中药提取物对奶牛乳腺上皮细胞增殖及蛋白含量的影响
发布时间：2021-11-22 16:03
本研究通过培养奶牛乳腺上皮细胞,并以该细胞为研究对象,研究中药复方透皮贴剂和中药复方灌注液对奶牛乳腺上皮细胞增殖、总蛋白含量以及β-酪蛋白含量的影响。从奶牛乳房无菌采取乳腺组织,通过体外原代培养、分离纯化以及传代等方法建立稳定的奶牛乳腺上皮细胞系。倒置显微镜下对奶牛乳腺上皮细胞进行观察,做形态学鉴定；绘制细胞生长曲线；通过SDS-PAGE电泳鉴定奶牛乳腺上皮细胞所分泌的p-酪蛋白。制备中药复方透皮贴剂及其主要成分的单味中药提取物和中药复方灌注液及其主要成分的单味中药提取物,添加到奶牛乳腺上皮细胞培养液中,研究其对奶牛乳腺上皮细胞增殖、总蛋白以及p-酪蛋白含量的影响。试验结果如下：本试验中,通过组织块培养法可获得奶牛乳腺细胞,通过胰蛋白酶多次消化的方法可基本去除奶牛乳腺细胞中的成纤维细胞,获得较为纯化的奶牛乳腺上皮细胞；经过传代以后,奶牛乳腺上皮细胞的形态以及生理功能不发生改变,从而建立了稳定的奶牛乳腺上皮细胞系。采用不同浓度的中药复方灌注液及其单味中药的提取液处理奶牛乳腺上皮细胞1d后,在浓度为10 mg·mL-1时OD值最大,但促进细胞增殖的效果不显著（P>0.05）。采用10...
【文章来源】：安徽农业大学安徽省
【文章页数】：52 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２－１奶牛乳腺上皮细胞形态学观察??
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【参考文献】：
期刊论文
[1]重楼复方对人肝癌SMMC-7721细胞增殖、凋亡及Survivin表达的影响[J]. 胡文静,刘宝瑞,钱晓萍,涂云霞,王婷婷,禹立霞. 中华中医药杂志. 2013(02)
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[8]中药复方灌注剂治疗奶牛乳房炎的药效与应用安全性研究[J]. 孟庆娟,冯士彬,李志明,王希春,韩春杨,邹松阳,刘琦山,吴金节. 湖北农业科学. 2011(09)
[9]规模化奶牛养殖区奶牛乳房炎的调查及病因分析[J]. 王玲,李宏胜,王正兵,严作庭,苗小楼,陈炅然,祁光红,肖俊武,张继良. 中国乳业. 2010(10)
[10]马兰提取物抗氧化性研究[J]. 吕丽爽,谢天飞,樊玉洁. 食品科学. 2010(13)
博士论文
[1]王不留行、黄芪对奶牛乳腺上皮细胞体外增殖与分泌功能影响的研究[D]. 丁月云.南京农业大学 2008
硕士论文
[1]奶牛乳腺上皮细胞体外培养体系的建立及其应用[D]. 崔立莉.新疆农业大学 2006
本文编号：3512026
【文章来源】：安徽农业大学安徽省
【文章页数】：52 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２－１奶牛乳腺上皮细胞形态学观察??
图２－１奶牛乳腺上皮细胞形态学观察??Ｆｉｇ．２－１?ｄａｉｒｙ?ｃｏｗ?ｍａｍｍａｒｙ?ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ?ｃｅｌｌ?ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ??Ａ－Ｄ．培养口ｄ的原代细胞ＯＯＯＯ：?Ｅ－任原代细胞经过膜蛋白酶纯化后，上皮细胞与成纤维细胞分界（ｌＯＯｘ）?Ｈ．第３代，铺路??石状乳腺上皮细胞（２０００；?Ｉ．第３代，铺路石状乳腺上皮细施（ｌＯＯｘ）；?Ｊ－Ｋ．第３代，分泌乳滴的乳腺上皮细胞ＵＯＯｘ）；??Ａ－Ｂ．?Ｐｒｉｍａｒｙ?ｍａｍｍａｒｙ?ｅｐｉ化ｅｌｉａ］?ｃｅｌｌｓ?ａｆｔｅｒ?ｃｕｌｔｕｃｄ?ｆｏｒ?１２?ｄａｙｓ（?１００?巳－Ｇ．?Ｔｈｅ?ｃｌｅａｒ?ｂｏｕｎｄａｒｉｅｓ?ｂｅｔｗｅｅｎ?ｅｐｉ化ｄｉａｌ?ｃｅｌｉｓ?ａｎｄ??巧ｂｒｏｂｌａｓｔｓ?ａｆｔｅｒ?ｐｕｒｉｆｉｅｄ?ｂｙ?ｔｒｙｐｓｉｎ（ｌＯＯｘ）；?Ｈ．?Ｃｏｂｂｌｅｓｔｏｎｅ?ｍａｍｍａｒｙ?