抗菌肽CC31毕赤酵母工程菌制备与发酵参数优化的研究
发布时间：2021-10-29 08:57
本试验研究深层发酵、固态发酵的培养基及其培养条件对毕赤酵母工程菌CC31发酵的影响,毕赤酵母工程菌CC31源自本实验室马迪所制。通过优化得到最佳发酵培养基培养条件组合,验证发酵效果并探讨其影响原因,探究发酵组合对发酵效果的影响。方法:（1）在摇瓶试验中由单因素试验从甘油、葡萄糖、蔗糖中挑选最佳碳源,从硫酸铵、碳酸铵、草酸铵中挑选最佳氮源,从PTM1、酵母提取物中挑选最佳微量元素作为发酵培养基主要成分。在选取发酵培养基成分的基础上,利用正交试验设计表设计,以不同碳源比例、碳源添加量、氮源添加量、微量元素添加量为变量,以菌体密度(OD600nm)为指标,获得组合对发酵效果的关系。在优化培养基条件下,对接种量、pH值和温度进行逐一优化。（2）深层发酵培养条件的优化采用均匀设计,以蛋白浓度、湿菌重为指标,探讨装液量与转速对发酵效果的影响。用二次多项逐步回归分析拟合蛋白浓度、湿菌重与装液量、转速的方程,并利用DPS软件进行优化,得到最佳培养条件组合,并预测最优方程解。于发酵结束后分别测定蛋白浓度、湿菌重,验证方程相关性。在验证试验结束后,分别对补料方式间歇补料、连续补料进行...
【文章来源】：黑龙江八一农垦大学黑龙江省
【文章页数】：77 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
英文摘要
引用符号缩写说明
1 文献综述
1.1 抗菌肽的概述
1.1.1 抗菌肽的特点
1.1.2 抗菌肽的来源
1.1.3 抗菌肽的生产与应用
1.1.4 抗菌肽饲料问题
1.2 毕赤酵母的概述
1.2.1 毕赤酵母
1.2.2 毕赤酵母表达系统
1.2.3 毕赤酵母优点
1.2.4 毕赤酵母表达系统存在问题及前景
1.3 深层发酵工艺
1.3.1 培养基对毕赤酵母深层发酵的影响
1.3.2 培养条件对毕赤酵母深层发酵的影响
1.3.3 补料工艺对毕赤酵母深层发酵的影响
1.4 固态发酵工艺
1.4.1 固态发酵菌种
1.4.2 固态发酵条件
1.4.3 固态发酵问题
1.5 固态发酵豆粕
1.6 论文研究的目的与意义
1.7 技术路线
2 毕赤酵母工程菌发酵培养基及其培养条件的摇瓶优化
2.1 材料与方法
2.1.1 材料
2.1.2 方法
2.2 试验设计
2.2.1 单因素优化BSM培养基成分
2.2.2 正交设计优化发酵培养基添加量
2.2.3 单因素优化最佳培养条件
2.3 结果与分析
2.3.1 种子液最佳培养时间的确定
2.3.2 毕赤酵母工程菌在YPD与 BSM培养基中生长情况
2.3.3 毕赤酵母工程菌培养基的优化
2.4 讨论
2.4.1 毕赤酵母基础盐培养基的优化
2.4.2 摇瓶发酵条件的优化
2.5 结论
3 毕赤酵母工程菌深层发酵条件的优化
3.1 材料与方法
3.1.1 材料
3.1.2 方法
3.2 试验设计
3.2.1 均匀设计优化上罐条件
3.2.2 均匀设计发酵验证
3.2.3 补料工艺的探究
3.3 结果分析
3.3.1 一级种子液培养时间确定
3.3.2 二级种子液培养时间确定
3.3.3 均匀设计优化上罐发酵条件
3.3.4 补料工艺的筛选
3.3.5 补料工艺的筛选
3.4 讨论
3.4.1 种子液的筛选
3.4.2 深层发酵条件的优化
