A型塞尼卡病毒与O型、亚洲I型、A型口蹄疫病毒多重RT-PCR检测方法的建立

发布时间：2021-10-07 13:57

　　为建立鉴别A型塞尼卡病毒（SVA）与O型、亚洲I型、A型口蹄疫病毒（FMDV）的快速检测方法,本研究分别设计4对特异性引物,用于扩增SVA 3D基因（157 bp）、O型FMDV VP1基因（240 bp）、亚洲I型FMDV VP1基因（460 bp）、A型FMDV VP1基因（320 bp）。经优化引物浓度、退火温度等反应条件,初步建立了同时检测SVA与O型、亚洲I型、A型FMDV的多重RT-PCR方法。利用该方法同时检测SVA及O型、亚洲I型、A型FMDV、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪流行性腹泻病毒、猪伪狂犬病病毒、猪细小病毒、猪圆环病毒2型（PCV2）、PCV3等主要猪源病毒,结果显示该方法仅对SVA及O型、亚洲I型、A型FMDV检测为阳性,其他均为阴性,特异性较强;SVA、O型、亚洲I型、A型FMDV重组质粒标准品10倍倍比稀释后利用本研究建立的多重RT-PCR方法检测,结果显示同一反应体系中,4种重组质粒标准品的检出下限均为2.5×10²拷贝/μL,敏感性较高;批内、批间重复性试验结果一致,该方法重复性较好。利用本实验建立的方法对2019年采集自... 

【文章来源】：中国预防兽医学报. 2020,42(09)北大核心CSCD

【文章页数】：7 页

【图文】：

多重RT-PCR引物浓度的优化结果

多重RT-PCR特异性试验结果

随机选取终浓度均为2.5×107拷贝/μL的4种重组质粒标准品混合物作为模板，以相同的条件进行多重PCR的批内和批间重复性试验，结果显示，批内和批间重复性试验均能扩增出均匀一致的目的条带（图5），表明该方法重复性较好。图5 多重RT-PCR重复性试验结果

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3422181