围产前期饲喂酵母硒对分娩奶牛血浆蛋白组学的影响
发布时间：2021-09-03 20:03
围产期是奶牛生产繁殖中的重要时期,通常是指分娩前3周至分娩后3周的这一阶段,能量负平衡、分娩、泌乳等导致该阶段奶牛容易发生各种疾病。硒作为人和动物必需的一种微量元素,通过硒蛋白的形式发挥抗氧化和抗炎功能,在奶牛健康维护中发挥重要作用。本试验筛选24头体况相近的奶牛,随机分为两组（C组和T组）,C组饲喂基础日粮,T组在预产期前21天开始在每千克干物质（dry matter,DM）日粮中添加硒0.3mg直至分娩当天。在奶牛分娩后6小时内,收集尾静脉血浆,提取蛋白并富集低丰度蛋白,酶解后对肽段进行iTRAQ标记,然后利用LC-MS/MS进行质谱分析,最后获取两组间的差异丰度蛋白并进行生物信息学分析。为验证蛋白组学数据可靠性,用ELISA方法对其中3个差异丰度蛋白进行定量分析。本研究的结果如下:研究一:本试验采用iTRAQ定量蛋白组学技术在分娩奶牛血浆中鉴定出蛋白质542个,这些蛋白质的等电点为5-12,相对分子质量集中在10-60kD。按蛋白质T/C值大于1.2或者小于0.83且P<0.05的标准筛选差异表达蛋白质,结果显示差异丰度蛋白质有48种,包括14种上调蛋白和34种下调蛋白,其...
【文章来源】：四川农业大学四川省 211工程院校
【文章页数】：81 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
iTRAQ技术常规步骤Fig.1iTRAQroutinesteps
图 2-1 血浆低丰度蛋白富集后 SDS-PAGE 图Fig 2-1. The SDS-PAGE result of enriching plasma low abundance pr测情况用具有高质量精度、高分辨率的 Q Exactive 质谱仪，在数据好的质量偏差，并最终获得高质量的 MS1 和 MS2 图谱。如段的质量偏差主要分布在 10ppm 以内，说明鉴定结果准确可T 分析工具对 MS 图谱数据进行分析，获得每张 MS2 图谱的得 的 MASCOT 得分较为理想，约 77.79%以上的肽段得分在位数为 27.75 分。每一套 iTRAQ 数据在定性分析工作中均使准，结合所得的优秀肽段得分分布情况，进一步说明 MS 实验定量方面的质控，如图 2-4 所示，等量标记的两组样品中大部近 1，Basepeak 图是在串联质谱过程中将每个时间点质谱检
图 2-2 肽段离子质量偏差分布坐标为肽段离子理论质荷比和质谱实验测得质荷比的质量偏差，纵坐标为 MASCO得分。Fig.2-2 Mass error distribution (ppm)ote: The abscissa is the mass deviation of the peptide mass theoretical mass-to-charge rass-to-charge ratio measured by the mass spectrometry experiment; the ordinate is the MApeptide score.
【参考文献】：
期刊论文
[1]蛋白质组学技术及其在中药作用机制研究中的应用[J]. 辛萍,匡海学,李晓亮,王宇,张本梅,布赫,王知斌,孟永海,王艳宏,王秋红. 中国中药杂志. 2018(05)
[2]iTRAQ技术在医药领域的研究进展[J]. 王国佐,龚盛强,杨梅,兰斌,葛金文. 现代生物医学进展. 2017(33)
[3]动物科学中的蛋白质组学技术应用[J]. 王欣,唐婕. 畜牧与饲料科学. 2017(11)
[4]钙结合蛋白S100A13与肿瘤关系的研究进展[J]. 王奕平,周家华. 东南大学学报(医学版). 2017(04)
[5]奶牛脂肪肝产生的原因、危害、临床症状及其防治[J]. 王彦涛. 现代畜牧科技. 2017(07)
[6]不同泌乳阶段奶牛血清矿物元素含量的变化[J]. 秦敏,张辉,史彬林,郭晓宇,闫素梅. 饲料工业. 2017(11)
[7]APT5A1在大肠癌中的表达及意义[J]. 谢春英,徐雪松,杨照微,何成彦,黄丽红,王海,周劲松. 中国实验诊断学. 2016(12)
[8]围产后期奶牛的血液生化指标特征[J]. 徐闯,于洪江,沈泰钰,张子扬,高三思,朱奎玲,黄宝银,杨威,巩和秋,于延海. 中国兽医学报. 2016(08)
[9]围产期奶牛的生理变化[J]. 胡熙民. 现代畜牧科技. 2016(03)
[10]围产期奶牛的生理特点及营养代谢特征研究进展[J]. 杜兵耀,马晨,杨开伦,余雄. 乳业科学与技术. 2016(01)
硕士论文
