GnRH主动免疫动物去势机制及其可逆性研究
发布时间：2021-09-02 05:01
促性腺激素释放激素（Gonadotropin-releasing hormone, GnRH）是动物体内重要生殖激素之一,其主要作用是调控动物生殖过程。GnRH由丘脑下部的GnRH神经元合成,以脉冲方式释放,通过垂体门脉循环进入垂体前叶,与垂体上的GnRH受体结合,调节促黄体激素（Luteinizing hormone, LH）和促卵泡激素（Follicle stimulating hormone, FSH）的合成和分泌,继而通过血液循环调节性腺类固醇激素的产生和雌雄配子的发生。GnRH主动免疫动物能降低动物体内FSH、LH含量,使性腺退化、萎缩甚至停止发育,影响其生殖功能从而达到去势的目的。利用GnRH主动免疫可以避免外科手术或药物去势对动物造成的应激、感染、药物残留等问题,并且不影响动物生产性能,也更符合动物福利的要求,是一种有望替代传统外科手术给动物去势的新方法。KiSS-1基因是KiSS基因的亚型,主要在中枢神经系统和胎盘表达,该基因编码的一组肽产物称为kisspeptins, GPR54（G protein-coupled receptor54）是kisspeptin的天然受...
【文章来源】：四川农业大学四川省 211工程院校
【文章页数】：125 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
Abstract
第一部分 文献综述
一、促性腺激素释放激素的结构及其生物学功能
1.1 GnRH的结构、合成分泌及在体内的分布
1.1.1 GnRH的结构
1.1.2 GnRH的合成与分泌
1.1.3 GnRH的在动物体内的分布
1.2 GnRH的生物学功能
1.2.1 GnRH受体的研究进展
1.2.2 GnRH的生物学功能
1.3 GnRH对下丘脑-垂体-性腺轴激素分泌调控的作用及其受到的反馈调控
1.3.1 GnRH对LH/FSH的调控
1.3.2 LH/FSH对性激素的调控及其反馈调控
1.3.3 性激素对GnRH的反馈调控
二、kisspeptin/GPR54系统研究进展
2.1 kisspeptin/GPR54系统简介
2.2 kisspeptin/GPR54系统对GnRH的调控作用
三、对动物进行去势的目的、方法和现状
3.1 对动物进行去势的目的和方法
3.2 对动物进行去势的现状
四、GnRH主动免疫去势研究进展
4.1 GnRH主动免疫去势概述
4.2 GnRH主动免疫去势研究现状
4.2.1 免疫原的使用
4.2.2 佐剂的使用
4.2.3 免疫程序、免疫剂量和免疫方法研究现状
4.2.4 对不同动物免疫效果研究现状
4.3 GnRH主动免疫去势机理研究进展
4.4 GnRH免疫去势应用前景
五、GnRH主动免疫可逆性研究现状
六、目前存在的问题和本研究的目的意义
第二部分 试验研究
第一章 GnRH免疫去势疫苗的制备
1 前言
2 材料与方法
2.1 试验材料
2.1.1 主要仪器
2.1.2 主要试剂
2.1.3 主要溶液配制方法
2.2 GnRH并列体合成
2.3 GnRH并列体二聚物合成
2.4 GnRH并列体二聚物与载体蛋白偶联及偶联产物鉴定
2.4.1 GnRH并列体二聚物与载体蛋白偶联
2.4.2 偶联产物SDS-PAGE鉴定
2.5 GnRH免疫去势疫苗的制备及性状检测
2.5.1 疫苗制备
2.5.2 疫苗物理性状检测
3 结果与分析
3.1 GnRH并列体合成
3.2 SDS-PAGE鉴定
3.3 物理性状检测
4 讨论
5 本章小结
第二章 GnRH主动免疫对雄鼠下丘脑-垂体-性腺轴的影响及其调控机制
1 前言
2 材料与方法
2.1 试验材料
2.1.1 主要仪器
2.1.2 主要试剂
