granular cells were observed after treatment for 44h. Compared to the GFP grouBAMBI reduced the ability of adhesion and proliferation of the granular cells. D: Observations under thfluorescence microscope after above treatment.
BAMBI 基因对猪卵母细胞发育的影响不同滴度的转基因腺病毒培养液中培养后，经过倍比稀释的度，进行 COC 的转基因培养。每组 20 个 COC，分为空白FP组，以及转基因对照GFP组。所选取的COC 形态与质量相、100%饱和湿度的培养箱中培养 44 小时后，观察各组的第的生长状况，从而对比分析 BAMB 基因对卵母细胞成熟发示：没有经过病毒处理的空白对照组的 COC 表现为颗粒细器轻轻吹打便可全部脱落（图 3-1 C），而使用腺病毒转染颗粒细胞扩散受阻，颗粒细胞贴壁增殖明显（图 3-1 B）。然组时发现这种颗粒细胞的贴壁增殖现象又的到了逆转，也就现象（图 3-1A）。综上所述，我们观察到在正常情况下的无扩散并脱落，而经腺病毒处理后的对照组中改变了颗粒细胞增殖能力增加，但是转入 BAMBI 基因后的试验组又有颗粒
【参考文献】：
期刊论文
[1]TGF-βRⅠ及Smad2表达情况对绵羊腔前卵泡发育的影响[J]. 常迪,董晓晨,郭勇,刘云海,齐晓龙,盛熙晖,倪和民. 中国农学通报. 2016(32)
[2]卵母细胞分泌因子在人卵丘颗粒细胞中的表达及其与卵母细胞发育潜能的关系[J]. 吴小华,程立立,张敏,焦保权,朱爱萍,常秀峰,徐清华,李冬秀,包莉莉,许鹏宇. 生殖与避孕. 2016(09)
[3]TGF-β信号传导通路及其生物学功能[J]. 刘镕,赵琴平,董惠芬,蒋明森. 中国病原生物学杂志. 2014(01)
[4]TGF-β超家族在人卵母细胞发生中的调控作用[J]. 冷少华,梁志清,王凤英. 重庆医学. 2009(14)
[5]韧带愈合过程中转化生长因子β1及其Ⅰ型受体表达的实验研究[J]. 张喜善,罗怀灿,鲁玉来,王信胜,董军. 中国矫形外科杂志. 2001(05)
硕士论文
[1]下调Dlg1对猪卵母细胞体外发育的影响[D]. 李科瑛.西北农林科技大学 2017
本文编号：3320235
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/dongwuyixue/3320235.html
