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苏尼特羊不同时期肌肉组织IncRNA的鉴定及功能预测

发布时间:2021-08-08 18:06
  本研究利用RNA-Seq技术,对苏尼特羊120天胎儿和5月龄羔羊的骨骼肌组织进行了比较分析,筛选出差异表达lncRNA及其靶基因,并对预测的靶基因进行了GO和KEGG分析,同时对随机筛选的差异表达lncRNA进行了 qRT-PCR验证。通过对苏尼特羊骨骼肌相关lncRNA的研究,为进一步了解肌肉生长发育的遗传调控机制提供重要的理论基础,也为绵羊分子辅助育种提供新的途径。主要研究结果如下:(1)对比分析lncRNA与mRNA,发现与mRNA相比,lncRNA长度区间在200bp-3000bp的lncRNA数占lncRNA总数的80.0%。包含两个和三个外显子的lncRNA数占所有lncRNA的87.3%(971个)。mRNA的ORF长度明显大于lncRNA,对比lncRNA和mRNA的表达量,发现lncRNA的整体表达量明显低于mRNA(P<0.05)。(2)共发现了 1112个lncRNA,其中包括586个已知lncRNA和526个新lncRNA,其中肌肉不同发育时期差异表达的lncRNA数为626个,共靶向1273个mRNA编码基因。(3)通过对lncRNA在不同样本中的FPK... 

【文章来源】:内蒙古农业大学内蒙古自治区

【文章页数】:49 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

苏尼特羊不同时期肌肉组织IncRNA的鉴定及功能预测


图1实验研究技术路线??Fig.?1?Experimental?research?technology?route??

序列,琼脂糖,肌肉,凝胶电泳


?0.4??Total?20.0??PCR反应程序:95°C反应3min?;?95°C反应5s,;?60°C反应30s,共40个循环,??95°C反应15min,放于4°C保存。羔羊IncRNA的相对表达量用23&et法计算,并和??转录组测序结果进行比对验证。??3.?3结累与分析??3.?3.?1肌肉组织总RNA提取检测结果??利用NanoDrop2000紫外分光光度计检测肌肉组织样本的总RNA,OD260/280??值均在1.8-2.0之间,用1%琼脂糖凝胶电泳检测,如图2所示,28s、ISs条带清晰完??整性良好,证明无蛋白和有机试剂污染,可以进行后续实验。???多?28s??K ̄>?18s??ss??图2肌肉组织总RNA琼脂糖凝胶电泳检测结果??Figure.2?Detection?results?of?total?RNA?agarose?gel?electrophoresis?in?muscle?tissue??3.3.2测序质量和序列比对??过滤分析测序得到的原始数据(Rawreads)如表5所示。两组样本的总clean?reads的??

苏尼特羊不同时期肌肉组织IncRNA的鉴定及功能预测


图3候选IncRNA筛选结果图??Figure.3?Screening?results?of?candidate?IncRNA??

【参考文献】:
期刊论文
[1]F17大肠杆菌在湖羊羔羊个体脾脏中LncRNA表达谱变化[J]. 黄赛男,金澄艳,鲍建军,王悦,陈炜昊,吴天弋,王利宏,吕晓阳,高雯,王步忠,朱国强,戴国俊,孙伟.  中国农业科学. 2019(07)
[2]苏博美利奴羊毛囊发育不同时期皮肤组织LncRNAs及其靶基因的差异表达[J]. 朱桦,黄锡霞,田可川,何军敏,付雪峰,赵冰茹,徐新明,田月珍,阿布来提·苏来曼,陈华峰.  农业生物技术学报. 2018(12)
[3]腺苷酸活化蛋白激酶与脓毒症心功能不全的研究进展[J]. 李亚敏,乔建峰,张雯瑄,彭振宇.  中南大学学报(医学版). 2018(12)

博士论文
[1]Lnc-SEMT促进绵羊肌肉分化生成的功能研究[D]. 吴明明.中国农业大学 2016
[2]利用条件性敲除小鼠模型对mTOR在肌肉和脂肪发育中的功能研究[D]. 张朋朋.华中农业大学 2015

硕士论文
[1]绵羊骨骼肌lncRNA的表达分析及lncRNA-MRLN蛋白编码能力的分析[D]. 刘芝瑾.石河子大学 2019
[2]苏尼特羊BMPR-IB、BMP15和GDF9基因与多胎性状关联性分析及BMP15基因突变检测[D]. 杨艳影.内蒙古大学 2017
[3]绵羊GV期和MⅡ期卵母细胞差异mRNA和lncRNA的筛选[D]. 牛梦涵.安徽农业大学 2017
[4]肉用绵羊IncRNA特征分析及细胞水平功能验证[D]. 刘瑞凿.中国农业科学院 2015
[5]鸭MyoD1和Myf5基因CDS区克隆及其在肌肉组织中发育差异性表达研究[D]. 魏园丁.四川农业大学 2009
[6]骨骼肌在兴奋收缩偶联过程中超微结构形态变化实时研究[D]. 李霆.第二军医大学 2004



本文编号:3330426

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