2.1.3 主要溶液配制方法
2.2 试验动物选取、分组及处理
2.3 样品采集
2.4 指标测定及分析
2.4.1 血清抗体含量测定
2.4.2 血清激素含量测定
2.4.3 基因表达测定
2.5 统计学分析
3 结果与分析
3.1 RNA完整性
3.2 睾丸发育以及睾丸重量变化
3.3 血清抗GnRH抗体含量
3.4 血清激素含量
3.4.1 血清T含量
3.4.2 血清FSH含量
3.4.3 血清LH含量
3.5 下丘脑-垂体-睾丸轴生殖基因mRNA表达变化
3.5.1 下丘脑生殖相关基因mRNA表达变化
3.5.2 垂体生殖相关基因mRNA表达变化
3.5.3 睾丸生殖相关基因mRNA表达变化
4 讨论
5 本章小结
第三章 GnRH主动免疫对雌鼠下丘脑-垂体-性腺轴的影响及其调控机制
1 前言
2 材料与方法
2.1 试验材料
2.1.1 主要仪器
2.1.2 主要试剂
2.1.3 主要溶液配制方法
2.2 试验动物选取、分组及处理
2.3 样品采集
2.4 指标测定及分析
2.4.1 血清抗体含量测定
2.4.2 血清激素含量测定
2.4.3 基因表达测定
2.5 统计学分析
3 结果与分析
3.1 RNA完整性
3.2 生殖器官发育以及卵巢重量变化
3.3 血清抗GnRH抗体含量
3.4 血清激素含量
3.4.1 血清E_2含量
3.4.2 血清P_4含量
3.4.3 血清FSH含量
3.4.4 血清LH含量
3.5 下丘脑-垂体-卵巢轴生殖基因mRNA表达变化
3.5.1 下丘脑生殖相关基因mRNA表达变化
3.5.2 垂体生殖相关基因mRNA表达变化
3.5.3 卵巢生殖相关基因mRNA表达变化
4 讨论
5 本章小结
第四章 GnRH主动免疫雄性大鼠的可逆性研究
1 前言
2 材料与方法
2.1 试验材料
2.1.1 主要仪器
2.1.2 主要试剂
2.1.3 主要溶液配制方法
2.2 试验动物选取、分组及处理
2.3 样品采集
2.4 指标测定及分析
2.4.1 血清抗体含量测定
2.4.2 血清激素含量测定
2.4.3 基因表达测定
2.5 统计学分析
3 结果与分析
3.1 RNA完整性
3.2 睾丸发育以及睾丸、下丘脑和垂体重量变化
3.3 血清抗GnRH抗体含量
3.4 血清激素含量
3.4.1 血清T含量
3.4.2 血清FSH含量
3.4.3 血清LH含量
3.5 下丘脑-垂体-性腺轴生殖基因mRNA表达变化
3.5.1 下丘脑生殖相关基因mRNA表达变化
3.5.2 垂体生殖相关基因mRNA表达变化
3.5.3 睾丸生殖相关基因mRNA表达变化
4 讨论
5 本章小结
第五章 GnRH主动免疫雌性大鼠可逆性的研究
1 前言
2 材料与方法
2.1 试验材料
2.1.1 主要仪器
2.1.2 主要试剂
2.1.3 主要溶液配制方法
2.2 试验动物选取、分组及处理
2.3 样品采集
2.4 指标测定及分析
2.4.1 血清抗体含量测定
2.4.2 血清激素含量测定
2.4.3 基因表达测定
2.5 统计学分析
3 结果与分析
3.1 RNA完整性
3.2 生殖器官发育以及卵巢重量变化
3.3 血清抗GnRH抗体含量
3.4 血清激素含量
3.4.1 雌鼠血清E_2含量
3.4.2 雌鼠血清P_4含量
3.4.3 血清FSH含量
3.4.4 血清LH含量
3.5 下丘脑-垂体-性腺轴生殖基因mRNA表达变化
3.5.1 下丘脑生殖相关基因mRNA表达变化
3.5.2 垂体生殖相关基因mRNA表达变化
3.5.3 卵巢生殖相关基因mRNA表达变化
4 讨论
5 本章小结
第三部分 结论与展望
1 本研究的总体结果
2 本研究的结论
3 本研究的创新点
4 下一步工作的思路和方向
参考文献
攻读学位期间发表论文
