马立克病毒单克隆抗体的制备及MEQ蛋白的表达纯化鉴定

发布时间：2021-08-26 02:22

　　马立克病（Marek’s Disease,MD）是由马立克病病毒（Marek’s DiseaseVirus,MDV）感染鸡引起的一种高度接触性、传染性、淋巴组织增生性疾病,MD可引起免疫抑制并增加其他疾病易感性,给世界家禽业造成了巨大的经济损失。MDV主要以直径约85¹00 nm的六角形无囊膜裸病毒粒子存在于细胞中,是具有严格地细胞结合性的α疱疹病毒,完整的病毒粒子具有囊膜,径约为273⁴00nm,不具有细胞结合性,可脱离细胞独立生存,这是该病持续传播并爆发的主要原因。本研究通过纯化鸡胚成纤维细胞（CEF）培养的MDV超强毒株GX0101作为免疫原,制备特异识别MDV的单克隆抗体。GX0101感染CEF,96h后收集细胞,10mLPBS重悬,反复冻融3次,选用100kD的切向流超滤离心管浓缩得到峰尖病毒浓缩液至5mL,病毒浓缩液经0.22μL滤膜过滤后,通过Sepharose 4 Fast Flow（4FF）凝胶作为层析介质分离纯化病毒粒子,聚合酶链式反应（PCR）和实时荧光定量PCR（qRT-PCR）分析不同收集峰MDV病毒含量,并经过透射... 

【文章来源】：河南农业大学河南省

【文章页数】：70 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

MD临床症状进化图谱

Nitish Boodhoo, et al.（2016）图 2 MDV 爆发流行区Fig.2 The outbreak areaof MDV当前，60 年代初我国鸡场中就存在 MDV 毒株，有强毒株 vMDV（如 GA 株），后来

MDV基因组Fig.3ThegenomeofMDV

【参考文献】：
期刊论文
[1]猪繁殖与呼吸综合征病毒纯化方法的建立[J]. 田书苗,郅玉宝,王林建,乔松林,郭军庆,陈静,柴书军,张改平,杨艳艳.  中国兽医科学. 2016(05)
[2]马立克氏病病毒gE蛋白单克隆抗体的制备及鉴定[J]. 李巧玲,崔红玉,牛军伟,闫帅,高明,杨红亚,赵妍,王云峰.  中国兽医科学. 2013(05)
[3]抗Ⅰ型马立克氏病毒sorf2蛋白的多克隆抗体制备及其特异性鉴定[J]. 崔宁,苏帅,李久庆,赵鹏,李延鹏,丁家波,崔治中.  微生物学报. 2013(03)
[4]应用杆状病毒载体在昆虫细胞表达马立克氏病病毒Meq基因[J]. 韦平,LucyFLee.  中国兽医学报. 2000(03)
[5]马立克氏病病毒囊膜糖蛋白B抗原Ⅰ型特异性和群共同性决定簇的单克隆抗体[J]. 陆长明,崔治中,秦爱建,ＬｅｅＬＦ.  中国兽医学报. 1997(04)
[6]以杆状病毒为载体在昆虫细胞中表达鸡马立克病病毒糖蛋白B抗原基因[J]. 李毅,崔治中,隋德新.  病毒学报. 1994(01)
[7]用重组基因产物PP38作为抗原检测抗鸡马立克氏病毒抗体[J]. 秦爱建,万洪全,段玉友,崔治中.  中国兽医杂志. 1994(02)

博士论文
[1]马立克氏病病毒gB、gI、pp38基因的原核系统表达及其特异性单抗的研制和初步应用[D]. 韩凌霞.扬州大学 2001

硕士论文
[1]鸡马立克氏病病毒超强毒株RB1B pp38基因的真核表达及其特异性单克隆抗体的研制[D]. 刘明亮.扬州大学 2008



本文编号：3363352