饲料中常见霉菌毒素对小鼠的联合毒性作用及机制的研究

发布时间：2021-10-31 21:15

　　本试验在细胞水平和动物整体水平研究了黄曲霉毒素B1（AFB1）、玉米赤霉烯酮（ZEA）、呕吐毒素（DON）和伏马菌素B1（FB1）四种霉菌毒素对猪肾细胞、大鼠肝细胞和小鼠的联合毒性。（1）对猪肾细胞（PK15）的联合毒性将AFB1、ZEA、DON和FB1以不同浓度与PK15孵育12,24和48h后,采用MTT法和LDH释放法评价霉菌毒素的细胞毒性。结果表明：AFB1、ZEA、DON与PK15孵育48h后,EC50（50%效应浓度）分别为38.8、121.8和3.6μM,EC30（30%效应浓度）分别为26.9、86.6和1.8μm。且AFB1和ZEA均呈现时间效应和剂量效应关系,随着剂量增加和时间延长,霉菌毒素的细胞毒性增强。FB1浓度高达250μM且孵育48h后,PK15细胞活力仍大于70%。与霉菌毒素孵育24h后,AFB1、ZEA和DON能显著提高细胞LDH的释放,而FB1显著降低细胞LDH的释放。AFB1和DON均能显著提高细胞内活性氧和细胞凋亡率（P<0.05）,而ZEA （10,20,40μM）对细胞内活性氧和细胞凋亡没有影响。四种霉菌毒素的细胞毒性大小顺序为DON&g... 

