丹参多糖对小鼠免疫性肝损伤的炎症调节机制研究
发布时间：2021-09-30 10:41
现代药理研究发现丹参有效成分具有抗炎和免疫调节作用,丹参多糖对免疫因素介导的肝损伤有较好的缓解效果。但在分子层面上的作用机制却尚不完全清楚。本试验通过探究丹参多糖对炎症介质因子的释放和核转录因子蛋白NF-κB及丝裂原活化蛋白激酶MAPK表达的影响,在分子层面上探讨丹参多糖减轻免疫因素诱导的肝损伤的可能机制,为进一步开发和应用中草药多糖提供依据。体内试验,将100只昆明种小鼠随机分为5组,空白对照组（A）,LPS模型组（B）,不同剂量丹参多糖（SMP）组（C组500 mg/kg、D组250 mg/kg和E组125mg/kg）,每组20只。C,D,E组连续给予丹参多糖7 d。LPS诱导小鼠免疫性肝损伤。LPS腹腔注射2h后,处死小鼠,收集血清,分光光度计检测血清中ALT,AST活性和HE染色观察肝脏病理变化。ELISA法检测血清TNF-α、IFN-γ、IL-6和PGE2的含量。RT-PCR检测肝组织中TNF-α、IFN–γ、COX-2、CXCL-10和iNOS mRNA的表达。Western blot检测肝内COX-2、CXCL-10和iNOS蛋白表达及NF-κB通路...
【文章来源】：河北农业大学河北省
【文章页数】：68 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
abstract
缩略词列表
1 引言
1.1 免疫性肝损伤机制的研究进展
1.1.1 炎症反应与肝损伤
1.1.2 NO与肝损伤
1.1.3 前列腺素与肝损伤
1.1.4 肝脏免疫细胞与肝损伤
1.1.5 肝外免疫细胞与肝损伤
1.1.6 TNF-α与肝损伤
1.1.7 IFN-γ与肝损伤
1.1.8 IL-6与肝损伤
1.2 多糖缓解免疫性肝损伤的研究进展
1.2.1 多糖在清除自由基中的作用
1.2.2 多糖在免疫调节及抗炎中的作用
1.3 本研究的意义及目的
1.3.1 肝病已成为动物养殖发展中隐藏着的最大“拦路虎”
1.3.2 肝损伤及其损伤程度与免疫系统存在极大的联系
1.3.3 中药在治疗肝损伤具有独特的优势
2 材料与方法
2.1 试验材料
2.1.1 主要试剂及药品
2.1.2 主要仪器设备
2.2 试验方法
2.2.0 试验动物
2.2.1 试验动物分组与处理
2.2.2 肝组织结构的观察
2.2.3 血清AST、ALT活性测定
2.2.4 炎症因子水平测定
2.2.5 RT-QPCR测定肝组织mRNA的转录水平
2.2.6 肝组织内p-p65,p-IκBα表达的测定
2.2.7 MTT检测RAW264.7细胞存活率
2.2.8 MTT检测丹参多糖与LPS联合作用后细胞的活性
2.2.9 Diff-QuiK染色观察RAW264.7细胞形态
2.2.10 ELISA法测定细胞上清液中炎症介质的含量
2.2.11 RT-PCR法检测炎症因子的基因转录水平
2.2.12 westernblotting测定NF-κB在RAW264.7中的表达
3 结果
3.1 免疫性肝损伤小鼠病理组织形态学变化
3.2 丹参多糖对免疫性肝损伤小鼠ALT和AST活性的影响
3.3 丹参多糖对免疫性肝损伤小鼠血清中炎症因子的影响
3.4 丹参多糖对免疫性小鼠肝损伤小鼠肝组织中炎症因子mRNA的影响
3.5 丹参多糖对免疫性肝损伤小鼠血清中PGE2和肝组织中COX-2mRNA的影响
3.6 丹参多糖对LPS致肝损伤小鼠肝组织中CXCL-10表达的影响
3.7 丹参多糖对LPS致肝损伤小鼠肝组织中iNOS表达的影响
3.8 丹参多糖对LPS致肝损伤小鼠肝组织中NF-κB表达的影响。
3.9 丹参多糖对LPS致肝损伤小鼠肝组织中MAPK表达的影响。
3.10 丹参多糖对细胞活力的影响
3.11 丹参多糖对LPS刺激的RAW264.7形态变化的影响
3.12 丹参多糖对RAW264.7分泌TNF-α的影响
3.13 丹参多糖对RAW264.7分泌IL-6的影响
3.14 丹参多糖对RAW264.7分泌L-1β和IL-10的影响。
3.15 丹参多糖对RAW264.7分泌的PGE2分泌的影响
