表达猪O型口蹄疫病毒主要免疫原性基因的重组杆状病毒的构建及其生物学特性研究

发布时间：2021-11-06 09:55

　　口蹄疫（FMD）是由口蹄疫病毒（FMDV）感染引起的以侵害偶蹄兽为主的急性烈性传染病。该病以血清型多、传染性强、传播快,感染率高、流行范围大、宿主谱广等特点著称,可再现感染,严重危害全球养殖业。联合国粮农组织（FAO）和世界动物卫生组织（OIE）将该病列为A类动物传染病,并列入重大跨国动物疫病的全球消灭计划。目前主要应用的口蹄疫疫苗包括灭活疫苗、亚单位疫苗,DNA疫苗和病毒活载体疫苗等。以灭活疫苗应用最多,在我国口蹄疫的预防控制中发挥了重要的作用,但是它存在着灭活不彻底、潜在的生物安全等显著缺点。P1蛋白是FMDV的主要免疫原性蛋白,为FMDV的结构蛋白,在蛋白酶的作用下可以裂解成VP0、VP1、VP3结构蛋白形成病毒的衣壳。P1、VP0、VP1和VP3基因是研究FMDV新型疫苗的主要基因。鉴于此,本研究开展以下研究内容:1、表达FMDV主要免疫原性基因的重组杆状病毒rBac-VP130、rBac-P111、rBac-P11-3C 的构建将FMDV耿马毒株的主要免疫原性基因VP0、VP1、VP3,FMDV耿马毒株三个拷贝的P1基因（GMP1）以及GMP1和3C基因分别插入杆状病毒表达载... 

【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：61 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１－１?２０１３年第一季度口蹄疫世界流行现状（０皿，２０１３）??Ｆｌｇ．１－１?ＦＭＤ?Ｏｕ化ｒｅａｋｓ?ｄｌｕｒｉｎｇ?化ｅ?ｆｉｒｓｔ?ｑｕａｒｔｅｒ?ｉｎ?２０１３?（ＯＩＥ，?２０１３?）??

??图１－１?２０１３年第一季度口蹄疫世界流行现状（０皿，２０１３）??Ｆｌｇ．１－１?ＦＭＤ?Ｏｕ化ｒｅａｋｓ?ｄｌｕｒｉｎｇ?化ｅ?ｆｉｒｓｔ?ｑｕａｒｔｅｒ?ｉｎ?２０１３?（ＯＩＥ，?２０１３?）??ＦＭＤＶ的血清型及流行毒株在不同的地区是不同的，全球ｗｏ型多见，Ｃ型少??见。１９９０年流行的泛亚株０型ＦＭＤＶ使许多的国家大规模的爆发了?口蹄疫。而２００９??年在广东发现猪０型口蹄疫耿马毒株Ｗ后，最近在中国及其周边国家主要流行该毒??株。在２０１１年黄山口蹄疫会议上，国家参考实验室刘向涛研究员指出耿马毒株在未??来一段时间是我国主要的流行毒株，对猪０型口蹄疫的防控工作主要Ｗ耿马毒株为??重点（黄山病毒学研讨会）。??２??

表达猪ｏ型口蹄疫病毒主要免疫原性基因的重组杆状病毒的构建及其生物学特巧研究表达ＦＭＤＶＰ１基因的重姐杆状病毒巧ａｃ－Ｐｌｌｌ的构建??．１重组转移载体ｐＦＢＤｐＨ－Ｐｌ－Ｐｌ－Ｐｌ的构建??ｔＵｐＭＤ－Ｐｌ质粒为模板，通过含有不同酶切位点的特异性引物从Ｐ１基因Ｐ１公ａｗＨＩ－尼ｃｏＲＩ、Ｐ１扣／Ｉ－／加ｄｍ、Ｐｌ々７ｄ－ＴＶｏｄ片段，分别连到ＰＭＤ－１８Ｔ。利用４丄１相同的克隆方法将Ｐ１基因插入杆状病毒载体ｐＦａｓ化ａｃＤｕａｌ－ｅＧＦＰ－ｐ得重组杆状病毒转移载体ｐＦＢＤｐＨ－Ｐｌ－Ｐｌ－Ｐｌ?（ｐＦＢＤｐＨ－ＰＨｌ），经酶切鉴定体构建正确（如图４－９，４－１０所示）。??ＰｏｌｖＡ??—?

【参考文献】：
期刊论文
[1]猪口蹄疫的流行与防控[J]. 陈世平.  今日养猪业. 2012(05)
[2]杆状病毒表达载体系统的特点及其在寄生虫学上的应用[J]. 王海,胡少敏,吴忠道,余新炳.  国外医学(寄生虫病分册). 2004(04)
[3]杆状病毒表达系统研究进展及在寄生虫基因工程 疫苗中的应用前景[J]. 景志忠,王佩雅,才学鹏.  中国兽医科技. 2001(03)

硕士论文
[1]猪繁殖与呼吸综合征重组假型杆状病毒基因工程疫苗研究[D]. 王升平.华中农业大学 2008



本文编号：3479623