长链非编码RNA TSPOAP1-AS1通过负调控Ⅰ型干扰素抗病毒天然免疫应答促进甲型流感病毒复制

发布时间：2021-08-17 12:43

　　甲型流感病毒（Influenza A Virus,IAV）是一种严重危害到人类和易感动物健康和安全的正粘科病毒。天然免疫系统是机体防御病原微生物入侵的第一道防线,其生物效应依赖于复杂的信号传导和动态的基因表达调控。长链非编码RNA（long non-coding RNA,lncRNA）是一类不编码蛋白质的RNA转录本。病毒可以利用宿主的lncRNA来调控细胞基因的表达模式,进而改变细胞内的微环境,为自身的复制和增殖创造有利条件。研究团队前期lncRNA组学数据提示IAV感染可以诱导宿主lncRNA TSPOAP1-AS1的表达。为了探究TSPOAP1-AS1对于IAV感染的影响及其机制,我们进行了以下研究工作。首先,检测了不同IAV毒株以及不同感染复数（multiplicity of infection,MOI）感染A549细胞后不同时间点TSPOAP1-AS1、Ifnb1和IAV M基因的表达,结果表明IAV感染A549细胞后宿主TSPOAP1-AS1的表达显著上调,并且其表达趋势与Ifnb1及病毒M基因的表达趋势一致,提示TSPOAP1-AS1的表达与IAV复制和细胞的抗病毒天然免... 

【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

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【学位级别】：硕士

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IAV感染诱导T

斓絋SPOAP1-AS1的PCR扩增条带，说明TSPOAP1-AS1是一个广谱表达的lncRNA。虽然没能精确定量每个细胞TSPOAP1-AS1的分子拷贝数，但是检测灵敏度较低的普通RT-PCR即可检出，说明TSPOAP1-AS1在细胞中的表达水平不是很低，是一个常规遍存的lncRNA。IAV感染A549、Caco-2和SH-SY5Y细胞后，TSPOAP1-AS1的表达显著增加，表达增加的程度与IAV在该细胞内复制的量呈明显正相关。而A172和THP-1感染IAV后TSPOAP1-AS1的表达没有显著变化。由于这两种细胞均有免疫细胞的属性，说明TSPOAP1-AS1在免疫细胞中的功能可能与其它类型的细胞不同。图2TSPOAP1-AS1在不同人源细胞系中的表达Figure2ExpressionofTSPOAP1-AS1indifferenthumancelllines不同细胞系感染IAV对TSPOAP1-AS1表达的影响。TheselectedhumancelllineswereexposedtoIAVinfectionfor24hours.TheexpressionofTSPOAP1-AS1wasexaminedbysemiquantitativeRT-PCR.3.3IAV感染导致TSPOAP1-AS1的核质比增加LncRNA分子机制研究的切入点选择与其亚细胞分布相关，所以需要明确TSPOAP1-AS1在细胞核或细胞质的分布情况，并掌握IAV感染后其核质分布的动态变化规律。研究结果表明TSPOAP1-AS1是一个核、质均有分布的lncRNA（图3.A），没有呈现出明显的细胞核或细胞质的单相分布。IAV感染后，TSPOAP1-AS1在表达量增加的基础之上其亚细胞分布也呈现动态的变化，即核质比进一步的显著增加，更多的TSPOAP1-AS1存在于细胞核中（图3.B）。上述结果提示在TSPOAP1-AS1互作分子筛选及相关分子机制的研究中可以重点着

PolyI:C诱导TSPOAP1-AS1表达


本文编号：3347789