犬瘟热病毒抗体液相芯片检测方法的建立及评价

发布时间：2021-09-05 11:20

　　实验犬是目前教学和科学研究工作中最广泛应用的动物之一，每年有大量的实验犬用于药物安全性评价和体外循环研究等试验。质量控制是目前实验犬标准化过程中面临的一大难题。我国国家标准GB14922.2-2011《实验动物微生物学等级及监测》中规定犬瘟热病毒为实验犬必检项目。而且无特定病原体实验犬不能免疫接种犬瘟热疫苗，必须为犬瘟热病毒抗体阴性。目前，能够检测犬血清抗体水平的技术主要有免疫荧光技术、酶联免疫吸附试验等方法。这些方法有一个共同的缺点：一次试验只能检测一种病原抗体水平，无法实现对多种病原抗体的实时监测。液相芯片是一种新型生物芯片技术平台，具有操作简便、敏感性强、灵活多变、检测范围广等显著特点，其最大的优势是可以同时对同一血清样品中多种病原抗体进行定性分析，实现多种病原抗体的实时监测。本研究利用小鼠IgG与荧光微球D6偶联，通过偶联验证试验，评估偶联效率，优化偶联过程的主要影响因素。最终确定偶联过程中：二硫苏糖醇（1M，DTT）使用量为2μL，反应时间为1h；4-（N-马来酰亚胺甲基）环己烷-1-羧基磺酸基琥珀酰亚胺酯钠盐（2mg/L，sulfo-SMCC）使用量为2μL，反应时间为1h... 

【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：71 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

液相芯片技术原理图

A1孔仪器设置Fig.1.1InstrumentsettingsofA1

A2孔仪器设置

【参考文献】：
期刊论文
[1]液相芯片技术检测痰湿体质人群TNF-α、IL-6、CRP及MCP-1的表达研究[J]. 郑璐玉,杨玲玲,李玲孺,井慧如,王济,王前飞,王琦.  中国中西医结合杂志. 2013(07)
[2]犬瘟热病毒间接免疫酶组化检测方法的建立[J]. 刘雯,马丽敏,李琳,何晔,李叶,任秀梅,靳朝,夏志平.  中国预防兽医学报. 2011(02)
[3]斑点杂交法检测犬瘟热病毒[J]. 张永霞,王金福,张似青.  中国畜牧兽医. 2010(12)
[4]犬瘟热诊断方法的研究进展[J]. 王好,张宇,钱爱东.  畜牧与饲料科学. 2009(10)
[5]抗犬瘟热病毒荧光标记单抗的制备和初步鉴定[J]. 苏建青,褚秀玲,杨松涛,夏咸柱,岳妙姝.  安徽农业科学. 2009(08)

硕士论文
[1]猴源犬瘟热病毒体内分布的比较病理学研究[D]. 刘雯.吉林大学 2011
[2]人血清肿瘤标志物液相芯片检测系统的研制[D]. 彭娟.南方医科大学 2007



本文编号：3385252