GHR基因编辑猪生长发育指标及相关基因表达研究
发布时间：2021-08-09 23:51
生长激素（growth hormone,GH）对于动物发育生长、生殖泌乳以及免疫功能等发挥着非常重要的作用,但它必须与靶器官上的生长激素受体（Growth hormone receptor,GHR）结合后再由介导将信号传入细胞内才能发挥作用。GHR是一种单链跨膜蛋白,由620个氨基酸组成,是受体超家族成员之一。GH主要通过结合生长激素受体GHR激活下游JAK-STAT,PKC及IRS等信号通路,参与调节动物体内包括生长发育、代谢、繁殖等众多生理和病理过程。JAK2和STAT3是JAK/STAT信号通路调控中的重要基因,在动物生长和细胞增值等方面具有重要的信号转导的生物学功能。本研究选择贵州大学香猪育种场选育的F2代GHR基因编辑猪作为试验对象,通过F2代杂交,扩繁得到F3代;采集F3代仔猪耳组织,提取DNA,PCR扩增,产物测序,序列对比和图谱分析的方法,筛选出F3代GHR基因编辑阳性猪和阴性猪,并测定其1-6月龄体重、体长、体高、胸围等生长指标。利用实时荧光定量PCR的方法对GHR、JAK2和STAT3基因在贵州从江香猪和F2代GHR基因编辑猪心脏、肝脏、肺脏、肾脏和背最肌肉等组织的...
【文章来源】：贵州大学贵州省 211工程院校
【文章页数】：72 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
KEGG中JAK-STAT信号通路Fig.1.1JAK-STATsignalingpathwayinKEGG
生长激素 GH 与细胞膜上的生长激素受 GHR 结合，激活细胞质酪氨酸激酶 J磷酸化和磷酸化，然后与JAK2和GHR协同作用，将激活信号转导和转录激活子STAT3 转移到细胞核，并与调控基因转录启动子的特异序列结合，激活下游的基因它的转录，它调节许多生物过程，如细胞增殖，分化，细胞凋亡和免疫调节。，赵声明等人试验研究发现通过 JAK2 基因介导，可以长期扩增调控转基因骨髓胞。2006 年，Frenzel 等人通过研究发现抑制老鼠胚胎中的 JAK2 基因会导致老鼠死08 年，Schindler 等人研究结果表明，活化的 STAT3 可以促进 B 淋巴细胞-2 和生因表达，使凋亡蛋白酶-3 活性降低，进而抑制细胞凋亡。Marodi 等（2001 年)研，不仅增加了 STAT3 在肿瘤组织中的表达，又阻断 STAT3 的磷酸化，所以可见GF 蛋白的表达，进而导致下游靶基因的过度表达，并发挥抗凋亡作用，而抑制胞凋亡。JAK2 和 STAT3 是 JAK/STAT 信号通路调控中的重要基因，在动物生长和细胞方面具有重要的信号转导的生物学功能（常建梅，2015）。
用 Sanger 测序法对杂合子猪的 PCR 产物进行鉴定，经序列和基因谱对位点处开始为双峰的个体是杂合子（GHR+/-），出现单一图谱的个体为野生型变纯合子香猪，但突变纯合子香猪比野生型香猪多 4 个 TGGA 碱基或 2 个 TG Cui,2015）。猪在人类疾病动物模型、新药安全性有效性评价、异种器官移植供体等领出独特优势，而小型猪由于其体型较小，具有易于实验操作、易于微生物控制本低等优点，逐渐成为生命科学研究中的重要实验动物(商海涛, 2007)。因此，用小型猪将成为必不可少的过程。本课题组前期以贵州大学香猪育种场培育的香猪为母本，中国农业大学提供的 GHR 基因编辑猪(GHR(+/-))为父本杂交选育筛选出 F1 代阳性猪和阴性猪，再用 F1 代进行扩繁得到 F2 代（陈明飞 2015，陈为实验用香猪 GHR 基因编辑猪配种和培育提供参考数据，以满足生物医学研量实验用小型猪的需求。
本文编号：3333024
【文章来源】：贵州大学贵州省 211工程院校
【文章页数】：72 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
KEGG中JAK-STAT信号通路Fig.1.1JAK-STATsignalingpathwayinKEGG
生长激素 GH 与细胞膜上的生长激素受 GHR 结合，激活细胞质酪氨酸激酶 J磷酸化和磷酸化，然后与JAK2和GHR协同作用，将激活信号转导和转录激活子STAT3 转移到细胞核，并与调控基因转录启动子的特异序列结合，激活下游的基因它的转录，它调节许多生物过程，如细胞增殖，分化，细胞凋亡和免疫调节。，赵声明等人试验研究发现通过 JAK2 基因介导，可以长期扩增调控转基因骨髓胞。2006 年，Frenzel 等人通过研究发现抑制老鼠胚胎中的 JAK2 基因会导致老鼠死08 年，Schindler 等人研究结果表明，活化的 STAT3 可以促进 B 淋巴细胞-2 和生因表达，使凋亡蛋白酶-3 活性降低，进而抑制细胞凋亡。Marodi 等（2001 年)研，不仅增加了 STAT3 在肿瘤组织中的表达，又阻断 STAT3 的磷酸化，所以可见GF 蛋白的表达，进而导致下游靶基因的过度表达，并发挥抗凋亡作用，而抑制胞凋亡。JAK2 和 STAT3 是 JAK/STAT 信号通路调控中的重要基因，在动物生长和细胞方面具有重要的信号转导的生物学功能（常建梅，2015）。
用 Sanger 测序法对杂合子猪的 PCR 产物进行鉴定，经序列和基因谱对位点处开始为双峰的个体是杂合子（GHR+/-），出现单一图谱的个体为野生型变纯合子香猪，但突变纯合子香猪比野生型香猪多 4 个 TGGA 碱基或 2 个 TG Cui,2015）。猪在人类疾病动物模型、新药安全性有效性评价、异种器官移植供体等领出独特优势，而小型猪由于其体型较小，具有易于实验操作、易于微生物控制本低等优点，逐渐成为生命科学研究中的重要实验动物(商海涛, 2007)。因此，用小型猪将成为必不可少的过程。本课题组前期以贵州大学香猪育种场培育的香猪为母本，中国农业大学提供的 GHR 基因编辑猪(GHR(+/-))为父本杂交选育筛选出 F1 代阳性猪和阴性猪，再用 F1 代进行扩繁得到 F2 代（陈明飞 2015，陈为实验用香猪 GHR 基因编辑猪配种和培育提供参考数据，以满足生物医学研量实验用小型猪的需求。
本文编号：3333024
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