3.16 丹参多糖对RAW264.7分泌NO的影响
3.17 丹参多糖对炎症因子基因相对转录水平的影响
3.18 丹参多糖对核转录因子NF-κB的蛋白表达的影响
4 讨论
4.1 肝损伤模型的建立及丹参多糖缓解肝损伤的效果
4.2 丹参多糖对免疫性肝损中炎症因子表达的影响
4.3 丹参多糖对免疫性肝损伤中NF-κB表达的影响
4.4 丹参多糖对免疫性肝损伤中MAPK表达的影响
5 结论
参考文献
作者简介
发表文章情况
致谢
附件
中文详细摘要
【参考文献】：
期刊论文
[1]表儿茶素对脂多糖诱导RAW264.7细胞分泌炎症因子的影响[J]. 阮洪生,牟晋珠. 中国实验方剂学杂志. 2017(04)
[2]丹参多糖对雏鸡肝损伤的保护作用[J]. 巴翠晶,段雪磊,李得鑫,李牧,侯京玲,康建南,李林,包永占,史万玉. 中国兽医学报. 2016(10)
[3]Th细胞亚群失衡在免疫性肝损伤中的研究进展[J]. 李娜,张家祥,朱启星. 安徽医科大学学报. 2016(09)
[4]丹翘液对脂多糖诱导RAW264.7细胞炎症相关因子的抑制效应分析[J]. 魏立琴,王东升,董书伟,邝晓娇,张世栋,严作廷. 畜牧兽医学报. 2015(12)
[5]波棱瓜子多糖对刀豆蛋白A所致小鼠免疫性肝损伤的保护作用[J]. 李春沁,王紫燕,唐慧君,王川东,张梅. 中药药理与临床. 2015(04)
[6]黄芪多糖对四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化的保护作用[J]. 张晨,黄进,詹菲,张进. 世界中医药. 2015(06)
[7]天麻多糖对小鼠免疫性肝损伤的保护作用[J]. 李峰,朱洁平,王艳梅,周恩红,沈业寿. 中药药理与临床. 2015(01)
[8]植物多糖对免疫性肝损伤的药理作用研究[J]. 李志浩,姜雪强,李春雷,郑芳,李鹏. 世界临床药物. 2015(01)
[9]丹参磷脂浸膏对急性四氯化碳肝损伤小鼠肝组织的保护作用[J]. 付丹阳,刘雨哲,曲极冰,李红,纪影实. 中国实验诊断学. 2014(11)
[10]木犀草素对急性免疫性肝损伤小鼠的保护作用[J]. 张琦. 上海交通大学学报(医学版). 2014(03)
硕士论文
[1]荞麦属植物落粒性相关基因研究[D]. 李雪.贵州师范大学 2015
[2]波棱瓜子抗免疫性肝损伤谱效关系研究[D]. 陈璐.成都中医药大学 2014
[3]PV-杀白细胞素（PVL）S组分对人急性髓系白血病THP-1细胞株的作用及机制研究[D]. 谢强.安徽医科大学 2013
本文编号：3415695
【文章来源】：河北农业大学河北省
【文章页数】：68 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
abstract
缩略词列表
1 引言
1.1 免疫性肝损伤机制的研究进展
1.1.1 炎症反应与肝损伤
1.1.2 NO与肝损伤
1.1.3 前列腺素与肝损伤
1.1.4 肝脏免疫细胞与肝损伤
1.1.5 肝外免疫细胞与肝损伤
1.1.6 TNF-α与肝损伤
1.1.7 IFN-γ与肝损伤
1.1.8 IL-6与肝损伤
1.2 多糖缓解免疫性肝损伤的研究进展
1.2.1 多糖在清除自由基中的作用
1.2.2 多糖在免疫调节及抗炎中的作用
1.3 本研究的意义及目的
1.3.1 肝病已成为动物养殖发展中隐藏着的最大“拦路虎”
1.3.2 肝损伤及其损伤程度与免疫系统存在极大的联系
1.3.3 中药在治疗肝损伤具有独特的优势
2 材料与方法
2.1 试验材料
2.1.1 主要试剂及药品
2.1.2 主要仪器设备
2.2 试验方法
2.2.0 试验动物
2.2.1 试验动物分组与处理
2.2.2 肝组织结构的观察
2.2.3 血清AST、ALT活性测定
2.2.4 炎症因子水平测定
2.2.5 RT-QPCR测定肝组织mRNA的转录水平
2.2.6 肝组织内p-p65,p-IκBα表达的测定
2.2.7 MTT检测RAW264.7细胞存活率
2.2.8 MTT检测丹参多糖与LPS联合作用后细胞的活性
