宿主miR181a调节血吸虫感染后免疫应答研究
发布时间：2021-08-09 21:20
日本血吸虫病是由日本血吸虫感染引起的人兽共患寄生虫病,吡喹酮是目前唯一大规模使用的血吸虫病治疗药物,但该药主要对成虫有效且不能解决重复感染的难题,因而研制出有效、安全的疫苗成为血吸虫病防治的重要科技需求。血吸虫疫苗研究取得突破要以血吸虫感染免疫机制为基础。本实验室前期研究表明,miR181a可能在宿主抗日本血吸虫感染的早期免疫应答中发挥了重要作用,本文以实验动物和巨噬细胞作为研究对象,从体内外对miR181a在抗日本血吸虫感染中的调节作用作了初步的探讨。鉴于巨噬细胞在宿主抗血吸虫感染过程中和血吸虫病发生发展中发挥了作用,本文首先以RAW264.7巨噬细胞作为研究对象,探讨miR181a在血吸虫童虫抗原SSA刺激巨噬细胞中的免疫调节作用。用日本血吸虫童虫抗原SSA和miR181a模拟物分别或共同刺激/转染RAW264.7巨噬细胞,再用实时定量PCR技术或流式细胞术分析细胞miR181a和TNF-α等细胞因子及M1型和M2型巨噬细胞标记分子的表达变化。结果显示日本血吸虫童虫抗原SSA刺激RAW264.7巨噬细胞后,miR-181a及IL-1β、IL-4、TNF-α、IL-10、IL-6等促...
【文章来源】：上海师范大学上海市
【文章页数】：54 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图1.1日本血吸虫成虫（雌雄合抱）
2.1.2.6 统计学分析每个实验都进行 3 次重复。实验数据利用 SPSS22.0 软件进组资料的比较采用两独立样本的 t 实验，多组资料的比较采（One-Way AVOVA）和 LSD-t 检验；p<0.05 为显著差异，p<0作图软件为 Graphpad Prism7.01。2.2 结果2.2.1 SSA 刺激 RAW264.7 巨噬细胞后 miR-181a 的表与 PBS 对照组相比，不同浓度的童虫抗原刺激 RAmicroRNA-181a 都呈上调表达（ p<0.01 ）（如图 1 ），（0.1ug-1ug/ml）刺激细胞的表达水平明显高于 2ug 及以上浓表达水平。
第 2 章 MiR181a 对日本血吸虫童虫抗原刺激巨噬细胞的免疫应答起负调节作用 上海师范大学硕士学位论和未转染的PBS对照组细胞相比，转染miR-181a模拟物后，IL-1β 、TNF- 、IL三种细胞因子的表达量都有所下降，IL-10 下调表达不明显。而转染 miR-18抑制剂的细胞这三种细胞因子的表达量都明显上升。而在 miR-181a 模拟物和制剂处理的细胞中，IL-4 的表达水平都有所上升，其中模拟物处理的细胞上水平明显高于抑制剂处理细胞。无关对照 microRNA 转染细胞各种细胞因子的达水平大多介于 PBS 对照组和模拟物或抑制剂处理细胞组之间（如图 2）。以结果说明 miR-181a 在 RAW264.7 细胞中对 T h 1 型细胞因子等的表达可能起负节作用。
【参考文献】：
期刊论文
[1]日本血吸虫感染小鼠肝脏枯否细胞差异表达MicroRNA及基因的分析[J]. 白瑞璞,潘卫庆. 中国热带医学. 2017(04)
[2]小鼠抗日本血吸虫感染的脾早期细胞免疫应答的初步研究[J]. 张祖航,韩宏晓,曹晓丹,沈元曦,韩倩,洪炀,傅志强,林矫矫. 中国兽医科学. 2017(02)
[3]重视羊血吸虫病防治 推进我国消除血吸虫病进程[J]. 林矫矫. 中国血吸虫病防治杂志. 2016(05)
[4]大、小鼠来源32d日本血吸虫凋亡相关基因表达分析[J]. 王涛,洪炀,傅志强,曹晓丹,吕超,窦雪峰,许瑞,韩倩,贾秉光,赵枝新,林矫矫. 中国动物传染病学报. 2016(03)
[5]2014年全国血吸虫病疫情通报[J]. 雷正龙,张利娟,徐志敏,党辉,许静,吕山,曹淳力,李石柱,周晓农. 中国血吸虫病防治杂志. 2015(06)
[6]microRNA调控巨噬细胞极化的研究进展[J]. 毕佳,曾宪鑫,魏敏杰,赵琳. 细胞与分子免疫学杂志. 2015(11)
[7]中国家畜血吸虫病防治[J]. 林矫矫,胡述光,刘金明. 中国动物传染病学报. 2011(03)
[8]日本血吸虫SjPRMT1基因的克隆、表达及表达产物的免疫保护效果分析[J]. 韩宏晓,彭金彪,洪炀,王欣之,石耀军,傅志强,刘金明,程国锋,李祥瑞,林矫矫. 中国农业科学. 2010(04)
[9]实时荧光定量PCR法检测日本血吸虫[J]. 周立,梁冰,赵友云,黄露,王业富. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志. 2008(04)