ｅｐｉ化ｅｌｉａｌ?ｃｅｌｌｓ，?３ｒｄ?ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ（２０〇ｘ）；?Ｉ．?Ｃｏｂｂｌｅｓ化ｎｅ?ｍａｍｍａｒｙ??ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ?ｃｅｌｌｓ，?３ｒｄ?ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ（?１００?Ｘ）；?Ｊ－Ｋ．?Ｍａｍｍａｒｙ?ｅｐｋｈｄｉａｌ?ｃｅｌｌｓ?ｆｏｒ?ｓｅｃｒｅｔｉｎｇ?ｍｉｌｋ?（１０〇ｘ）；??２．２奶牛乳腺上皮细胞生物学性状的检测??２．２．１奶牛乳腺上皮细胞生长曲线??由图２可见，Ｗ培养时间为横坐标，３孔细胞４９２?ｎｍ处吸光值的平均值为??纵坐标，绘制奶牛韩腺上皮细胞生长曲线。细胞生长曲线显示：乳腺上皮细胞生??长延迟期为０－２?ｄ
图２－１奶牛乳腺上皮细胞形态学观察??Ｆｉｇ．２－１?ｄａｉｒｙ?ｃｏｗ?ｍａｍｍａｒｙ?ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ?ｃｅｌｌ?ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ??Ａ－Ｄ．培养口ｄ的原代细胞ＯＯＯＯ：?Ｅ－任原代细胞经过膜蛋白酶纯化后，上皮细胞与成纤维细胞分界（ｌＯＯｘ）?Ｈ．第３代，铺路??石状乳腺上皮细胞（２０００；?Ｉ．第３代，铺路石状乳腺上皮细施（ｌＯＯｘ）；?Ｊ－Ｋ．第３代，分泌乳滴的乳腺上皮细胞ＵＯＯｘ）；??Ａ－Ｂ．?Ｐｒｉｍａｒｙ?ｍａｍｍａｒｙ?ｅｐｉ化ｅｌｉａ］?ｃｅｌｌｓ?ａｆｔｅｒ?ｃｕｌｔｕｃｄ?ｆｏｒ?１２?ｄａｙｓ（?１００?巳－Ｇ．?Ｔｈｅ?ｃｌｅａｒ?ｂｏｕｎｄａｒｉｅｓ?ｂｅｔｗｅｅｎ?ｅｐｉ化ｄｉａｌ?ｃｅｌｉｓ?ａｎｄ??巧ｂｒｏｂｌａｓｔｓ?ａｆｔｅｒ?ｐｕｒｉｆｉｅｄ?ｂｙ?ｔｒｙｐｓｉｎ（ｌＯＯｘ）；?Ｈ．?Ｃｏｂｂｌｅｓｔｏｎｅ?ｍａｍｍａｒｙ?ｅｐｉ化ｅｌｉａｌ?ｃｅｌｌｓ，?３ｒｄ?ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ（２０〇ｘ）；?Ｉ．?Ｃｏｂｂｌｅｓ化ｎｅ?ｍａｍｍａｒｙ??ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ?ｃｅｌｌｓ，?３ｒｄ?ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ（?１００?Ｘ）；?Ｊ－Ｋ．?Ｍａｍｍａｒｙ?ｅｐｋｈｄｉａｌ?ｃｅｌｌｓ?ｆｏｒ?ｓｅｃｒｅｔｉｎｇ?ｍｉｌｋ?（１０〇ｘ）；??２．２奶牛乳腺上皮细胞生物学性状的检测??２．２．１奶牛乳腺上皮细胞生长曲线??由图２可见，Ｗ培养时间为横坐标，３孔细胞４９２?ｎｍ处吸光值的平均值为??纵坐标，绘制奶牛韩腺上皮细胞生长曲线。细胞生长曲线显示：乳腺上皮细胞生??长延迟期为０－２?ｄ
【参考文献】：
期刊论文
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[8]中药复方灌注剂治疗奶牛乳房炎的药效与应用安全性研究[J]. 孟庆娟,冯士彬,李志明,王希春,韩春杨,邹松阳,刘琦山,吴金节. 湖北农业科学. 2011(09)
[9]规模化奶牛养殖区奶牛乳房炎的调查及病因分析[J]. 王玲,李宏胜,王正兵,严作庭,苗小楼,陈炅然,祁光红,肖俊武,张继良. 中国乳业. 2010(10)
[10]马兰提取物抗氧化性研究[J]. 吕丽爽,谢天飞,樊玉洁. 食品科学. 2010(13)
博士论文
[1]王不留行、黄芪对奶牛乳腺上皮细胞体外增殖与分泌功能影响的研究[D]. 丁月云.南京农业大学 2008
硕士论文
[1]奶牛乳腺上皮细胞体外培养体系的建立及其应用[D]. 崔立莉.新疆农业大学 2006
本文编号：3512026
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