以重组无乳链球菌GapC 1-150 作抗原的牛血清抗体间接ELISA检测方法建立

发布时间：2021-09-29 06:34

　　为了检测奶牛乳腺炎无乳链球菌GapC1-150抗原相关疫苗免疫血清抗体,我们用重组蛋白GapC1-150作为包被抗原建立了间接ELISA牛血清抗体检测方法。通过方阵法确定包被抗原浓度和血清稀释度;通过对阴性牛血清和免疫牛血清的OD450值检测分析确定cut-off值;通过与多种抗原免疫血清和病原感染血清进行检测确定该方法具有良好的特异性;通过对阳性和阴性血清倍比稀释检测确定该检测方法灵敏性较好,并对临床收集的牛血清样本进行了检测。以上结果表明,所建立的间接ELISA检测方法可用于GapC1-150抗原相关疫苗免疫血清抗体检测。 

【文章来源】：黑龙江八一农垦大学学报. 2020,32(06)

【文章页数】：7 页

【部分图文】：

ELISA的cut-off值确定

用方阵法以不同浓度的包被抗原与不同稀释度的阴、阳血清做间接ELISA，测定OD450值，求P/N值。当抗原包被浓度为2.5μg·m L-1、血清稀释1/1 000时，P/N值最大。结果详见表1。2.3 间接ELISA反应条件优化

用建立的ELISA检测方法分别对重组e Gap C1-150、GIT、Isd B、Trap、p ET32a、金葡菌Wood46、无乳链球菌HLJ57、大肠杆菌腹泻牛血清、牛副结核阳性血清、牛布氏杆菌阳性血清进行检测。结果显示，g Gap C1-150作为包被抗原所建立的间接ELISA检测方法，检测到e Gap C1-150蛋白免疫血清、GIT免疫血清阳性，其他血清均呈阴性，说明与其他血清无交叉反应。结果详见图4。图3 ELISA的cut-off值确定

【参考文献】：
期刊论文
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硕士论文
[1]乳房链球菌GapC蛋白的表达及免疫保护研究[D]. 夏春雷.黑龙江八一农垦大学 2008



本文编号：3413231