黄芪总黄酮对巨噬细胞RAW264.7抗炎免疫的双向调节研究

发布时间：2021-10-22 02:43

　　为研究黄芪总黄酮（TFA）对巨噬细胞RAW264.7的抗炎免疫双向调节作用,本研究首先采用MTT法筛选TFA对RAW264.7细胞的安全剂量;后续研究均采用以下两种方式开展:采用不同安全剂量（10μg/mL、25μg/mL、100μg/mL）的TFA与正常培养的RAW264.7细胞作用;上述不同浓度的TFA与RAW264.7细胞作用后以终浓度为1μg/mL LPS刺激。分别通过ELISA和RT-PCR检测上述两种情况下RAW264.7细胞中细胞因子的含量及其mRNA的转录水平;采用western blot测定上述两种情况下RAW264.7细胞NF-κB信号通路中关键蛋白的表达水平。结果显示,TFA在0～150μg/mL对细胞无明显毒性;ELISA和RT-PCR结果显示,TFA能够显著提高正常培养的RAW264.7细胞上清液中IL-1β、IL-6和TNF-α含量及其mRNA转录水平,抑制LPS刺激的RAW264.7细胞上清液中IL-1β、IL-6和TNF-α的过度表达及其mRNA水平的过度转录,并呈剂量依赖性;western blot结果表明,TFA能够显著下调正常培养的RAW264.7... 

【文章来源】：中国预防兽医学报. 2020,42(08)北大核心CSCD

【文章页数】：8 页

【部分图文】：

不同浓度TFA对RAW264.7细胞活性影响的检测结果

图2 TFA对正常培养的RAW264.7细胞IL-1β、IL-6和TNF-α含量影响的检测结果2.4 TFA对正常培养的RAW264.7细胞各细胞因子转录水平影响的检测结果

通过RT-PCR法检测TFA对LPS刺激的RAW264.7细胞各细胞因子mRNA的转录水平，并经Quantity one软件进行条带灰度分析。结果显示，与空白组对照相比，LPS刺激导致RAW264.7细胞IL-1β、IL-6及TNF-αm RNA转录水平急剧增高（p<0.01），而25μg/mL和100μg/mL TFA极显著抑制了LPS刺激的IL-1βmRNA转录水平（p<0.01）；各剂量TFA显著和极显著抑制了LPS刺激的IL-6 m RNA转录水平（p<0.05;p<0.01);25μg/mL和100μg/mL TFA显著和极显著抑制了LPS刺激的TNF-αmRNA转录水平（p<0.05;p<0.01）（图5）。表明TFA能够抑制LPS刺激的RAW264.7细胞IL-1β、IL-6及TNF-αmRNA的转录水平，且呈一定的剂量依赖关系。图5 TFA对LPS刺激的RAW264.7细胞IL-1β、IL-6和TNF-αm RNA转录水平影响的检测结果

【参考文献】：
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本文编号：3450224