嗜酸乳杆菌表面展示方法的建立及其展示禽流感病毒血凝素HA1的研究

发布时间：2021-10-16 01:35

　　乳酸菌是人和动物肠道内的主要益生菌,是公认的安全级（GRAS）微生物,其不仅具有维持正常肠道功能的重要益生作用,而且具有十分重要的免疫调节功能。凭借其天然优势,乳酸菌成为黏膜疫苗递送载体的最佳候选者之一。乳酸菌黏膜疫苗递送策略因其可以直接向树状突细胞（DC）递呈抗原而成为最有效的黏膜免疫递送方式。本研究克隆4种表面蛋白锚定结构域的基因字列,经筛选确立了以Slap和AcmA为锚定结构域的嗜酸乳杆菌表面锚定展示方法,并分别将原核表达和真核表达的禽流感病毒（AIV） H5N1亚型的血凝素HA1蛋白稳定锚定展示到了嗜酸乳杆菌的细胞壁表面。本研究首先克隆了4种不同的表面蛋白锚定结构域（AcmA、Slap、PuP、Mub）基因,分别将其连接到绿色荧光报告蛋白（EGFP）的C-末端进行融合原核表达,将含有4种锚定结构域的EGFP融合蛋白（EGFP-AcmA、 EGFP-Slap、EGFP-PrtP、EGFP-Mub）和不含有锚定结构域的EGFP蛋白的细胞裂解上清与经不同方式处理的嗜酸乳杆菌混合孵育,经反复洗剂,用荧光显微镜观察菌体,结果显示只有融合蛋白EGFP-AcmA和EGFP-Slap可高效稳定... 

【文章来源】：中国农业科学院北京市

【文章页数】：55 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

乳酸菌黏膜疫苗诱导黏膜免疫应答的过程(JeiryM.Wells,2008)

新型非遗传修饰革兰氏阳性细菌的表面展示外源蛋白的方法(MaartenL.van，2005)

细胞裂解上清SAS-FAGS分析


本文编号：3438898