迟缓爱德华菌外膜蛋白FadL原核表达及免疫原性

发布时间：2021-11-20 08:08

　　FadL是革兰阴性细菌编码的外膜通道蛋白,参与长链脂肪酸的转运,沙门菌中该蛋白作为免疫原使用具有优良的保护效果。本试验以迟缓爱德华菌FadL蛋白作为研究对象,原核表达并纯化该蛋白,进一步通过动物试验确定该蛋白的免疫特性和免疫效果。结果显示,成功表达和纯化重组FadL蛋白（rFadL）,蛋白大小为50 000。小鼠试验结果表明,rFadL免疫小鼠能产生高水平特异性抗体;斑马鱼感染试验结果表明,rFadL能够对斑马鱼迟缓爱德华菌产生一定免疫保护力,保护率可达55%。本试验揭示了迟缓爱德华菌FadL蛋白的免疫特性,为迟缓爱德华菌疫苗研发提供了参考和借鉴。 

【文章来源】：中国兽医学报. 2020,40(10)北大核心CSCD

【文章页数】：6 页

【图文】：

PCR扩增迟缓爱德华菌fadL基因

不同菌株fadL基因同源性分析

将fadL基因构建到表达载体pET-28α上,转化BL21构建重组表达菌株。对重组表达菌株进行诱导培养,利用SDS-PAGE分析蛋白表达情况。结果显示(图3),在45 000 表达出特异性条带,利用Bandscan软件分析rFadL蛋白表达量占细菌总蛋白量的63.7%左右。以His-MAb为一抗、 HRP-IgG为二抗进行Western blot分析,同样于45 000处显现出特异性条带(图4),上述结果表明重组蛋白rFadL成功表达。图4 Western blot鉴定rFadL在大肠杆菌中的表达

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3506918