鸭疫里氏杆菌保护性抗原的筛选及应用

发布时间：2021-11-04 19:40

　　鸭疫里氏杆菌（Riemerella anatipestifer, RA）,原名鸭疫巴氏杆菌（Pasteurella Anatipestifer, PA）,原为巴氏杆菌科里氏杆菌属的一员,后被划入黄杆菌科,除了进化上的特异性,另一个引起人们研究兴趣的原因主要是该菌引起世界范围内雏鸭的一种重要传染病——鸭传染性浆膜炎。该病原菌主要引起雏鸭败血症,表现为脑膜炎、心包炎和腹膜炎等,导致养鸭业巨大经济损失。目前,已鉴定出的21种血清型,各血清型之间缺乏交叉保护力是阻碍该病防控、疫苗研究和鉴别诊断的主要因素。市场上尚无安全、高效的疫苗用于该病原菌的防控。新型保护性抗原,特别是能为不同血清型菌株感染提供交叉保护力的交叉保护性抗原的筛选是研制新型亚单位疫苗的当务之急。2011年以来已有数株鸭疫里氏杆菌基因组被公布,这些基因组信息为高通量筛选保护性抗原开辟了新途径。根据以往的报道和本实验室分离保存的菌株统计,鸭疫里氏杆菌2型是临床感染中危害最大的血清型之一,我们选择2型代表毒株RAf153进行全基因测序,并建立了鸭疫里氏杆菌RAf153全菌蛋白的免疫蛋白质组学方法,用该方法共筛选到12种保护性抗原候选因... 

【文章来源】：南京农业大学江苏省 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：89 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一篇 文献综述
    第一章 鸭疫里氏杆菌研究进展
        1 病原学
        2 流行病学
        3 我国养鸭业现状
        4 疫苗研究
    第二章 蛋白质组学的概念及方法
        1 蛋白质组学的由来
        2 蛋白质组学研究的总体策略
        3 免疫蛋白质组学方法在疫苗研究中的应用
            3.1 蛋白质组学的在生物医学中的主要应用
            3.2 免疫蛋白质组学在疫苗研究中的应用
第二篇 试验部分
    第三章 鸭疫里氏杆菌免疫蛋白质组学方法的建立
        摘要
        1 材料与方法
            1.1 菌株与培养条件
            1.2 血清准备
            1.3 蛋白样品提取
            1.4 免疫蛋白质组学
            1.5 原核表达、免疫原性分析及纯化
        2 结果
            2.1 RAf153全菌蛋白电泳图谱及western blot分析
            2.2 免疫反应性蛋白点的鉴定
            2.3 生物信息学分析
            2.4 核酸序列GenBank登录号
            2.5 蛋白质基因序列在不同菌种中的分布
            2.6 蛋白质的原核表达及免疫原性分析
        3 讨论
        ABSTRACT
    第四章 1型和2型鸭疫里氏杆菌亚单位疫苗候选因子的免疫蛋白质组学筛选
        摘要
        1 材料与方法
            1.1 菌株与培养条件
            1.2 血清准备
            1.3 蛋白样品提取
            1.4 免疫蛋白质组学
            1.5 原核表达、免疫原性分析及纯化
            1.6 免疫反应性蛋白的保守性分析
            1.7 攻毒保护试验
        2 结果
            2.1 二维凝胶电泳图谱及western blot分析
            2.2 免疫反应性蛋白点的鉴定
            2.3 生物信息学分析
            2.4 蛋白质的原核表达及免疫原性分析
            2.5 核酸序列GenBank登录号
            2.6 攻毒保护试验
        3 讨论
        ABSTRACT
    第五章 南京周边地区鸭疫里氏杆菌流行病学调查
        摘要
        1 材料与方法
            1.1 菌株与培养条件
            1.2 鸭疫里氏杆菌PCR检测方法建立
            1.3 鸭疫里氏杆菌间接ELISA检测方法的建立
            1.4 鸭疫里氏杆菌PCR检测
            1.5 鸭疫里氏杆菌血清学调查
        2 结果
            2.1 PCR检测方法的建立
            2.2 间接ELISA方法的建立
        3 讨论
        ABSTRACT
    第六章 鸭疫里氏杆菌2型菌株RAF153全基因组测序及型特异性基因筛选
        摘要
        1 材料与方法
            1.1 菌株培养
            1.2 基因组提取
            1.3 RAf153基因组序列测定
            1.4 比较基因组学研究
            1.5 鉴别诊断引物设计
        2 结果
            2.1 RAf153基因组序列测定结果
            2.2 鉴别引物筛选
        3 讨论
        ABSTRACT
参考文献
全文总结
附录
致谢
攻读硕士期间发表的学术论文


【参考文献】：
期刊论文
[1]鸭疫里默氏杆菌疫苗的研究进展[J]. 钟登科,魏建超,路振香.  中国家禽. 2009(05)
[2]鸭疫里默氏菌一个可能新型的鉴定[J]. 张大丙,郑献进,曲丰发.  中国预防兽医学报. 2006(01)
[3]我国鸭疫里默氏杆菌血清型调查及新血清型的发现和病原特性[J]. 程安春,汪铭书,陈孝跃,朱德康,黄城,刘菲,周毅,郭宇飞,刘兆宇,方鹏飞.  中国兽医学报. 2003(04)
[4]血清5型鸭疫里氏杆菌在我国的发现及其病原特性研究[J]. 汪铭书,程安春,陈孝跃,刘兆宇,方鹏飞,郭宇飞.  中国兽医科技. 2002(09)
[5]鸭疫里氏杆菌病三价油乳剂灭活疫苗的研究[J]. 胡清海,刘晓文,赵世华,张知良,苗晋锋,刘华雷,赵宝华,徐步,丁铲.  中国兽医科技. 2002(07)
[6]江苏安徽两省鸭疫里默氏杆菌病的流行病学调查研究[J]. 胡清海,张知良,苗晋锋,刘岳龙,刘晓文,丁铲.  中国兽医科技. 2001(08)
[7]不同血清型鸭疫里氏杆菌分离株的部分特性比较[J]. 张大丙,郭玉璞.  中国兽医杂志. 1999(10)
[8]鸭疫巴氏杆菌病及其并发感染的防治[J]. 郭予强,杨连楷,凌育燊,詹乐群.  养禽与禽病防治. 1994(03)
[9]北京鸭小鸭传染性浆膜炎的调查研究[J]. 郭玉璞,陈德威,范国雄,刘瑞萍.  畜牧兽医学报. 1982(02)



本文编号：3476328