2.2.9 Diff-QuiK染色观察RAW264.7细胞形态
2.2.10 ELISA法测定细胞上清液中炎症介质的含量
2.2.11 RT-PCR法检测炎症因子的基因转录水平
2.2.12 westernblotting测定NF-κB在RAW264.7中的表达
3 结果
3.1 免疫性肝损伤小鼠病理组织形态学变化
3.2 丹参多糖对免疫性肝损伤小鼠ALT和AST活性的影响
3.3 丹参多糖对免疫性肝损伤小鼠血清中炎症因子的影响
3.4 丹参多糖对免疫性小鼠肝损伤小鼠肝组织中炎症因子mRNA的影响
3.5 丹参多糖对免疫性肝损伤小鼠血清中PGE2和肝组织中COX-2mRNA的影响
3.6 丹参多糖对LPS致肝损伤小鼠肝组织中CXCL-10表达的影响
3.7 丹参多糖对LPS致肝损伤小鼠肝组织中iNOS表达的影响
3.8 丹参多糖对LPS致肝损伤小鼠肝组织中NF-κB表达的影响。
3.9 丹参多糖对LPS致肝损伤小鼠肝组织中MAPK表达的影响。
3.10 丹参多糖对细胞活力的影响
3.11 丹参多糖对LPS刺激的RAW264.7形态变化的影响
3.12 丹参多糖对RAW264.7分泌TNF-α的影响
3.13 丹参多糖对RAW264.7分泌IL-6的影响
3.14 丹参多糖对RAW264.7分泌L-1β和IL-10的影响。
3.15 丹参多糖对RAW264.7分泌的PGE2分泌的影响
3.16 丹参多糖对RAW264.7分泌NO的影响
3.17 丹参多糖对炎症因子基因相对转录水平的影响
3.18 丹参多糖对核转录因子NF-κB的蛋白表达的影响
4 讨论
4.1 肝损伤模型的建立及丹参多糖缓解肝损伤的效果
4.2 丹参多糖对免疫性肝损中炎症因子表达的影响
4.3 丹参多糖对免疫性肝损伤中NF-κB表达的影响
4.4 丹参多糖对免疫性肝损伤中MAPK表达的影响
5 结论
参考文献
作者简介
发表文章情况
致谢
附件
中文详细摘要
【参考文献】：
期刊论文
[1]表儿茶素对脂多糖诱导RAW264.7细胞分泌炎症因子的影响[J]. 阮洪生,牟晋珠. 中国实验方剂学杂志. 2017(04)
[2]丹参多糖对雏鸡肝损伤的保护作用[J]. 巴翠晶,段雪磊,李得鑫,李牧,侯京玲,康建南,李林,包永占,史万玉. 中国兽医学报. 2016(10)
[3]Th细胞亚群失衡在免疫性肝损伤中的研究进展[J]. 李娜,张家祥,朱启星. 安徽医科大学学报. 2016(09)
[4]丹翘液对脂多糖诱导RAW264.7细胞炎症相关因子的抑制效应分析[J]. 魏立琴,王东升,董书伟,邝晓娇,张世栋,严作廷. 畜牧兽医学报. 2015(12)
[5]波棱瓜子多糖对刀豆蛋白A所致小鼠免疫性肝损伤的保护作用[J]. 李春沁,王紫燕,唐慧君,王川东,张梅. 中药药理与临床. 2015(04)
[6]黄芪多糖对四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化的保护作用[J]. 张晨,黄进,詹菲,张进. 世界中医药. 2015(06)
[7]天麻多糖对小鼠免疫性肝损伤的保护作用[J]. 李峰,朱洁平,王艳梅,周恩红,沈业寿. 中药药理与临床. 2015(01)
[8]植物多糖对免疫性肝损伤的药理作用研究[J]. 李志浩,姜雪强,李春雷,郑芳,李鹏. 世界临床药物. 2015(01)
[9]丹参磷脂浸膏对急性四氯化碳肝损伤小鼠肝组织的保护作用[J]. 付丹阳,刘雨哲,曲极冰,李红,纪影实. 中国实验诊断学. 2014(11)
[10]木犀草素对急性免疫性肝损伤小鼠的保护作用[J]. 张琦. 上海交通大学学报(医学版). 2014(03)
硕士论文
[1]荞麦属植物落粒性相关基因研究[D]. 李雪.贵州师范大学 2015
[2]波棱瓜子抗免疫性肝损伤谱效关系研究[D]. 陈璐.成都中医药大学 2014
[3]PV-杀白细胞素（PVL）S组分对人急性髓系白血病THP-1细胞株的作用及机制研究[D]. 谢强.安徽医科大学 2013
本文编号：3415695
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