奶牛ApoB100基因的原核表达及多克隆抗体的制备

发布时间：2021-11-13 11:45

　　奶牛载脂蛋白B100（ApoB100）是目前所知道的蛋白分子量最大的蛋白质之一,它含有4536个氨基酸残基,是组成极低密度脂蛋白（VLDL）颗粒结构的多肽链,是VLDL中的甘油三酯（TG）结合蛋白,如果没有ApoB100,肝脏中的TG是不可能分泌的。ApoB100在肝脏中的功能是增加VLDL的组装、分泌、减少肝脏中的脂肪沉积,对脂肪肝的发生起到有效防治。VLDL颗粒的组装和分泌受肝脏中ApoB100基因表达和ApoB100的生物活性控制,ApoB100的生物活性和基因表达水平对VLDL在肝脏中组装和分泌起到关键作用。VLDL在肝脏的合成和TG转运出肝脏的速度直接受到ApoB100合成及正常应用的影响。ApoB100作为VLDL的最主要的载脂蛋白和结构蛋白,主要是参与VLDL、低密度脂蛋白（LDL）的组装和分泌。ApoB100在肝脏中的确切机制仍然不是很清楚,可能受到营养和激素等因素的调节。本实验采用基因工程等分子生物学技术对ApoB100基因进行了克隆和表达,获得大量ApoB100蛋白,并对表达出的ApoB100蛋白进行了纯化、复性、免疫试验动物。根据GenBank中收录的ApoB10... 

【文章来源】：吉林农业大学吉林省

【文章页数】：52 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
目录
第一篇 综述
    1.1 围产期奶牛的能量代谢特点
    1.2 奶牛脂肪肝
    1.3 脂肪肝发生机理
    1.4 能量匮乏引起的体脂动员
    1.5 脂肪在肝脏中的代谢
    1.6 VLDL与LDL的代谢功能
    1.7 ApoB100在肝脏中的影响
    1.8 在肝脏VLDL组装和分泌过程中ApoB100的主要作用
    1.9 原核表达系统
    1.10 包涵体蛋白的形成
    1.11 本研究的立题依据
    1.12 本研究的意义
第二篇 实验内容及方法
    第一章 重组蛋白ApoB100基因表达载体的构建
        1.1 材料和方法
        1.2 结果
        1.3 讨论
        1.5 小结
    第二章 融合蛋白pET-28a-ApoB100的制备
        2.1 材料和方法
        2.2 结果
        2.3 讨论
        2.5 小结
    第三章 多克隆抗体的制备
        3.1 材料和方法
        3.2 结果
        3.3 讨论
        3.4 小结
    第四章 结论
参考文献
附录
作者简介
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]患脂肪肝奶牛的代谢、内分泌和组织基因表达特征[J]. 夏成,王哲,张洪友,徐闯,张才.  中国农业科学. 2010(08)
[2]《基因工程概论》教学改革实践[J]. 易润华,刘大召,蒋鸿标,何觉民.  安徽农业科学. 2010(09)
[3]奶牛酮病和脂肪肝综合症研究进展[J]. 黄克和.  中国乳业. 2008(06)
[4]亚临床酮病奶牛血液部分生化指标代谢水平研究[J]. 张志刚,李小兵,刘国文,孙国权,王哲,郭昌明,高瑞峰,潘志忠.  中国农学通报. 2008(06)
[5]奶牛酮病诊治研究进展[J]. 江精华,何宝祥,黄迪,韦振荣,梁真.  动物医学进展. 2007(S1)
[6]干乳期能量摄入水平对围产期奶牛肝载脂蛋白B100mRNA丰度的影响[J]. 孙玉成,王雪莹,李红梅,王哲,张嘉保.  中国兽医学报. 2006(03)
[7]包涵体蛋白的变复性研究[J]. 高永贵,关怡新,姚善泾.  科技通报. 2003(01)
[8]奶牛脂肪肝的发病机理及防制措施[J]. 陈代文.  中国畜牧兽医. 2002(03)
[9]中国奶业现状[J]. 王铁灵.  中国牧业通讯. 2002(02)
[10]包涵体蛋白体外复性的研究进展[J]. 方敏,黄华樑.  生物工程学报. 2001(06)

硕士论文
[1]意大利蜜蜂蜂毒肽基因克隆与表达研究[D]. 朱文赫.吉林大学 2008



本文编号：3492959