PRRSV毒株的分离鉴定及单克隆抗体的制备

发布时间：2021-11-08 02:10

　　猪繁殖与呼吸综合征是由猪繁殖与呼吸综合征病毒（Porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV）引起的一类传染性疾病,以母猪流产、仔猪死亡及呼吸系统紊乱为临床特征。自1987年首次发现以来,PRRSV一直对养猪业造成严重危害。1996年我国首次分离到北美洲型的PRRSV毒株,2006年国内猪场暴发的重大疫情为高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒（HP-PRRSV）感染所致,同经典毒株相比HP-PRRSV产生了新的进化分支,致病性更强。本课题初步研究了中原地区近期PRRSV的变异情况。对2011～2012年间从河南及周边省份发病猪场分离的8株PRRSV毒株Nsp2基因变异区进行了RT-PCR扩增,同时对主要结构蛋白GP5基因进行克隆测序并与GenBank中登录的我国历年来流行的PRRSV代表毒株的GP5蛋白序列进行了遗传进化分析,对主要氨基酸基序进行了比对分析。结果表明,2011～2012年在中原地区分离的8株PRRSV分离株均为Nsp2缺失变异株,GP5基因与2006年我国高致病PRRSV代表毒株JXA1同源性较高。将实验室... 

【文章来源】：郑州大学河南省 211工程院校

【文章页数】：62 页

【学位级别】：硕士

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中文摘要
Abstract
第一章 前言
    1 猪繁殖与呼吸综合征病毒流行过程中的分子进化
        1.1 猪繁殖与呼吸综合症病毒的发现
        1.2 猪繁殖与呼吸综合征病毒简介
        1.3 猪繁殖与呼吸综合征病毒在中国的进化
    2 猪繁殖与呼吸综合征病毒检测方法的研究进展
        2.1 病原学检测方法
        2.2 血清学检测方法
        2.3 分子生物学检测方法
    3 猪繁殖与呼吸综合征病毒单克隆抗体的研究进展
        3.1 单克隆抗体技术
        3.2 PRRSV单克隆抗体研究进展
    4 本研究的目的和意义
第二章 8株PRRSV毒株分离鉴定及分子流行病学研究
    1 材料与方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    2 结果
        2.1 PRRSV毒株的分离鉴定结果
        2.2 PRRSV总RNA提取结果
        2.3 PRRSV分离毒株Nsp2基因缺失鉴定结果
        2.4 ORF5基因扩增结果
        2.5 重组质粒双酶切鉴定结果
        2.6 ORF5基因序列对比
        2.7 GP5氨基酸序列比对
    3 讨论
第三章 PRRSV HN07-1株的培养与纯化
    1 材料与方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    2 结果
        2.1 PRRSV HN07-1株感染Marc-145细胞情况
        2.2 TCID_(50)测定结果
    3 讨论
第四章 PRRSV单克隆抗体的制备
    1 材料与方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    2 结果
        2.1 病毒蛋白含量测定结果
            2.2 ELISA筛选方法的建立
            2.3 杂交瘤细胞株的筛选结果
            2.4 间接免疫荧光试验结果
    3 讨论
第五章 全文总结
参考文献
致谢
作者简介
学习经历
科研经历
所获奖励
硕士在读期间撰写和已发表的论文



本文编号：3482793