3.4.3 补料对菌体生长的影响
3.5 结论
4 毕赤酵母工程菌的固态发酵条件的优化
4.1 材料与方法
4.1.1 材料
4.1.2 方法
4.2 试验设计
4.2.1 单因素试验优化发酵粒度
4.2.2 均匀设计优化固态条件
4.3 结果分析
4.3.1 发酵粒度的确定
4.3.2 固态发酵条件的确定
4.3.3 最优固态发酵条件验证
4.3.4 毕赤酵母菌对发酵豆粕营养的影响
4.3.5 毕赤酵母固态发酵的豆粕形态
4.4 讨论
4.4.1 发酵粒度对发酵的影响
4.4.2 接种量、含水量对发酵的影响
4.4.3 固态发酵对发酵料品质的影响
4.5 结论
5 讨论与结论
5.1 毕赤酵母深层发酵工艺的讨论
5.2 毕赤酵母固态发酵工艺的讨论
5.3 总体结论
5.4 创新点
参考文献
附录
致谢
个人简历
【参考文献】：
期刊论文
[1]微生物发酵饲料的技术调研及关键技术分析[J]. 宁艳春,陈希海,杜宝军,屈海峰,岳军,李平. 饲料博览. 2019(01)
[2]发酵工艺条件对豆粕中过敏蛋白降解的影响[J]. 赖晗,程友飞,杨安树,陈红兵. 食品科技. 2019(01)
[3]重组巴斯德毕赤酵母发酵生产内切几丁质酶的培养条件优化[J]. 于平,任倩,黄星星,王欣馨,易明花. 菌物学报. 2018(11)
[4]毕赤酵母重组菌高密度发酵产疏绵状嗜热丝孢菌脂肪酶[J]. 蔡海莺,Dumba Trish,张婷,来佳,赵敏洁,李杨,于林凯,张辉,冯凤琴. 中国食品学报. 2018(07)
[5]抗菌肽及类抗菌肽的设计、合成及应用[J]. 周欣宇,周春才. 化学进展. 2018(07)
[6]枯草芽孢杆菌和黑曲霉固态发酵制备核桃多肽的工艺条件优化[J]. 刘潇,郭丽娜,马海乐,王珂,吴平,洪晨,赵兴,张成. 现代食品科技. 2018(08)
[7]不同益生菌固态发酵豆粕的工艺研究[J]. 张佳斌,张雪芳,李利君,肖琼,翁惠芬,倪辉,肖安风. 集美大学学报(自然科学版). 2018(03)
[8]酿酒酵母制备固态发酵饲料的参数优化及品质评价[J]. 孙宏,李园成,吴逸飞,沈琦,姚晓红,汤江武,王新. 中国畜牧杂志. 2018(05)
[9]豆粕微生物固态发酵工艺优化及其营养物质含量变化[J]. 吝常华,刘国华,常文环,张姝,郑爱娟,邓雪娟,蔡辉益. 动物营养学报. 2018(07)
[10]抗菌肽的生产方法与产业化分析[J]. 吴金梅,胡迎利. 现代牧业. 2018(01)
博士论文
[1]sn-1,3专一性脂肪酶的筛选、重组表达和分子改造研究[D]. 蔡海莺.浙江大学 2016
[2]毕赤酵母表达系统及其应用[D]. 郭雨刚.中国科学技术大学 2012
[3]巴氏毕赤酵母基因工程菌高密度发酵表达重组人源胶原蛋白[D]. 刘斌.南京理工大学 2012
硕士论文
[1]基因工程重组大肠杆菌BL21-FMDV-B4高密度发酵的优化研究[D]. 牟筱.甘肃农业大学 2018
[2]保拉迪酵母菌粉的制备及稳定性研究[D]. 雷张腾.陕西科技大学 2017
[3]木聚糖酶XynG1-1在毕赤酵母中的表达及其纺织应用[D]. 王停停.天津科技大学 2017
[4]北方温度条件下启动豆粕固体发酵技术的研究[D]. 陈雷.东北农业大学 2016
[5]重组毕赤酵母产Lunasin发酵工艺及Lunasin生物活性研究[D]. 康国凯.华中农业大学 2016
