环形泰勒虫遗传多样性分析及其在感染过程中对牛TLRs和NLRs信号通路的影响

发布时间：2021-11-22 22:48

　　牛环形泰勒虫病是由环形泰勒虫引起的蜱传血液原虫病,给热带、亚热带和温带等地区的畜牧业生产造成了严重威胁。病原入侵会引起宿主细胞产生复杂的天然免疫反应,其中,TLRs和NLRs信号通路在抗寄生虫感染中发挥重要的免疫调节作用。但是,目前对参与抗环形泰勒虫感染的先天免疫相关机制知之甚少。因此,本研究采用实验室保存的环形泰勒虫喀什株作为研究对象,通过转录组测序、PCR Aarray、ELISA等技术和方法,针对环形泰勒虫感染牛引起的先天免疫信号通路关键分子的变化进行研究,鉴定参与牛抗环形泰勒虫感染的TLRs和NLRs信号通路相关的重要分子。首先,本研究建立了牛环形泰勒虫LF-RPA检测方法,为后续体内感染环形泰勒虫的检测提供技术保障。此外,经少量临床样品验证,LF-RPA可作为一种有效的检测方法,用于该病临床样本的检测。其次,通过对新疆、辽宁、甘肃、内蒙古、天津和海南6个省区的牛环形泰勒虫进行种群遗传结构比较分析,进一步了解新疆种群的遗传特点。与其他地区种群相比,种群遗传特征和MOI分析发现,新疆种群的多样性和虫体基因型更为丰富。DAPC分析结果表明了新疆种群可能存在种群亚结构。配对F

【文章来源】：中国农业科学院北京市

【文章页数】：91 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

环形泰勒虫生活史Fig.1.1ThelifecycleofT.annulata(Tretinaetal.,2015)

图 1.2 TLR 信号转导通路Fig.1.2 TLR signaling pathways (Takagi et al., 2017) TLRs 在抗寄生虫感染免疫中的作用1 TLRs 在抗弓形虫感染中的作用抗弓形虫感染中，宿主的 TLR11 和 TLR12 是识别弓形虫肌动蛋白抑制蛋白 (PFTG) 的，同时也是树突状细胞识别弓形虫的中心传感器。研究发现，TLR11-TLR12 异二聚体在体中与 PFTG 可以直接相互作用，招募 MyD88 分子，启动下游信号转导途径，进而介 的产生 (Raetz et al., 2013)。此外，有学者发现小鼠体内同时缺失 TLR7/TLR9/TLR11，宿对弓形虫 PFTG 的识别能力，导致其对弓形虫极其易感 (Andrade et al., 2013)。然而，在组中 TRL11 是假基因，且不存在 TLR12，因此，TLR11 和 TLR12 在小鼠体内发挥抗弓作用并不适用于人类的天然免疫系统中。eiling 等研究发现，TLR2 缺失的小鼠对极高剂量的弓形虫易感，而常规的虫体剂量对宿统没有明显的损伤，并且在结核杆菌感染实验中也观察到类似的现象 (Reiling et al., 2002究报道，利用弓形虫表面蛋白糖基磷脂酰肌醇 (GPI) 刺激 TLR2/TLR4 共缺失的巨噬细现 TNFα 的分泌受阻；TLR2/TLR4 共缺失的小鼠感染弓形虫后，其脑内包囊的数目增加了

博士学位论文 第二章 牛环形泰勒虫 LF-RPA 检测：95℃预变性 3 min94℃变性 1 min61.5℃退火温度 50 sec 35 个循环68℃延伸 1 min68℃总延伸 10 minPCR 产物，在 2%琼脂糖凝胶上检测目的条带 (393 bp)。将阳性样品剩余工生物工程有限公司测序。测序得到的结果进行 BLAST 分析，同时和列号：KP731977) 进行分析比对，进一步确认样品是否感染有环形泰勒虫分析物片显微镜镜检和 PCR 检测技术，自甘肃省武威市农户饲养的牛群中筛选体感染的 7 月龄的黄牛，图 2.1 为检测的结果。

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3512590