不同日龄仔猪胃肠道Obestatin蛋白含量及GHRL基因转录水平测定

发布时间：2021-09-27 23:11

　　Obestatin是一种Ghrelin相关肽,来源于胃生长素前体肽（GHRL）基因。Obestatin的分子量为2516.3Da,有23个氨基酸残基,位于GHRL的76-98多肽片段。Obestatin的氨基酸区域具有高度保守性,其生物活性依赖于C端的酞胺化修饰。Obestatin在鼠胃肠道、胰腺、睾丸间质细胞、下丘脑、脑垂体等部位均有表达,可以和（G-蛋白偶联受体39）GPR39结合,能够抑制动物饥饿感、食物摄取、胃排空、空肠的蠕动及体重的增加。此外,Obestatin还能够抑制饮水、保护心肌细胞、调节胰岛素抵抗、缓解焦虑、促进睡眠、提高学习及空间记忆能力等。Obestatin与Ghrelin是由相同的基因、mRNA和相同的前体多肽衍生的,但两者的生物学效应表现出相互拮抗的作用,因此Obestatin称认为是Ghrelin的阴阳活性多肽或生物学拮抗剂。Obestatin的发现丰富了翻译后修饰在基因表达调控过程中的作用,具有很重要的研究意义。Obestatin已经被证明在能量稳态和体质量控制的复杂机制中起着很重要的生物学效应,而Obestatin在猪消化系统中的作用研究以及表达差异还很... 

【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：56 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
缩略词表
第一部分 文献综述
    1 Obestatin研究进展
        1.1 Obestatin的发现
        1.2 Obestatin的生物学特征
        1.3 Obestatin的受体
        1.4 Obestatin的分布
        1.5 Obestatin的生物学功能
            1.5.1 Obestatin对消化系统的影响
            1.5.2 Obestatin对神经系统的影响
            1.5.3 Obestatin对内分泌系统的影响
            1.5.4 Obestatin对细胞功能的影响
            1.5.5 Obestatin与疾病
    2 Obestatin的研究展望
第二部分 实验研究部分
    1 实验材料
        1.1 实验动物
        1.2 实验试剂及耗材
        1.3 主要仪器设备
        1.4 主要溶液及配制
            1.4.1 ELISA实验试剂准备
            1.4.2 荧光定量实验试剂准备
    2 实验方法
        2.1 实验器具的准备
        2.2 实验动物的准备
        2.3 采取组织
        2.4 ELISA实验
            2.4.1 蛋白样品制备
            2.4.2 二辛可酸法(BCA)法测定总蛋白浓度
            2.4.3 ELISA实验步骤
        2.5 荧光定量
            2.5.1 引物设计与合成
            2.5.2 组织总RNA提取
            2.5.3 反转录PCR
            2.5.4 荧光定量PCR
        2.6 统计学分析
    3 结果与分析
        3.1 Obestatin蛋白表达浓度测定
            3.1.1 BCA总蛋白浓度的测定
            3.1.2 ELISA实验结果
        3.2 相对荧光定量Q-PCR结果
            3.2.1 组织总RNA提取效果
            3.2.2 引物设计可靠性检测
            3.2.3 Q-PCR结果
    4 讨论
        4.1 不同日龄仔猪胃肠道Obestatin浓度的比较
        4.2 仔猪不同胃肠道组织Obestatin浓度的比较
        4.3 不同日龄仔猪胃肠道GHRL mRNA表达水平的比较
        4.4 仔猪不同胃肠道组织GHRL mRNA表达水平的比较
        4.5 Obestatin蛋白与GHRL基因的表达分析
        4.6 实验动物的选取以及实验技术
    5 结论
参考文献
附录
致谢



本文编号：3410790