[6]丁醇高产菌株的诱变筛选及发酵技术的研究[D]. 彭牡丹.中南林业科技大学 2014
[7]毕赤酵母生产重组蛋白A工艺研究[D]. 郝晶.大连理工大学 2013
[8]树干毕赤酵母固态发酵条件优化及木聚糖酶性质研究[D]. 胡玉琪.河南工业大学 2013
[9]发酵黄芪的乳酸菌选育与发酵参数优化研究[D]. 朱新术.中国农业科学院 2008
[10]棉籽蛋白的固体发酵工艺及其产品的应用效果研究[D]. 贾喜涵.内蒙古农业大学 2008
本文编号：3464371
【文章来源】：黑龙江八一农垦大学黑龙江省
【文章页数】：77 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
英文摘要
引用符号缩写说明
1 文献综述
1.1 抗菌肽的概述
1.1.1 抗菌肽的特点
1.1.2 抗菌肽的来源
1.1.3 抗菌肽的生产与应用
1.1.4 抗菌肽饲料问题
1.2 毕赤酵母的概述
1.2.1 毕赤酵母
1.2.2 毕赤酵母表达系统
1.2.3 毕赤酵母优点
1.2.4 毕赤酵母表达系统存在问题及前景
1.3 深层发酵工艺
1.3.1 培养基对毕赤酵母深层发酵的影响
1.3.2 培养条件对毕赤酵母深层发酵的影响
1.3.3 补料工艺对毕赤酵母深层发酵的影响
1.4 固态发酵工艺
1.4.1 固态发酵菌种
1.4.2 固态发酵条件
1.4.3 固态发酵问题
1.5 固态发酵豆粕
1.6 论文研究的目的与意义
1.7 技术路线
2 毕赤酵母工程菌发酵培养基及其培养条件的摇瓶优化
2.1 材料与方法
2.1.1 材料
2.1.2 方法
2.2 试验设计
2.2.1 单因素优化BSM培养基成分
2.2.2 正交设计优化发酵培养基添加量
2.2.3 单因素优化最佳培养条件
2.3 结果与分析
2.3.1 种子液最佳培养时间的确定
2.3.2 毕赤酵母工程菌在YPD与 BSM培养基中生长情况
2.3.3 毕赤酵母工程菌培养基的优化
2.4 讨论
2.4.1 毕赤酵母基础盐培养基的优化
2.4.2 摇瓶发酵条件的优化
2.5 结论
3 毕赤酵母工程菌深层发酵条件的优化
3.1 材料与方法
3.1.1 材料
3.1.2 方法
3.2 试验设计
3.2.1 均匀设计优化上罐条件
3.2.2 均匀设计发酵验证
3.2.3 补料工艺的探究
3.3 结果分析
3.3.1 一级种子液培养时间确定
3.3.2 二级种子液培养时间确定
3.3.3 均匀设计优化上罐发酵条件
3.3.4 补料工艺的筛选
3.3.5 补料工艺的筛选
3.4 讨论
3.4.1 种子液的筛选
3.4.2 深层发酵条件的优化
3.4.3 补料对菌体生长的影响
3.5 结论
4 毕赤酵母工程菌的固态发酵条件的优化
4.1 材料与方法
4.1.1 材料
4.1.2 方法
4.2 试验设计
4.2.1 单因素试验优化发酵粒度
4.2.2 均匀设计优化固态条件
4.3 结果分析
4.3.1 发酵粒度的确定
4.3.2 固态发酵条件的确定
4.3.3 最优固态发酵条件验证
4.3.4 毕赤酵母菌对发酵豆粕营养的影响
4.3.5 毕赤酵母固态发酵的豆粕形态
4.4 讨论
4.4.1 发酵粒度对发酵的影响
4.4.2 接种量、含水量对发酵的影响
4.4.3 固态发酵对发酵料品质的影响
4.5 结论
5 讨论与结论
5.1 毕赤酵母深层发酵工艺的讨论
