牦牛CLDN3基因特征及FSH对CLDN3、CLDN11在睾丸支持细胞表达的影响
发布时间：2021-11-10 00:32
睾丸支持细胞（sertoli cells,SCs）的紧密连接蛋白（claudins,CLDNs）在精子迁移过程中扮演着开关的角色。为探索CLDNs对牦牛（Bos grunniens）SC的生物学作用,本研究获取牦牛CLDN3基因序列,对其进行生物信息学分析,并检测FSH对SCs CLDN3、CLDN11表达的影响。扩增CLDN3基因序列,测序并拼接,用生物信息软件分析牦牛CLDN3 m RNA特征。运用实时荧光定量PCR（quantitative real time polymerase chain reaction,q RT-PCR）检测FSH对牦牛SCs CLDN3 m RNA、CLDN11 m RNA表达的影响。通过免疫蛋白印记（Western bloting,WB）方法,检测FSH对牦牛SCs CLDN3蛋白、CLDN11蛋白表达的影响,并采用免疫荧光染色对CLDN3蛋白、CLDN11蛋白进行定位检测。结果表明:（1）本研究成功克隆得到1074 bp含有开放阅读框的牦牛CLDN3 c DNA序列（Gen Bank No.YK 411920）,其中编码区660 bp,编码219氨...
【文章来源】：甘肃农业大学甘肃省
【文章页数】：65 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
牦牛睾丸睾丸支持细胞的鉴定Figure1ThesertolicellsidentificationofyakA.倒置显微镜观察(200×)
甘肃农业甘肃农业大学性氨基酸占 53.2%，带电荷氨基酸占 11的碱性氨基酸。不稳定系数 33.89，属稳性蛋白。与其他部分物种 CLDN3 氨基的氨基酸序列完全相同，和其他物种氨90%)，通过 Neighbor-Joining（NJ）法构发现，牦牛同偶蹄目动物为一支，肉食一个小分支。
图 3 不同物种间 CLDN3 的亲缘关系Figure 3 Phylogenetic relationship of CLDN3 fromdifferent species.本研究中牦牛 CLDN3 以▲表示；标尺：表示两个序列之间差异 1%The newly identified yak CLDN3 fromthe present study are indicated with ▲; 1%differences between two sequences3 讨论目前 CLDN3 的研究主要集中于肾脏、肠、肝脏和皮肤[110]，对究甚少。本次研究使用体外培养成年健康牦牛 SCs，初步研究 CLDN牛精子生成中的作用。本研究成功克隆出牦牛 CLDN3 基因序列，本隆得到牦牛 CLDN3 基因序列(GenBank No. KY419920)，其全长含1074 bp，编码区 660 bp，编码 219 氨基酸， CLDN3 氨基酸序列比对
【参考文献】：
期刊论文
[1]二花脸FSH的高量表达对大白公猪睾丸的影响[J]. 徐盼,李完波,蒋凯,杨强,李龙云,乔传民,龚焕发,任军,幸宇云. 农业生物技术学报. 2016(12)
[2]牦牛GLUT1、GLUT3和GLUT8基因的克隆及其在乳腺上皮细胞中的表达[J]. 李月琴,潘阳阳,田奎丽,赵天,张译夫,樊江峰,崔燕,余四九. 农业生物技术学报. 2017(01)
[3]EGF、EGFR在牦牛卵母细胞中的表达及对胚胎发育能力的作用[J]. 潘阳阳,李秦,崔燕,樊江峰,杨琨,何俊峰,余四九. 中国农业科学. 2015(12)
[4]FSH对体外培养仔猪睾丸支持细胞周期的影响[J]. 孙思,张会琼,王怡,张姣姣,王鲜忠,张家骅. 中国畜牧杂志. 2014(05)
[5]FSH对体外培养仔猪睾丸支持细胞cyclin D1 mRNA和cyclin E1 mRNA表达的影响[J]. 张姣姣,王怡,张会琼,孙思,孙燕,王鲜忠,张家骅. 中国农业科学. 2013(06)
[6]Claudins整合膜蛋白研究进展[J]. 吕健. 医学综述. 2009(18)
硕士论文
[1]FSH诱导体外培养的天祝白牦牛卵泡颗粒细胞凋亡及其对调控基因Fas/FasLmRNA表达的影响[D]. 李谷月.甘肃农业大学 2013
本文编号：3486212
【文章来源】：甘肃农业大学甘肃省
【文章页数】：65 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
牦牛睾丸睾丸支持细胞的鉴定Figure1ThesertolicellsidentificationofyakA.倒置显微镜观察(200×)
甘肃农业甘肃农业大学性氨基酸占 53.2%，带电荷氨基酸占 11的碱性氨基酸。不稳定系数 33.89，属稳性蛋白。与其他部分物种 CLDN3 氨基的氨基酸序列完全相同，和其他物种氨90%)，通过 Neighbor-Joining（NJ）法构发现，牦牛同偶蹄目动物为一支，肉食一个小分支。
图 3 不同物种间 CLDN3 的亲缘关系Figure 3 Phylogenetic relationship of CLDN3 fromdifferent species.本研究中牦牛 CLDN3 以▲表示；标尺：表示两个序列之间差异 1%The newly identified yak CLDN3 fromthe present study are indicated with ▲; 1%differences between two sequences3 讨论目前 CLDN3 的研究主要集中于肾脏、肠、肝脏和皮肤[110]，对究甚少。本次研究使用体外培养成年健康牦牛 SCs，初步研究 CLDN牛精子生成中的作用。本研究成功克隆出牦牛 CLDN3 基因序列，本隆得到牦牛 CLDN3 基因序列(GenBank No. KY419920)，其全长含1074 bp，编码区 660 bp，编码 219 氨基酸， CLDN3 氨基酸序列比对
【参考文献】：
期刊论文
[1]二花脸FSH的高量表达对大白公猪睾丸的影响[J]. 徐盼,李完波,蒋凯,杨强,李龙云,乔传民,龚焕发,任军,幸宇云. 农业生物技术学报. 2016(12)
[2]牦牛GLUT1、GLUT3和GLUT8基因的克隆及其在乳腺上皮细胞中的表达[J]. 李月琴,潘阳阳,田奎丽,赵天,张译夫,樊江峰,崔燕,余四九. 农业生物技术学报. 2017(01)
[3]EGF、EGFR在牦牛卵母细胞中的表达及对胚胎发育能力的作用[J]. 潘阳阳,李秦,崔燕,樊江峰,杨琨,何俊峰,余四九. 中国农业科学. 2015(12)
[4]FSH对体外培养仔猪睾丸支持细胞周期的影响[J]. 孙思,张会琼,王怡,张姣姣,王鲜忠,张家骅. 中国畜牧杂志. 2014(05)
[5]FSH对体外培养仔猪睾丸支持细胞cyclin D1 mRNA和cyclin E1 mRNA表达的影响[J]. 张姣姣,王怡,张会琼,孙思,孙燕,王鲜忠,张家骅. 中国农业科学. 2013(06)
[6]Claudins整合膜蛋白研究进展[J]. 吕健. 医学综述. 2009(18)
硕士论文
[1]FSH诱导体外培养的天祝白牦牛卵泡颗粒细胞凋亡及其对调控基因Fas/FasLmRNA表达的影响[D]. 李谷月.甘肃农业大学 2013
本文编号：3486212
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