牛血清淀粉样蛋白A时间分辨荧光免疫层析检测试剂盒研制
发布时间：2021-08-17 14:38
本研究旨在研制一种牛血清淀粉样蛋白A（SAA）时间分辨荧光免疫层析定量检测试剂盒,用于牛奶中SAA含量的临床快速检测。采用双抗体夹心法结合荧光免疫层析技术,在结合垫上固定荧光微球标记的抗SAA单克隆抗体及荧光微球标记的鸡IgY的混合物,在硝酸纤维素膜的检测区包被另一株抗SAA单克隆抗体,在硝酸纤维素膜的质控区包被山羊抗鸡IgY。经抗体原料筛选及荧光微球标记抗体的工艺优化后,绘制标准曲线并对试剂盒的空白限、精密度、稳定性及样本测试性能进行初步评估。结果显示,Medix SAA-2单克隆抗体包被与YBX SAA-3单克隆抗体标记为最适抗体配对原料。荧光微球标记抗体的工艺中,荧光微球与抗体的质量投料比为40∶1、偶联剂与荧光微球羧基摩尔比为2∶1的条件为最优组合。试剂盒标准曲线的四参数拟合曲线方程为y=（1.03947-0.00182）/[1+（x/12.08222）×（-0.84692）]+0.00182,线性相关系数R2=0.9997。研制的牛SAA检测试剂盒空白限为0.052 mg/L。精密度测试结果显示,批内变异系数<15%,批间变异系数<20%。室...
【文章来源】：中国畜牧兽医. 2020,47(04)北大核心
【文章页数】：8 页
【部分图文】：
荧光微球标记抗体的抗体用量筛选
荧光微球标记抗体的偶联剂用量筛选
图2 荧光微球标记抗体的偶联剂用量筛选表2 牛SAA检测试剂盒精密度结果Table 2 Precision of bovine SAA detection kit 浓度Concentration/(mg/L) 批内试验 Intra-assay 批间试验 Inter-assay 浓度平均值±标准差Mean concentration±SD/(mg/L) CV/% 浓度平均值±标准差Mean concentration±SD/(mg/L) CV/% 2 2.17±0.21 9.8 2.13±0.23 10.7 50 51.33±6.25 12.2 52.42±8.34 15.9
【参考文献】：
期刊论文
[1]乳房及肢蹄洁净度对荷斯坦奶牛体细胞数的影响[J]. 尤震晨,王夕虎,葛建军,赵番番,胥磊,王丹,张梦华,张晓雪,姜徽,黄锡霞. 中国畜牧兽医. 2019(08)
[2]抗菌肽NZ2114对奶牛乳房炎源金黄色葡萄球菌细胞膜、基因组和耐药性的影响[J]. 郭英,滕达,王秀敏,毛若雨,郝娅,范寰,王建华. 中国畜牧兽医. 2019(04)
[3]乳清急性期蛋白、乳酶作为奶牛隐性乳腺炎诊断指标的研究[J]. 薛永康,闫磊,张震,赵玉玺,虎啸,朱邯豫,王新庄. 中国兽医学报. 2018(08)
[4]奶牛乳房炎实验室诊断技术研究进展[J]. 高原,张博,姚伟. 现代畜牧兽医. 2018(04)
[5]CA19-9时间分辨荧光免疫层析检测方法的建立[J]. 王云龙,米亚双,李玉林,王继创,程蕾,闫生辉,邓黎黎. 生物工程学报. 2018(06)
[6]奶牛乳房炎病原菌诊断技术研究进展[J]. 王丹,杨峰,李新圃,罗金印,刘龙海,张哲,张亚茹,张莉莉,李宏胜. 中国畜牧兽医. 2017(06)
[7]奶牛乳房炎及其防治[J]. 刘来钦. 畜牧兽医科技信息. 2016(09)
[8]我国奶牛隐性乳房炎诊断方法的研究现状[J]. 尹柏双,付连军,郝景锋,宋永利,沙万里,李静姬. 黑龙江畜牧兽医. 2014(11)
