组氨酸对体外培养奶牛乳腺上皮细胞β-酪蛋白及酪氨酸激酶2-信号转导与转录激活子5/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路相关磷酸

发布时间：2021-10-21 18:12

　　本试验旨在研究不同浓度的组氨酸对体外培养奶牛乳腺上皮细胞β-酪蛋白及酪氨酸激酶2（JAK2）-信号转导与转录激活子5（STAT5）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（m TOR）信号通路相关磷酸化蛋白表达的影响。将原代奶牛乳腺上皮细胞进行体外培养,分为对照组和7个试验组,采用无必需氨基酸的培养基,对照组不添加组氨酸,试验组是在对照组基础上分别添加0.15、0.60、1.20、2.40、4.80、9.60、19.20 mmol/L的组氨酸。采用噻唑蓝比色法检测原代奶牛乳腺上皮细胞12 h增殖情况;运用蛋白质免疫印迹检测β-酪蛋白和8个信号通路相关磷酸化蛋白表达。结果表明:1)当组氨酸浓度为0.15⁹.60 mmol/L时,与对照组相比,奶牛乳腺上皮细胞数量均增加。2)β-酪蛋白表达量随组氨酸浓度的增加出现先升高后降低的趋势,但试验组均极显著高于对照组（P<0.01）。3)与对照组相比,组氨酸的添加可极显著促进各信号通路相关磷酸化蛋白的表达（P<0.01）;试验组中,随着组氨酸浓度的升高,磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白[P-m TOR（Ser2481）]和磷酸化真核细... 

【文章来源】：动物营养学报. 2016,28(03)北大核心CSCD

【文章页数】：10 页

【文章目录】：
1材料与方法
    1. 1试验材料
        1 . 1 . 1主要仪器
        1 . 1 . 2主要试剂
    1. 2试验方法
        1 . 2 . 1原代奶牛乳腺上皮细胞体外培养
        1 . 2 . 2M TT检测细胞增殖
        1.2.3蛋白质免疫印迹(W B)检测
            1.2.3.1试验处理
            1 . 2 . 3 . 2样品总蛋白提取
            1 . 2 . 3 . 3蛋白质免疫印迹检测
    1. 3数据统计分析
2结果
    2. 1组氨酸对体外培养奶牛乳腺上皮细胞增殖的影响
    2. 2 组氨酸对体外培养奶牛乳腺上皮细胞 β - 酪蛋白表达的影响
    2.3组氨酸对体外培养奶牛乳腺上皮细胞JAK2-STAT5信号通路相关磷酸化蛋白表达的影响
    2. 4组氨酸对体外培养奶牛乳腺上皮细胞中m TOR信号通路相关磷酸化蛋白表达的影响
3 讨论
    3. 1 组氨酸对体外培养奶牛乳腺上皮细胞增殖的影响
    3. 2 组氨酸对信号通路介导 β - 酪蛋白合成相关磷酸化蛋白表达的影响
4 结论


【参考文献】：
期刊论文
[1]亮氨酸和组氨酸通过mTOR信号通路调控奶牛腺上皮细胞中酪蛋白的合成（英文）[J]. Hai-na GAO,Han HU,Nan ZHENG,Jia-qi WANG.  Journal of Zhejiang University-Science B（Biomedicine & Biotechnology）. 2015(06)
[2]亮氨酸或组氨酸通过哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路影响奶牛乳腺上皮细胞中酪蛋白的合成[J]. 高海娜,胡菡,王加启,郑楠.  动物营养学报. 2015(04)
[3]eIF2α激酶和eIF2α磷酸化对特异的蛋白质合成的激活作用研究进展[J]. 韩钦.  国外医学(分子生物学分册). 2002(06)

硕士论文
[1]奶牛乳腺上皮细胞JAK2-STAT5和mTOR信号通路协同调控乳蛋白合成[D]. 史琳琳.东北农业大学 2013
[2]精氨酸对乳腺上皮细胞中酪蛋白合成的影响及其调控机制[D]. 徐柏林.扬州大学 2012
[3]奶牛乳腺上皮细胞中赖氨酸蛋氨酸配比模式对酪蛋白合成的影响及机理研究[D]. 李喜艳.中国农业科学院 2011



本文编号：3449481