AsiaI型口蹄疫标记重组病毒的构建及其生物学特性的研究
发布时间:2021-08-12 17:01
利用反向遗传技术对口蹄疫病毒基因的改造和修饰,可以实现对疫苗种毒的生产性能、抗原匹配性、抗原稳定性、免疫应答能力、生物安全性等特征的改良,能够迅速获得预期生物学特性的疫苗候选株,进而可以减少和避免流行毒株驯化环节带来的负面影响。不仅改变了对流行毒株筛选驯化受病毒自然属性制约、费时费力、成功率低的缺陷,而且可以实现更为主动有效的疫苗毒株的设计,对整体提升疫苗品质和效力具有重大意义。为了鉴定出在口蹄疫病毒插入的位点和获得标记的重组病毒,本研究利用口蹄疫病毒反向遗传操作技术,在RGD+9位点处插入了His标签,获得了含有His标签的FMDV全长cDNA克隆(命名为prAsiaI-9His)。将prAsiaI-9His质粒转染BHK-21细胞后,能够出现典型的细胞病变。对收获的病毒分别用RT-PCR、间接免疫荧光进行鉴定,结果证实,成功拯救了His标签的重组病毒(命名为rAsiaI-9His),该毒能够稳定表达His标签。最后,比较测定了对BHK-21细胞和乳鼠的致病性,结果表明,该标记毒与亲本拯救的毒株(rAsiaI)具有相似的生物特性。通过对重组毒rAsiaI-9His的致病性试验表明口蹄...
【文章来源】:新疆农业大学新疆维吾尔自治区
【文章页数】:54 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
Asia1-FMDVP12A基因PCR扩增结果
.DL5000 DNA 相对分子质量标准标准;1.阳性样 2-1Asia1-FMDV P12A 基因 PCR 扩增结1 The amplification of Asia1-FMDV P12A粒 pAsiaI-His 的鉴定 引入 His 标签的 P12A 片段使用 A段构建了含有 His 标签的重组质粒laI 双酶切鉴定,结果出现与预期相
M.DL5000 DNA 相对分子质量标准;1.阳性样品图 2-3 重组质粒 prAsiaI-9His 酶切鉴定etically engineered recombinant plasmid PrAsia研究 RNA 病毒分子致病机制的有效途感染性常常比病毒 RNA 的要弱[49],且救的效率,病毒拯救效率低已经成为体种无需体外制备病毒 RNA 转录本,并A 聚合酶为基础的病毒拯救系统的建立研究病毒 RNA 基因结构和功能提供了于 T7 RNA 聚合酶的体内病毒拯救系统性克隆技术使得病毒蛋白与标签表位的
【参考文献】:
期刊论文
[1]型内嵌合口蹄疫病毒全长感染性cDNA克隆的构建[J]. 李平花,白兴文,卢增军,孙普,祁国财,韩成昊,刘在新. 微生物学报. 2012(01)
本文编号:3338716
【文章来源】:新疆农业大学新疆维吾尔自治区
【文章页数】:54 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
Asia1-FMDVP12A基因PCR扩增结果
.DL5000 DNA 相对分子质量标准标准;1.阳性样 2-1Asia1-FMDV P12A 基因 PCR 扩增结1 The amplification of Asia1-FMDV P12A粒 pAsiaI-His 的鉴定 引入 His 标签的 P12A 片段使用 A段构建了含有 His 标签的重组质粒laI 双酶切鉴定,结果出现与预期相
M.DL5000 DNA 相对分子质量标准;1.阳性样品图 2-3 重组质粒 prAsiaI-9His 酶切鉴定etically engineered recombinant plasmid PrAsia研究 RNA 病毒分子致病机制的有效途感染性常常比病毒 RNA 的要弱[49],且救的效率,病毒拯救效率低已经成为体种无需体外制备病毒 RNA 转录本,并A 聚合酶为基础的病毒拯救系统的建立研究病毒 RNA 基因结构和功能提供了于 T7 RNA 聚合酶的体内病毒拯救系统性克隆技术使得病毒蛋白与标签表位的
【参考文献】:
期刊论文
[1]型内嵌合口蹄疫病毒全长感染性cDNA克隆的构建[J]. 李平花,白兴文,卢增军,孙普,祁国财,韩成昊,刘在新. 微生物学报. 2012(01)
本文编号:3338716
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