检测牛传染性胸膜肺炎血清抗体间接ELISA方法的建立及初步应用

发布时间：2021-10-08 14:14

　　丝状支原体丝状亚种（Mycoplasma mycoides subsp Mycoides,Mmm）作为牛传染性胸膜肺炎（Contagious Bovine Pleuropneumonia,CBPP）的病原,具有极高传染力。感染牛主要表现为体温升高呈稽留热,呼吸困难等症状,曾给我国造成巨大经济损失。我国虽已消灭CBPP,但该病还在周边国家流行.根据OIE要求,我国每年进行全国范围的血清学监测。竞争性酶联免疫吸附试验（Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay,ELISA,ciELISA）是全球唯一的检测CBPP商品化试剂盒。因检测样本量大,商品试剂盒昂贵且完全依赖进口,这些因素阻碍了我国对CBPP的防控。因此,研制国产CBPP血清抗体试剂盒具有重大意义。在本研究中根据Mmm的基因组序列利用生物信息学软件对进其行了对比分析,选定5种膜相关脂质蛋白即P35、P42、P46、P47、P50。利用原核表达系统表达这五种蛋白并纯化,然后对其特异性与反应原性进行研究。特异性研究显示重组蛋白P35（rP35）蛋白能明显区分CBPP阳性血清与牛支原体、牛鼻支原体、牛无乳支原体的阳... 

【文章来源】：吉林农业大学吉林省

【文章页数】：45 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

584的PCR扩增

图 1.10584 的 PCR 扩增 Negative control; 2 and 3: Th.1.1 The PCR amplication of584 双酶切鉴定-32a 中构建重组质粒，条带，表明重组质粒构

rP35可溶性表达鉴定

【参考文献】：
期刊论文
[1]绵羊肺炎支原体P130蛋白主要抗原域原核表达及其间接ELISA检测方法的建立[J]. 王旭,张晓宇,张建华,黄海碧,王晓晖,史晓娜,郝永清.  中国兽医科学. 2018(03)
[2]牛传染性胸膜肺炎的预防[J]. 米宝元.  中国畜牧兽医文摘. 2017(06)
[3]浅述牛传染性胸膜肺炎的防治措施[J]. 杨东生.  现代畜牧科技. 2016(06)
[4]牛传染性胸膜肺炎的防治体会[J]. 吴学能,康莲.  中兽医学杂志. 2014(06)
[5]牛支原体免疫相关性蛋白硫锌酰胺脱氢酶的筛选与鉴定[J]. 孙文静,李媛,宋志强,邹晓辉,刘洋,陈维,周玉梅,张秀英,辛九庆.  中国预防兽医学报. 2012(10)
[6]以重组PvpA蛋白作为抗原的鸡毒支原体抗体间接ELISA检测方法的建立[J]. 周云雷,李健,魏飞龙,张小华,蒋红霞.  中国预防兽医学报. 2011(09)
[7]应用重组抗原建立检测牛传染性胸膜肺炎的间接ELISA方法[J]. 辛九庆,高玉龙,李媛,王砚范,钱爱东.  中国农业科学. 2006(01)
[8]我国部分省区牛传染性胸膜肺炎流行病学调查[J]. 辛九庆,李媛,高玉龙,王砚范.  畜牧兽医科技信息. 2005(09)

博士论文
[1]牛传染性胸膜肺炎诊断技术与分子流行病学研究[D]. 辛九庆.吉林农业大学 2007

硕士论文
[1]丝状支原体丝状亚种P19蛋白粘附特性的研究[D]. 周玉梅.中国农业科学院 2014



本文编号：3424325