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]生殖激素及其受体作为家畜产仔数候选基因的研究进展[J]. 桑雷,孙世坤,陈冬金,陈岩锋,谢喜平. 中国农学通报. 2012(26)
[2]雌激素受体α在小鼠海马中的表达研究[J]. 杨利平,吴耀松,刘辉,陈玉龙,刘明俊. 激光生物学报. 2012(04)
[3]维生素、矿物质与能量蛋白质水平对浙东白鹅母鹅繁殖性能、血液生殖激素浓度及生殖轴相关基因mRNA相对表达量的影响[J]. 赵鑫,邵涛,王亚琴,罗锦标,陈维虎,孙红霞,周卫东. 动物营养学报. 2012(06)
[4]去势对鸡肉品质及风味的影响[J]. 段金琳,邵凡,凌遥,李俊英,李红伟,吴常信. 中国家禽. 2012(02)
[5]家畜GnRH免疫去势的研究进展[J]. 耿艳艳,曾宪垠. 黑龙江畜牧兽医. 2011(07)
[6]GnRH-A免疫对GnRHR、FSH-β和LH-β表达及生物信息学特性的影响[J]. 魏锁成,韦敏,巩转娣. 中国免疫学杂志. 2011(03)
[7]雷山小香羊促黄体素β亚基基因SphⅠ酶切多态性分析[J]. 朱红刚,田兴贵,杨正梅,王家鹏,杨云,吴飞,罗终菊,唐静,主性,刘若余. 西南农业学报. 2011(01)
[8]雌激素和雄激素对鸡成骨细胞增殖、凋亡、细胞周期及其受体mRNA转录的影响[J]. 陈秀霞,邓益锋,周振雷,朱捷,李晓兰,陈金丽,陶庆树,侯加法. 南京农业大学学报. 2010(05)
[9]哺乳动物繁殖季节性相关基因的研究进展[J]. 储明星,冯涛,王西筠,张新珍,刘雪云,乔念民,郭志勇,刘新朋. 中国畜牧兽医. 2010(06)
[10]贵州黑山羊促黄体素β基因多态性及其与产羔数的关系[J]. 黄勤华,张超,胡万林,王太明,刘若余. 贵州农业科学. 2010(06)
博士论文
[1]GnRH-A免疫对家兔生殖功能的调节作用及机理研究[D]. 魏锁成.甘肃农业大学 2010
硕士论文
[1]大鼠颗粒细胞InhibinA抑制FSHR表达抑制FSH的作用[D]. 谭萍.西南大学 2008
[2]外源性GnRH对小鼠下丘脑中GnRH表达及后代性别的影响[D]. 李耀辉.西北农林科技大学 2007
[3]KiSS-1基因在人绒毛膜癌细胞株上的表达及调控[D]. 孙晨.华中科技大学 2006
[4]OT和GnRH在不同生理期奶山羊下丘脑—垂体—卵巢轴中的分布[D]. 张艳.西北农林科技大学 2005
本文编号：3378364
【文章来源】：四川农业大学四川省 211工程院校
【文章页数】：125 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
Abstract
第一部分 文献综述
一、促性腺激素释放激素的结构及其生物学功能
1.1 GnRH的结构、合成分泌及在体内的分布
1.1.1 GnRH的结构
1.1.2 GnRH的合成与分泌
1.1.3 GnRH的在动物体内的分布
1.2 GnRH的生物学功能
1.2.1 GnRH受体的研究进展
1.2.2 GnRH的生物学功能
1.3 GnRH对下丘脑-垂体-性腺轴激素分泌调控的作用及其受到的反馈调控
1.3.1 GnRH对LH/FSH的调控
1.3.2 LH/FSH对性激素的调控及其反馈调控
1.3.3 性激素对GnRH的反馈调控
二、kisspeptin/GPR54系统研究进展
2.1 kisspeptin/GPR54系统简介
2.2 kisspeptin/GPR54系统对GnRH的调控作用
三、对动物进行去势的目的、方法和现状
3.1 对动物进行去势的目的和方法
3.2 对动物进行去势的现状
四、GnRH主动免疫去势研究进展
4.1 GnRH主动免疫去势概述
4.2 GnRH主动免疫去势研究现状
4.2.1 免疫原的使用