[1]甘氨酸对奶牛乳腺上皮细胞增殖、凋亡及免疫因子基因表达影响的研究[D]. 汤明惠.内蒙古农业大学 2014
[2]奶牛围产期血清氧化应激与微量元素含量变化的研究[D]. 张家铭.扬州大学 2014
[3]黄冈市围产期奶牛添加锌锰硒和二氢吡啶的研究[D]. 隋晨.华中农业大学 2013
[4]围产期奶牛血清蛋白质组学的初步研究[D]. 李珊珊.中国农业科学院 2011
[5]有机硒对奶牛产奶性能、营养物质消化及血液生化指标的影响[D]. 王登峰.内蒙古农业大学 2011
本文编号：3381773
【文章来源】：四川农业大学四川省 211工程院校
【文章页数】：81 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
iTRAQ技术常规步骤Fig.1iTRAQroutinesteps
图 2-1 血浆低丰度蛋白富集后 SDS-PAGE 图Fig 2-1. The SDS-PAGE result of enriching plasma low abundance pr测情况用具有高质量精度、高分辨率的 Q Exactive 质谱仪，在数据好的质量偏差，并最终获得高质量的 MS1 和 MS2 图谱。如段的质量偏差主要分布在 10ppm 以内，说明鉴定结果准确可T 分析工具对 MS 图谱数据进行分析，获得每张 MS2 图谱的得 的 MASCOT 得分较为理想，约 77.79%以上的肽段得分在位数为 27.75 分。每一套 iTRAQ 数据在定性分析工作中均使准，结合所得的优秀肽段得分分布情况，进一步说明 MS 实验定量方面的质控，如图 2-4 所示，等量标记的两组样品中大部近 1，Basepeak 图是在串联质谱过程中将每个时间点质谱检
图 2-2 肽段离子质量偏差分布坐标为肽段离子理论质荷比和质谱实验测得质荷比的质量偏差，纵坐标为 MASCO得分。Fig.2-2 Mass error distribution (ppm)ote: The abscissa is the mass deviation of the peptide mass theoretical mass-to-charge rass-to-charge ratio measured by the mass spectrometry experiment; the ordinate is the MApeptide score.
【参考文献】：
期刊论文
[1]蛋白质组学技术及其在中药作用机制研究中的应用[J]. 辛萍,匡海学,李晓亮,王宇,张本梅,布赫,王知斌,孟永海,王艳宏,王秋红. 中国中药杂志. 2018(05)
[2]iTRAQ技术在医药领域的研究进展[J]. 王国佐,龚盛强,杨梅,兰斌,葛金文. 现代生物医学进展. 2017(33)
[3]动物科学中的蛋白质组学技术应用[J]. 王欣,唐婕. 畜牧与饲料科学. 2017(11)
[4]钙结合蛋白S100A13与肿瘤关系的研究进展[J]. 王奕平,周家华. 东南大学学报(医学版). 2017(04)
[5]奶牛脂肪肝产生的原因、危害、临床症状及其防治[J]. 王彦涛. 现代畜牧科技. 2017(07)
[6]不同泌乳阶段奶牛血清矿物元素含量的变化[J]. 秦敏,张辉,史彬林,郭晓宇,闫素梅. 饲料工业. 2017(11)
[7]APT5A1在大肠癌中的表达及意义[J]. 谢春英,徐雪松,杨照微,何成彦,黄丽红,王海,周劲松. 中国实验诊断学. 2016(12)
[8]围产后期奶牛的血液生化指标特征[J]. 徐闯,于洪江,沈泰钰,张子扬,高三思,朱奎玲,黄宝银,杨威,巩和秋,于延海. 中国兽医学报. 2016(08)
[9]围产期奶牛的生理变化[J]. 胡熙民. 现代畜牧科技. 2016(03)
[10]围产期奶牛的生理特点及营养代谢特征研究进展[J]. 杜兵耀,马晨,杨开伦,余雄. 乳业科学与技术. 2016(01)
硕士论文
[1]甘氨酸对奶牛乳腺上皮细胞增殖、凋亡及免疫因子基因表达影响的研究[D]. 汤明惠.内蒙古农业大学 2014
[2]奶牛围产期血清氧化应激与微量元素含量变化的研究[D]. 张家铭.扬州大学 2014
[3]黄冈市围产期奶牛添加锌锰硒和二氢吡啶的研究[D]. 隋晨.华中农业大学 2013
[4]围产期奶牛血清蛋白质组学的初步研究[D]. 李珊珊.中国农业科学院 2011
[5]有机硒对奶牛产奶性能、营养物质消化及血液生化指标的影响[D]. 王登峰.内蒙古农业大学 2011
本文编号：3381773
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