[10]血吸虫对吡喹酮抗药性的研究 Ⅺ日本血吸虫中国大陆现场分离株虫卵毛蚴尾蚴对吡喹酮的敏感性[J]. 梁幼生,戴建荣,李洪军,汪伟,陶永辉,张键锋,李伟,朱荫昌,G.C. Coles,M.J. Doenhoff. 中国血吸虫病防治杂志. 2007(05)
博士论文
[1]日本血吸虫排泄分泌蛋白的研究[D]. 曹晓丹.中国农业科学院 2016
[2]miR-669n/SENP6及Rab5/7对LPS/TLR4信号转导通路的调控机制研究[D]. 龙宇鹏.第三军医大学 2015
[3]TLR4/miR-181a信号轴在脑缺血再灌注后神经损伤中的作用及机制研究[D]. 宋磊.吉林大学 2014
本文编号：3332820
【文章来源】：上海师范大学上海市
【文章页数】：54 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图1.1日本血吸虫成虫（雌雄合抱）
2.1.2.6 统计学分析每个实验都进行 3 次重复。实验数据利用 SPSS22.0 软件进组资料的比较采用两独立样本的 t 实验，多组资料的比较采（One-Way AVOVA）和 LSD-t 检验；p<0.05 为显著差异，p<0作图软件为 Graphpad Prism7.01。2.2 结果2.2.1 SSA 刺激 RAW264.7 巨噬细胞后 miR-181a 的表与 PBS 对照组相比，不同浓度的童虫抗原刺激 RAmicroRNA-181a 都呈上调表达（ p<0.01 ）（如图 1 ），（0.1ug-1ug/ml）刺激细胞的表达水平明显高于 2ug 及以上浓表达水平。
第 2 章 MiR181a 对日本血吸虫童虫抗原刺激巨噬细胞的免疫应答起负调节作用 上海师范大学硕士学位论和未转染的PBS对照组细胞相比，转染miR-181a模拟物后，IL-1β 、TNF- 、IL三种细胞因子的表达量都有所下降，IL-10 下调表达不明显。而转染 miR-18抑制剂的细胞这三种细胞因子的表达量都明显上升。而在 miR-181a 模拟物和制剂处理的细胞中，IL-4 的表达水平都有所上升，其中模拟物处理的细胞上水平明显高于抑制剂处理细胞。无关对照 microRNA 转染细胞各种细胞因子的达水平大多介于 PBS 对照组和模拟物或抑制剂处理细胞组之间（如图 2）。以结果说明 miR-181a 在 RAW264.7 细胞中对 T h 1 型细胞因子等的表达可能起负节作用。
【参考文献】：
期刊论文
[1]日本血吸虫感染小鼠肝脏枯否细胞差异表达MicroRNA及基因的分析[J]. 白瑞璞,潘卫庆. 中国热带医学. 2017(04)
[2]小鼠抗日本血吸虫感染的脾早期细胞免疫应答的初步研究[J]. 张祖航,韩宏晓,曹晓丹,沈元曦,韩倩,洪炀,傅志强,林矫矫. 中国兽医科学. 2017(02)
[3]重视羊血吸虫病防治 推进我国消除血吸虫病进程[J]. 林矫矫. 中国血吸虫病防治杂志. 2016(05)
[4]大、小鼠来源32d日本血吸虫凋亡相关基因表达分析[J]. 王涛,洪炀,傅志强,曹晓丹,吕超,窦雪峰,许瑞,韩倩,贾秉光,赵枝新,林矫矫. 中国动物传染病学报. 2016(03)
[5]2014年全国血吸虫病疫情通报[J]. 雷正龙,张利娟,徐志敏,党辉,许静,吕山,曹淳力,李石柱,周晓农. 中国血吸虫病防治杂志. 2015(06)
[6]microRNA调控巨噬细胞极化的研究进展[J]. 毕佳,曾宪鑫,魏敏杰,赵琳. 细胞与分子免疫学杂志. 2015(11)
[7]中国家畜血吸虫病防治[J]. 林矫矫,胡述光,刘金明. 中国动物传染病学报. 2011(03)
[8]日本血吸虫SjPRMT1基因的克隆、表达及表达产物的免疫保护效果分析[J]. 韩宏晓,彭金彪,洪炀,王欣之,石耀军,傅志强,刘金明,程国锋,李祥瑞,林矫矫. 中国农业科学. 2010(04)
[9]实时荧光定量PCR法检测日本血吸虫[J]. 周立,梁冰,赵友云,黄露,王业富. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志. 2008(04)
[10]血吸虫对吡喹酮抗药性的研究 Ⅺ日本血吸虫中国大陆现场分离株虫卵毛蚴尾蚴对吡喹酮的敏感性[J]. 梁幼生,戴建荣,李洪军,汪伟,陶永辉,张键锋,李伟,朱荫昌,G.C. Coles,M.J. Doenhoff. 中国血吸虫病防治杂志. 2007(05)
博士论文
[1]日本血吸虫排泄分泌蛋白的研究[D]. 曹晓丹.中国农业科学院 2016
[2]miR-669n/SENP6及Rab5/7对LPS/TLR4信号转导通路的调控机制研究[D]. 龙宇鹏.第三军医大学 2015
[3]TLR4/miR-181a信号轴在脑缺血再灌注后神经损伤中的作用及机制研究[D]. 宋磊.吉林大学 2014
本文编号：3332820
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