4.2.2 佐剂的使用
4.2.3 免疫程序、免疫剂量和免疫方法研究现状
4.2.4 对不同动物免疫效果研究现状
4.3 GnRH主动免疫去势机理研究进展
4.4 GnRH免疫去势应用前景
五、GnRH主动免疫可逆性研究现状
六、目前存在的问题和本研究的目的意义
第二部分 试验研究
第一章 GnRH免疫去势疫苗的制备
1 前言
2 材料与方法
2.1 试验材料
2.1.1 主要仪器
2.1.2 主要试剂
2.1.3 主要溶液配制方法
2.2 GnRH并列体合成
2.3 GnRH并列体二聚物合成
2.4 GnRH并列体二聚物与载体蛋白偶联及偶联产物鉴定
2.4.1 GnRH并列体二聚物与载体蛋白偶联
2.4.2 偶联产物SDS-PAGE鉴定
2.5 GnRH免疫去势疫苗的制备及性状检测
2.5.1 疫苗制备
2.5.2 疫苗物理性状检测
3 结果与分析
3.1 GnRH并列体合成
3.2 SDS-PAGE鉴定
3.3 物理性状检测
4 讨论
5 本章小结
第二章 GnRH主动免疫对雄鼠下丘脑-垂体-性腺轴的影响及其调控机制
1 前言
2 材料与方法
2.1 试验材料
2.1.1 主要仪器
2.1.2 主要试剂
2.1.3 主要溶液配制方法
2.2 试验动物选取、分组及处理
2.3 样品采集
2.4 指标测定及分析
2.4.1 血清抗体含量测定
2.4.2 血清激素含量测定
2.4.3 基因表达测定
2.5 统计学分析
3 结果与分析
3.1 RNA完整性
3.2 睾丸发育以及睾丸重量变化
3.3 血清抗GnRH抗体含量
3.4 血清激素含量
3.4.1 血清T含量
3.4.2 血清FSH含量
3.4.3 血清LH含量
3.5 下丘脑-垂体-睾丸轴生殖基因mRNA表达变化
3.5.1 下丘脑生殖相关基因mRNA表达变化
3.5.2 垂体生殖相关基因mRNA表达变化
3.5.3 睾丸生殖相关基因mRNA表达变化
4 讨论
5 本章小结
第三章 GnRH主动免疫对雌鼠下丘脑-垂体-性腺轴的影响及其调控机制
1 前言
2 材料与方法
2.1 试验材料
2.1.1 主要仪器
2.1.2 主要试剂
2.1.3 主要溶液配制方法
2.2 试验动物选取、分组及处理
2.3 样品采集
2.4 指标测定及分析
2.4.1 血清抗体含量测定
2.4.2 血清激素含量测定
2.4.3 基因表达测定
2.5 统计学分析
3 结果与分析
3.1 RNA完整性
3.2 生殖器官发育以及卵巢重量变化
3.3 血清抗GnRH抗体含量
3.4 血清激素含量
3.4.1 血清E_2含量
3.4.2 血清P_4含量
3.4.3 血清FSH含量
3.4.4 血清LH含量
3.5 下丘脑-垂体-卵巢轴生殖基因mRNA表达变化
3.5.1 下丘脑生殖相关基因mRNA表达变化
3.5.2 垂体生殖相关基因mRNA表达变化
3.5.3 卵巢生殖相关基因mRNA表达变化
4 讨论
5 本章小结
第四章 GnRH主动免疫雄性大鼠的可逆性研究
1 前言
2 材料与方法
2.1 试验材料
2.1.1 主要仪器
2.1.2 主要试剂
2.1.3 主要溶液配制方法
2.2 试验动物选取、分组及处理
2.3 样品采集
2.4 指标测定及分析
2.4.1 血清抗体含量测定
2.4.2 血清激素含量测定
2.4.3 基因表达测定
2.5 统计学分析
3 结果与分析
3.1 RNA完整性
3.2 睾丸发育以及睾丸、下丘脑和垂体重量变化
3.3 血清抗GnRH抗体含量
3.4 血清激素含量
3.4.1 血清T含量
3.4.2 血清FSH含量
3.4.3 血清LH含量
3.5 下丘脑-垂体-性腺轴生殖基因mRNA表达变化
3.5.1 下丘脑生殖相关基因mRNA表达变化
3.5.2 垂体生殖相关基因mRNA表达变化
3.5.3 睾丸生殖相关基因mRNA表达变化