【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：108 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
缩略语表
第一章 文献综述
    1 前言
    2 饲料中霉菌毒素的危害
        2.1 AFB_1的理化性质和毒性作用
        2.2 ZEA的理化性质和毒性作用
        2.3 DON的理化性质和毒性作用
        2.4 FUM的理化性质和毒性作用
    3 饲料中霉菌毒素的污染情况
    4 霉菌毒素联合作用的研究
        4.1 联合作用方法学研究
        4.2 国内对霉菌毒素联合作用的研究
        4.3 国外对霉菌毒素联合作用的研究
    5 研究意义和研究内容
第二章 细胞毒性试验
    试验一 四种霉菌毒素对猪肾细胞的联合毒性研究
        1 材料与方法
            1.1 试验材料和试验仪器
            1.2 试验方法
        2 试验设计及数据处理
            2.1 不同霉菌毒素对细胞活力的剂量效应关系
            2.2 不同霉菌毒素对细胞膜损伤的剂量效应关系
            2.3 不同霉菌毒素对细胞内活性氧和细胞凋亡率的影响
            2.4 利用中心组合设计研究四种霉菌毒素的联合毒性
            2.5 AFB_1和ZEA对细胞膜完整性和氧化损伤的联合作用
            2.6 AFB_1和ZEA对细胞凋亡的联合作用
            2.7 数据处理
        3 结果与分析
            3.1 不同霉菌毒素对PK15的细胞毒性、细胞膜损伤、氧化损伤和细胞凋亡的影响
            3.2 常见霉菌毒素二元和三元混合的联合作用类型
            3.3 AFB1与ZEA对PK1 5的联合作用机理
        4 小结
    试验二 四种霉菌毒素对大鼠肝细胞的联合毒性研究
        1 材料与方法
            1.1 试验材料和实验仪器
            1.2 试验方法
        2 试验设计及数据处理
            2.1 不同霉菌毒素对BRL细胞活力的剂量效应关系
            2.2 不同霉菌毒素对BRL细胞膜损伤的剂量效应关系
            2.3 不同霉菌毒素对细胞内活性氧、细胞凋亡率的影响
            2.4 利用中心组合设计研究四种霉菌毒素的联合毒性
            2.5 AFB_1和DON对细胞膜完整性和氧化损伤的联合作用
            2.6 AFB_1和DON对细胞凋亡的联合作用
            2.7 试验数据处理
        3 结果与分析
            3.1 不同霉菌毒素对BRL细胞毒性、细胞膜损伤、氧化损伤和细胞凋亡的影响
            3.2 四种霉菌毒素二元和三元混合的联合作用类型
            3.3 AFB_1与DON对BRL细胞的联合作用机理
        4 小结
第三章 四种霉菌毒素对Balb/C小鼠的联合毒性
    1 材料与方法
        1.1 试验动物
        1.2 霉菌毒素溶液的配置
        1.3 试验设计
        1.4 采样及分析方法
        1.5 数据处理
    2 结果与分析
        2.1 对日采食量和体重的影响
        2.2 对器官指数的影响
        2.3 对血液生化指标的影响
        2.5 对小鼠肝脏MDA、T-AOC和SOD含量及HSP70蛋白表达的影响
        2.6 对脾脏IL-1β,IL-6和TNF-α mRNA表达量的影响
        2.7 对小鼠肝脏细胞凋亡的影响
    3 小结
第四章 讨论
    1 不同霉菌毒素对肝细胞和肾细胞的毒性作用
    2 霉菌毒素联合对肝细胞的影响
    3 霉菌毒素联合对肾细胞的影响
    4 霉菌毒素联合对小鼠脏器损伤的影响
    5 霉菌毒素联合对小鼠免疫功能的影响
    6 霉菌毒素联合作用对小鼠生长和采食量的影响
第五章 结论与展望
参考文献
附录 在读期间发表的论文情况
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]2012年上半年饲料中霉菌毒素污染状况的分析[J]. 黄广明,李肖红,阳艳林,赵江林,劳晔.  养猪. 2012(06)
[2]Protective effects of selenium and vitamin E on rats consuming maize naturally contaminated with mycotoxins[J]. Jie YU, Daiwen CHEN, Bing YU Institute of Animal Nutrition, Sichuan Agricultural University, Ya’an 625014, China.  Frontiers of Agriculture in China. 2009 (01)
[3]20062007年中国饲料及饲料原料霉菌毒素污染调查报告[J]. 敖志刚,陈代文.  中国畜牧兽医. 2008(01)
[4]微囊藻毒素和黄曲霉毒素及伏马菌素联合毒性[J]. 熊丽林,唐萌,王加生,曾垂焕,夏婷,王晓娜.  中国公共卫生. 2006(05)
[5]伏马菌素B1和黄曲霉毒素B1对大鼠的联合毒性[J]. 孙桂菊,王少康,王加生.  毒理学杂志. 2005(S1)
[6]膳食雌激素影响乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡的机制探讨[J]. 余增丽,张立实,吴德生.  营养学报. 2005(02)
[7]杂色曲霉素和脱氧雪腐镰刀菌烯醇对小鼠致癌作用的研究[J]. 黄向华,张祥宏,李月红,王俊灵,严霞,邢凌霄,王凤荣.  中华肿瘤杂志. 2004(12)
[8]中国饲料及饲料原料受霉菌毒素污染的调查报告[J]. 王若军,苗朝华,张振雄,Nopphawan Sawatwiroj,Karl Dawson,付双喜,冯定远.  饲料工业. 2003(07)
[9]重金属镉、铅、锌对鲫鱼和泥鳅的毒性[J]. 王银秋,张迎梅,赵东芹.  甘肃科学学报. 2003(01)
[10]重金属铜、镉对蝌蚪毒性的研究[J]. 杨再福,陈立侨,陈华友.  中国生态农业学报. 2003(01)

硕士论文
[1]黄曲霉毒素B1和脱氧雪腐镰刀菌烯醇诱导锦鲤原代肝细胞凋亡机制的初步研究[D]. 吕伟.南京农业大学 2010
[2]几种霉菌毒素对BHK细胞毒害影响及作用机理的研究[D]. 韩薇.安徽大学 2010
[3]葡甘聚糖复合吸附剂对肉鸡饲料中霉菌毒素混合污染的脱毒研究[D]. 徐雪梅.华中农业大学 2008
[4]四川地区主要饲料霉菌毒素分布规律的研究[D]. 杨晓飞.四川农业大学 2007



本文编号：3468860