甘草酸单铵盐对奶牛脂肪肝细胞模型脂肪沉积的影响及调控作用初步研究

发布时间：2021-10-20 15:05

　　奶牛脂肪肝是围产期发病率较高的营养代谢性疾病。奶牛脂肪肝常会造成奶牛产奶量下降,诱发皱胃变位、胎衣不下甚至产后瘫痪等疾病,而且该病治疗成本较高。这严重影响我国奶牛养殖业的健康发展。研究奶牛脂肪肝发病机制,为有效预防和治疗脂肪肝病提供理论依据成为奶牛业当务之急。本研究通过油酸钠诱导原代奶牛肝细胞建立脂肪肝细胞模型,并探讨了甘草酸单铵盐（Monoammonium glycyrrhizinate,MAG）对脂肪肝细胞模型和蛋鸡肝脏脂肪沉积的影响。1、油酸钠建立脂肪肝模型浓度和时间的筛选使用不同浓度的油酸钠（0,0.1,0.25,0.5,1 m Mol/L）对原代培养的犊牛肝细胞作用12 h发现,当油酸钠浓度为0.25 m Mol/L时,即可出现肝细胞损伤;油红O染色出现脂肪肝细胞标志性的指环状细胞;通过透射电镜观察可见模型组中线粒体空泡化严重,糖原颗粒较少,说明油酸钠在诱导刺激奶牛肝细胞12 h的情况下,采用0.25 m Mol/L浓度的油酸钠为最佳建模浓度。采用0.25 m Mol/L浓度的油酸钠对原代肝细胞作用不同时长（0、3、6、9、12、24 h）,发现在诱导9 h肝细胞可出现肝细胞... 

【文章来源】：河南科技大学河南省

【文章页数】：66 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

培养4h的犊牛肝细胞（40×）

分别用*和**表示。2.3 结果2.3.1 犊牛肝细胞分离培养如图可见：犊牛原代肝细胞在接种 4h 后，低倍镜下可见（图 2-1）：肝细胞贴壁状态良好还未完全铺开、细胞密度均匀、生长状态良好符合实验要求、有部分未贴壁的死细胞存在。在高倍镜下可观察：肝细胞已贴壁伸展、呈铺路石状、细胞边缘清晰（图 2-2）。肝细胞培养 24 h 后，低倍镜下可见（图 2-3）：经过换液培养，死亡的肝细胞数量与 4h 时相比明显减少，细胞完全铺开，细胞间紧贴生长，生产状态良好，细胞密度均匀；在高倍镜下可见（图 2-4）：细胞间紧密连接，边缘清晰呈铺路石样。 肝细胞培养 48 h 后，低倍镜可见（图 2-5）：与 24 h 细胞状态相比，细胞密度有所增大，细胞间更加紧凑，死亡细胞数量更少，细胞状态良好；高倍镜下可见（图 2-6）：细胞间贴合度增加，形态、活力基本稳定。

图 2-3. 培养 24 h 的犊牛肝细胞（40×）Fig 2-3. Cultures of calf liver cells for 24hours (40 ×)图 2-4. 培养 24 h 的犊牛肝细胞（200×）Fig 2-4. Cultures of calf liver cells for 24hours (200 ×)图 2-5. 培养 48 h 的犊牛肝细胞（40×）Fig 2-5. Cultures of calf liver cells for 48hours (40 ×)图 2-6. 培养 48 h 的犊牛肝细胞（200×）Fig 2-6. Cultures of calf liver cells for 48hours (200 ×)2.3.2 不同浓度油酸钠对犊牛肝细胞细胞活性的影响


本文编号：3447121