八联重组痘苗病毒天坛株的构建及筛选

发布时间：2021-09-05 17:55

　　1982年，痘苗病毒（WR株）作为外源基因表达载体首次正确表达了疱疹病毒的TK基因，引起了科研学者们的极大关注。1984年，中国自主研究分离了独有的痘苗病毒天坛株，用于表达外源基因，同时亦是防患再次出现天花的应急疫苗毒株。痘苗病毒因基因容量大，同时可插入大片段的外源基因，因此，可用于构建多联疫苗。随着社会发展，人们面临着越来越多疾病。与此同时，疫苗的接种量也随之增加，造成了资源浪费以及感染机率的增加等诸多问题。多联疫苗减少了疫苗的接种次数，降低了副反应的发生率，同时避免了多种疫苗之间的相互作用。本实验以痘苗病毒天坛株为基础，分别以TC7L-TK2L和TJ2R侧翼基因为重组臂，通过重组DNA技术构建多联重组痘苗病毒疫苗。其中筛选的外源基因包括黄热病毒E基因、汉坦病毒S基因、克里米亚-刚果出血热病毒M基因、炭疽杆菌POAX2基因、埃博拉病毒S基因、马尔堡病毒G基因、辛诺柏病毒G2基因及非洲欧尼恩病毒E2基因。设计构建含有重组臂、外源基因、启动子及标记基因的穿梭质粒。在脂质体的作用下，穿梭质粒进入感染痘苗病毒的细胞，与病毒基因组发生基因重组。待细胞病变后，通过倒置荧光显微镜筛选具有荧光噬斑的... 

【文章来源】：吉林农业大学吉林省

【文章页数】：58 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
前言
第一篇 文献综述
    1.1 痘病毒的复制循环
    1.2 痘病毒的细胞入侵
    1.3 痘苗病毒与细胞的膜融合
    1.4 感染痘病毒小鼠体内 NK 细胞反应
    1.5 激活有关 NK 细胞识别感染痘病毒的细胞受体
    1.6 痘病毒和 MHC-I 表达调节和其他抑制配体
    1.7 鼠痘病毒抵抗力的遗传基因
第二篇 研究内容
    第一章 穿梭载体质粒的构建
        1.1 材料与方法
        1.2 结果
        1.3 讨论
        1.4 小结
    第二章 重组痘苗病毒的构建
        2.1 材料与方法
        2.2 结果
        2.3 讨论
        2.4 小结
    第三章 重组痘苗病毒的鉴定
        3.1 材料与方法
        3.2 结果
        3.3 讨论
        3.4 小结
结论
参考文献
作者简介
附录
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]缺失E3L基因减毒天坛株痘苗病毒的构建及筛选[J]. 王宇航,李霄,王浩然,阚式绂,王卓越,齐延新,吴娜,杜寿文,金宁一.  中国兽医学报. 2011(11)
[2]马尔堡病毒核蛋白的原核表达及纯化[J]. 王皓婷,王水明,史子学,邵东华,魏建超,刘学辉,王志亮,王雪敏,马志永.  中国动物检疫. 2011(10)
[3]重组黄热病毒E蛋白结构域Ⅲ作为亚单位疫苗的抗原性和免疫原性[J]. 杨鹏,黄莺,刘珊,孙志伟,俞炜源.  生物技术通讯. 2009(05)
[4]新疆出血热病毒糖蛋白基因的克隆与表达[J]. 马本江,杭长寿,赵云,王世文,解燕乡.  病毒学报. 2002(03)

博士论文
[1]减毒痘苗病毒天坛株的构建、致病性及免疫原性研究[D]. 阚式绂.吉林大学 2013



本文编号：3385814