4 讨论
5 本章小结
第五章 GnRH主动免疫雌性大鼠可逆性的研究
1 前言
2 材料与方法
2.1 试验材料
2.1.1 主要仪器
2.1.2 主要试剂
2.1.3 主要溶液配制方法
2.2 试验动物选取、分组及处理
2.3 样品采集
2.4 指标测定及分析
2.4.1 血清抗体含量测定
2.4.2 血清激素含量测定
2.4.3 基因表达测定
2.5 统计学分析
3 结果与分析
3.1 RNA完整性
3.2 生殖器官发育以及卵巢重量变化
3.3 血清抗GnRH抗体含量
3.4 血清激素含量
3.4.1 雌鼠血清E_2含量
3.4.2 雌鼠血清P_4含量
3.4.3 血清FSH含量
3.4.4 血清LH含量
3.5 下丘脑-垂体-性腺轴生殖基因mRNA表达变化
3.5.1 下丘脑生殖相关基因mRNA表达变化
3.5.2 垂体生殖相关基因mRNA表达变化
3.5.3 卵巢生殖相关基因mRNA表达变化
4 讨论
5 本章小结
第三部分 结论与展望
1 本研究的总体结果
2 本研究的结论
3 本研究的创新点
4 下一步工作的思路和方向
参考文献
攻读学位期间发表论文
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]生殖激素及其受体作为家畜产仔数候选基因的研究进展[J]. 桑雷,孙世坤,陈冬金,陈岩锋,谢喜平. 中国农学通报. 2012(26)
[2]雌激素受体α在小鼠海马中的表达研究[J]. 杨利平,吴耀松,刘辉,陈玉龙,刘明俊. 激光生物学报. 2012(04)
[3]维生素、矿物质与能量蛋白质水平对浙东白鹅母鹅繁殖性能、血液生殖激素浓度及生殖轴相关基因mRNA相对表达量的影响[J]. 赵鑫,邵涛,王亚琴,罗锦标,陈维虎,孙红霞,周卫东. 动物营养学报. 2012(06)
[4]去势对鸡肉品质及风味的影响[J]. 段金琳,邵凡,凌遥,李俊英,李红伟,吴常信. 中国家禽. 2012(02)
[5]家畜GnRH免疫去势的研究进展[J]. 耿艳艳,曾宪垠. 黑龙江畜牧兽医. 2011(07)
[6]GnRH-A免疫对GnRHR、FSH-β和LH-β表达及生物信息学特性的影响[J]. 魏锁成,韦敏,巩转娣. 中国免疫学杂志. 2011(03)
[7]雷山小香羊促黄体素β亚基基因SphⅠ酶切多态性分析[J]. 朱红刚,田兴贵,杨正梅,王家鹏,杨云,吴飞,罗终菊,唐静,主性,刘若余. 西南农业学报. 2011(01)
[8]雌激素和雄激素对鸡成骨细胞增殖、凋亡、细胞周期及其受体mRNA转录的影响[J]. 陈秀霞,邓益锋,周振雷,朱捷,李晓兰,陈金丽,陶庆树,侯加法. 南京农业大学学报. 2010(05)
[9]哺乳动物繁殖季节性相关基因的研究进展[J]. 储明星,冯涛,王西筠,张新珍,刘雪云,乔念民,郭志勇,刘新朋. 中国畜牧兽医. 2010(06)
[10]贵州黑山羊促黄体素β基因多态性及其与产羔数的关系[J]. 黄勤华,张超,胡万林,王太明,刘若余. 贵州农业科学. 2010(06)
博士论文
[1]GnRH-A免疫对家兔生殖功能的调节作用及机理研究[D]. 魏锁成.甘肃农业大学 2010
硕士论文
[1]大鼠颗粒细胞InhibinA抑制FSHR表达抑制FSH的作用[D]. 谭萍.西南大学 2008
[2]外源性GnRH对小鼠下丘脑中GnRH表达及后代性别的影响[D]. 李耀辉.西北农林科技大学 2007
[3]KiSS-1基因在人绒毛膜癌细胞株上的表达及调控[D]. 孙晨.华中科技大学 2006
[4]OT和GnRH在不同生理期奶山羊下丘脑—垂体—卵巢轴中的分布[D]. 张艳.西北农林科技大学 2005
本文编号：3378364
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