猪抑胃肽/葡萄糖依赖性促胰岛素释放肽（GIP）基因的克隆与组织表达分析

发布时间：2021-08-05 17:34

　　本研究采用RT-PCR方法,克隆长白猪（Landrace）GIP基因全长cDNA序列,并对其在家猪组织中的表达情况进行分析.结果显示:长白猪GIP（pGIP）cDNA全长435bp,编码144个氨基酸GIP的前体蛋白;该前体蛋白含有信号肽序列,经蛋白酶水解后产生GIP成熟肽.与人、小鼠GIP表达图谱类似,GIP mRNA也在长白猪小肠及肾脏中有较高水平表达. 

【文章来源】：四川大学学报(自然科学版). 2017,54(01)北大核心CSCD

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

图１猪ｐＧＩＰ基因ｃＤＮＡ扩增Ｆｉｇ．１ＡｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｐＧＩＰｃＤＮＡ

７２．２２％、６９．４４％．猪ＧＩＰ成熟肽与人、小鼠、大鼠以及牛的ＧＩＰ成熟肽的氨基酸序列一致性分别为９５．２４％、９７．６２％、９５．２４％、９７．６２％．图２猪ＧＩＰ基因结构方框及数字代表外显子区及其编号；横线表示内含子区．Ｆｉｇ．２Ｅｘｏｎ－ｉｎｔｒｏｎｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎｏｆｐｉｇＧＩＰｇｅｎｅＴｈｅｂｏｘｒｅｐｒｅｓｅｎｔｓｅｘｏｎａｎｄｉｓｎｕｍｂｅｒｅｄａｃｃｏｒｄｉｎｇｌｙ；ｄａｓｈｌｉｎｅｓｒｅｐｒｅｓｅｎｔｓｉｎｔｒｏｎｓ．图３猪ＧＩＰ前体蛋白序列比对分析信号肽序列用双向箭头标示．阴影示ＧＩＰ成熟肽序列．ｐＧＩＰ代表本文克隆到的猪ＧＩＰ前体蛋白肽链序列；ｈＧＩＰ代表人（Ｈｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ）的ＧＩＰ前体蛋白；ｍＧＩＰ代表小鼠（Ｍｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓ）的ＧＩＰ前体蛋白；ｒＧＩＰ代表大鼠（Ｒａｔｔｕｓｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ）的ＧＩＰ前体蛋白；ｂＧＩＰ代表牛（Ｂｏｓｔａｕｒｕｓ）的ＧＩＰ前体蛋白．箭头标记出内含子插入位点．Ｆｉｇ．３ＡｍｉｎｏａｃｉｄｓｅｑｕｅｎｃｅａｌｉｇｎｍｅｎｔｏｆｔｈｅＧＩＰｐｒｅｃｕｒｓｏｒｐｒｏｔｅｉｎｓｆｒｏｍｄｉｆｆｅｒｅｎｔｓｐｅｃｉｅｓＴｈｅｓｉｇｎａｌｐｅｐｔｉｄｅｉｓａｎｎｏｔａｔｅｄｂｙａｎａｒｒｏｗ；ＴｈｅｍａｔｕｒｅＧＩＰｐｅｐｔｉｄｅｉｓｓｈａｄｅｄ；ｐＧＩＰ，ｐｉｇＧＩＰｐｒｅｃｕｒｓｏｒｐｒｏ－ｔｅｉｎ．ｈＧＩＰ，ｈｕｍａｎＧＩＰｐｒｅｃｕｒｓｏｒｐｒｏｔｅｉｎ；ｍＧＩＰ，ｍｏｕｓｅＧＩＰｐｒｅｃｕｒｓｏｒｐｒｏｔｅｉｎ；ｒＧＩＰ

１２号染色体上，ｐＧＩＰ基因包含６个外显子和５个内含子，编码区ｃＤＮＡ序列长４３５ｂｐ，分布于５个外显子上，编码含有１４４个氨基酸残基的ＧＩＰ前体蛋白．ｐＧＩＰ与人ｈＧＩＰ（ＮＭ＿００４１２３．２）、小鼠ｍＧＩＰ（ＮＭ＿００８１１９．２）、大鼠ｒＧＩＰ（ＮＭ＿０１９６３０．３）、牛ｂＧＩＰ（ＮＭ＿００１１６６６０５．１）的序列一致性分别为８２．７７％、７６．２３％、７５．６６％、８９．１０％．图１猪ｐＧＩＰ基因ｃＤＮＡ扩增Ｆｉｇ．１ＡｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｐＧＩＰｃＤＮＡｆｒｏｍｓｍａｌｌｉｎｔｅｓｔｉｎｅｐＧＩＰ基因由６个外显子构成，因此，本文将其依序命名为ｅｘｏｎ１（Ｅ１）、ｅｘｏｎ２（Ｅ２）、ｅｘｏｎ３（Ｅ３）、ｅｘｏｎ４（Ｅ４）、ｅｘｏｎ５（Ｅ５）、ｅｘｏｎ６（Ｅ６）．经比对发现，Ｅ１为ＧＩＰ基因５′端非编码区；翻译起始位点位于Ｅ２上，Ｅ２主要负责编码信号肽序列及部分Ｎ端肽；Ｅ３主要编码ＧＩＰ成熟肽序列；翻译终止密码子位于Ｅ６上（图２）．３．２ｐＧＩＰ基因序列分析家猪ｐＧＩＰ基因可编码一个含有１４４个氨基酸残基的前体蛋白．猪ＧＩＰ前体蛋白和其他哺乳动物的ＧＩＰ前体蛋白一级结构氨基酸序列中均含有信号肽序列（图３）；它与人ｈＧＩＰ前体蛋白（ＮＰ＿１６３

【参考文献】：
期刊论文
[1]猪Smad7和Smad9基因克隆、序列分析与组织表达图谱探究[J]. 陈巧容,李娟,王亚军.  四川大学学报(自然科学版). 2015(01)
[2]猪Akt1、Akt2基因克隆与组织表达图谱分析[J]. 钟宇,王亚军,李娟.  四川大学学报(自然科学版). 2014(02)



本文编号：3324173