5.2 毕赤酵母固态发酵工艺的讨论
5.3 总体结论
5.4 创新点
参考文献
附录
致谢
个人简历
【参考文献】：
期刊论文
[1]微生物发酵饲料的技术调研及关键技术分析[J]. 宁艳春,陈希海,杜宝军,屈海峰,岳军,李平. 饲料博览. 2019(01)
[2]发酵工艺条件对豆粕中过敏蛋白降解的影响[J]. 赖晗,程友飞,杨安树,陈红兵. 食品科技. 2019(01)
[3]重组巴斯德毕赤酵母发酵生产内切几丁质酶的培养条件优化[J]. 于平,任倩,黄星星,王欣馨,易明花. 菌物学报. 2018(11)
[4]毕赤酵母重组菌高密度发酵产疏绵状嗜热丝孢菌脂肪酶[J]. 蔡海莺,Dumba Trish,张婷,来佳,赵敏洁,李杨,于林凯,张辉,冯凤琴. 中国食品学报. 2018(07)
[5]抗菌肽及类抗菌肽的设计、合成及应用[J]. 周欣宇,周春才. 化学进展. 2018(07)
[6]枯草芽孢杆菌和黑曲霉固态发酵制备核桃多肽的工艺条件优化[J]. 刘潇,郭丽娜,马海乐,王珂,吴平,洪晨,赵兴,张成. 现代食品科技. 2018(08)
[7]不同益生菌固态发酵豆粕的工艺研究[J]. 张佳斌,张雪芳,李利君,肖琼,翁惠芬,倪辉,肖安风. 集美大学学报(自然科学版). 2018(03)
[8]酿酒酵母制备固态发酵饲料的参数优化及品质评价[J]. 孙宏,李园成,吴逸飞,沈琦,姚晓红,汤江武,王新. 中国畜牧杂志. 2018(05)
[9]豆粕微生物固态发酵工艺优化及其营养物质含量变化[J]. 吝常华,刘国华,常文环,张姝,郑爱娟,邓雪娟,蔡辉益. 动物营养学报. 2018(07)
[10]抗菌肽的生产方法与产业化分析[J]. 吴金梅,胡迎利. 现代牧业. 2018(01)
博士论文
[1]sn-1,3专一性脂肪酶的筛选、重组表达和分子改造研究[D]. 蔡海莺.浙江大学 2016
[2]毕赤酵母表达系统及其应用[D]. 郭雨刚.中国科学技术大学 2012
[3]巴氏毕赤酵母基因工程菌高密度发酵表达重组人源胶原蛋白[D]. 刘斌.南京理工大学 2012
硕士论文
[1]基因工程重组大肠杆菌BL21-FMDV-B4高密度发酵的优化研究[D]. 牟筱.甘肃农业大学 2018
[2]保拉迪酵母菌粉的制备及稳定性研究[D]. 雷张腾.陕西科技大学 2017
[3]木聚糖酶XynG1-1在毕赤酵母中的表达及其纺织应用[D]. 王停停.天津科技大学 2017
[4]北方温度条件下启动豆粕固体发酵技术的研究[D]. 陈雷.东北农业大学 2016
[5]重组毕赤酵母产Lunasin发酵工艺及Lunasin生物活性研究[D]. 康国凯.华中农业大学 2016
[6]丁醇高产菌株的诱变筛选及发酵技术的研究[D]. 彭牡丹.中南林业科技大学 2014
[7]毕赤酵母生产重组蛋白A工艺研究[D]. 郝晶.大连理工大学 2013
[8]树干毕赤酵母固态发酵条件优化及木聚糖酶性质研究[D]. 胡玉琪.河南工业大学 2013
[9]发酵黄芪的乳酸菌选育与发酵参数优化研究[D]. 朱新术.中国农业科学院 2008
[10]棉籽蛋白的固体发酵工艺及其产品的应用效果研究[D]. 贾喜涵.内蒙古农业大学 2008
本文编号：3464371
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/dongwuyixue/3464371.html