[9]奶牛乳房炎主要病原菌基因检测技术研究进展[J]. 韩旭,武瑞,孙东波. 中国畜牧兽医. 2012(03)
[10]不同程度奶牛乳腺炎乳中血清淀粉样蛋白A的变化[J]. 张思学,彭立颖,王洪伟,高利. 中国兽医杂志. 2011(12)
硕士论文
[1]奶牛乳腺炎快速诊断技术的应用与隐性乳腺炎诊断指标的探索[D]. 薛永康.河南农业大学 2017
[2]奶牛乳房炎对乳酶活性、急性期蛋白含量的影响及其作为隐性乳房炎诊断指标的研究[D]. 杨德英.四川农业大学 2009
本文编号：3347953
【文章来源】：中国畜牧兽医. 2020,47(04)北大核心
【文章页数】：8 页
【部分图文】：
荧光微球标记抗体的抗体用量筛选
荧光微球标记抗体的偶联剂用量筛选
图2 荧光微球标记抗体的偶联剂用量筛选表2 牛SAA检测试剂盒精密度结果Table 2 Precision of bovine SAA detection kit 浓度Concentration/(mg/L) 批内试验 Intra-assay 批间试验 Inter-assay 浓度平均值±标准差Mean concentration±SD/(mg/L) CV/% 浓度平均值±标准差Mean concentration±SD/(mg/L) CV/% 2 2.17±0.21 9.8 2.13±0.23 10.7 50 51.33±6.25 12.2 52.42±8.34 15.9
【参考文献】：
期刊论文
[1]乳房及肢蹄洁净度对荷斯坦奶牛体细胞数的影响[J]. 尤震晨,王夕虎,葛建军,赵番番,胥磊,王丹,张梦华,张晓雪,姜徽,黄锡霞. 中国畜牧兽医. 2019(08)
[2]抗菌肽NZ2114对奶牛乳房炎源金黄色葡萄球菌细胞膜、基因组和耐药性的影响[J]. 郭英,滕达,王秀敏,毛若雨,郝娅,范寰,王建华. 中国畜牧兽医. 2019(04)
[3]乳清急性期蛋白、乳酶作为奶牛隐性乳腺炎诊断指标的研究[J]. 薛永康,闫磊,张震,赵玉玺,虎啸,朱邯豫,王新庄. 中国兽医学报. 2018(08)
[4]奶牛乳房炎实验室诊断技术研究进展[J]. 高原,张博,姚伟. 现代畜牧兽医. 2018(04)
[5]CA19-9时间分辨荧光免疫层析检测方法的建立[J]. 王云龙,米亚双,李玉林,王继创,程蕾,闫生辉,邓黎黎. 生物工程学报. 2018(06)
[6]奶牛乳房炎病原菌诊断技术研究进展[J]. 王丹,杨峰,李新圃,罗金印,刘龙海,张哲,张亚茹,张莉莉,李宏胜. 中国畜牧兽医. 2017(06)
[7]奶牛乳房炎及其防治[J]. 刘来钦. 畜牧兽医科技信息. 2016(09)
[8]我国奶牛隐性乳房炎诊断方法的研究现状[J]. 尹柏双,付连军,郝景锋,宋永利,沙万里,李静姬. 黑龙江畜牧兽医. 2014(11)
[9]奶牛乳房炎主要病原菌基因检测技术研究进展[J]. 韩旭,武瑞,孙东波. 中国畜牧兽医. 2012(03)
[10]不同程度奶牛乳腺炎乳中血清淀粉样蛋白A的变化[J]. 张思学,彭立颖,王洪伟,高利. 中国兽医杂志. 2011(12)
硕士论文
[1]奶牛乳腺炎快速诊断技术的应用与隐性乳腺炎诊断指标的探索[D]. 薛永康.河南农业大学 2017
[2]奶牛乳房炎对乳酶活性、急性期蛋白含量的影响及其作为隐性乳房炎诊断指标的研究[D]. 杨德英.四川农业大学 2009
本文编号：3347953
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