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犬骨髓间充质干细胞的分离培养、生物学特性鉴定及标记

发布时间:2021-08-06 12:32
  骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)是存在于骨髓基质中的除造血干细胞之外,又一种成体干细胞。BMSCs自20世纪中期被发现以来,一直备受医学界瞩目。随着研究的深入,BMSCs的一系列生物学特性得到揭示,首先,作为成体干细胞,它与造血干细胞相比具有更广泛的分化谱系,能够在诱导剂的作用下向各胚层多种细胞分化;其次,与胚胎干细胞相比,BMSCs又具有获取简便,容易培养,不受法律道德约束的特殊优势;另外,BMSCs具有神奇的免疫抑制、免疫调理功能以及归巢和趋瘤性,在组织工程和基因治疗领域具有极大前景。虽然目前世界各国科学家对于BMSCs的研究取得许多可喜的成果,但仍有许多基础性的问题还没有得到解决。分离纯净的BMSCs的方法还没有被找到,分离到的细胞也没有统一的鉴定方法,体内移植研究中高效可靠的标记方法还有待研究。针对这些问题,本研究通过全骨髓贴壁培养法对犬BMSCs进行分离;采用流式细胞技术检测分析细胞表面标记物的表达情况;再通过体外诱导,将犬BMSCs向成骨细胞和心肌细胞诱导,以期鉴定分离得到的犬BMSCs的分化潜能。将携带... 

【文章来源】:西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】:61 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

犬骨髓间充质干细胞的分离培养、生物学特性鉴定及标记


原代及传代后的犬骨髓间充质干细胞(100×)

生长曲线,骨髓间充质干细胞,生长曲线,细胞


胞数量没有明显差别;第 10 代细胞 1~3 d 增殖速度较前两组慢,对数生长期较前两组短,平台期细胞OD值略小于低代次细胞。图3-2 犬骨髓间充质干细胞生长曲线Fig. 3-2 Growth curve of canine BMSCs

表面标志,流式细胞仪检测,荧光抗体染色


AB图3-3 第 3 代犬 BMSCs 表面标志流式细胞仪检测结果A 空白对照组 B 分别为CD45、CD44、CD34 荧光抗体染色组Fig. 3-3 Positive rate of the surface markers of the third passage canine BMSCs tested by flow cytometryA Blank control B Stained with fluorescent antibody CD45, CD44 and CD34

【参考文献】:
期刊论文
[1]中药制剂诱导骨髓间充质干细胞向心肌细胞的分化[J]. 王艳,王海萍,吕洋.  中国组织工程研究. 2014(01)
[2]腺病毒载体与慢病毒载体感染骨髓间充质干细胞的比较[J]. 徐思慧,宋春敬,潘晔.  生命科学研究. 2013(06)
[3]骨髓间充质干细胞移植促进糖尿病大鼠β细胞再生的机制[J]. 程愈,申晶,郝好杰,李冰,郭恩凯,韩为东,母义明.  解放军医学院学报. 2013(06)
[4]胰岛素样生长因子1诱导骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞的实验研究[J]. 王秀力,李春梅,吕茜,王雷,王洁,宫海滨.  中华心血管病杂志. 2013 (02)
[5]黄芪注射液预处理对大鼠骨髓间充质干细胞定向分化的诱导作用研究[J]. 陈旭.  吉林中医药. 2012(09)
[6]碱性成纤维生长因子联合丹酚酸B诱导间充质干细胞向心肌样细胞分化[J]. 吴志刚,张丹参,王海萍,吕洋,王浩宇,霍艳丽,高辰玮.  中国药理学与毒理学杂志. 2012(03)
[7]骨髓间充质干细胞移植对缺血心肌的血管新生及增殖-凋亡的影响[J]. 邓玮,陈庆伟,王丽,王鹏,吴志勤,杨彦.  基础医学与临床. 2012(04)
[8]骨髓间充质干细胞治疗小鼠胶原性关节炎MMP-2及MMP-9 mRNA表达的影响[J]. 牛广华,高玉洁,高明利,郭鹤,王柏山.  中国免疫学杂志. 2011(S1)
[9]催产素体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化[J]. 王海萍,张雷,王浩宇,吕洋,陈炜,邵素霞.  基础医学与临床. 2011(11)
[10]剪切应力与心肌细胞裂解液联合诱导骨髓间充质干细胞向心肌分化的研究[J]. 黄艳,樊瑜波.  医用生物力学. 2011(03)

博士论文
[1]骨髓间充质干细胞在治疗支气管哮喘中的作用研究[D]. 陶雪飞.复旦大学 2012
[2]淫羊藿苷诱导骨髓间充质干细胞分化心肌样细胞的实验研究[D]. 谢玲玲.广州中医药大学 2008

硕士论文
[1]儿童骨髓间充质干细胞体外对T细胞和造血干细胞的作用及移植治疗造血损伤的实验研究[D]. 卢俊.苏州大学 2005



本文编号:3325780

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