西藏牦牛牛支原体的分离鉴定及其生长特性、耐药性分析
发布时间：2021-11-24 16:01
为确定引起西藏牦牛常发多发肺炎的细菌病原体,采集145份西藏牦牛鼻腔粘液,通过病原分离培养、菌落形态观察、生化试验和PCR鉴定等方法进行细菌检测;通过OD630和pH变化对分离株进行生长曲线测定;采用K-B纸片法进行药物敏感性试验。结果显示:从145份牦牛鼻腔粘液中分离得到10株牛支原体;分离株菌落形态和生化试验结果均符合牛支原体的生物学特性;通过PCR分别扩增得到238bp的uvrC特异性基因与1 500bp16SrRNA基因。10株分离株间的uvrC特异性基因和16SrRNA基因序列同源性较高,均与国际标准株PG45有高度同源性,uvrC特异性基因序列和16SrRNA基因序列与国际标准株PG45的同源性分别为98.4%～100%和99.1%～99.9%。生长曲线测定表明,分离株在PPLO培养基中培养24h内为迟缓期,培养42h后开始进入稳定期,78h后开始进入衰亡期;3个分离株培养物的平均pH随着培养时间延长不断降低,其中24～42h期间pH下降最快,随后下降速度减慢,至78h后几乎不再变化。药物敏感性试验表明,分离株对大环内酯类、氨基糖苷类和林可胺类等药物均存在不同程度的耐药,但...
【文章来源】：中国农业大学学报. 2020,25(12)北大核心CSCD
【文章页数】：9 页
【部分图文】：
图1 分离株菌落形态（40X)
16SrRNA基因同源性分析结果显示，10株西藏牦牛牛支原体分离株之间序列同源性为99.4%～100%；与我国牛支原体地方株的同源性为99.1%～100%；与日本株同源性为99.2%～100%；与匈牙利株的同源性为99.1%～100%；与瑞士株同源性为99.2%～100%；与PG45株同源性为99.1%～99.9%；与PG2株的同源性为98.2%～98.7%；与PG1、PG3、G5的同源性为80.1%～80.7%。2.4.2 基因进化树分析
本试验从145份样品中得到的10份纯培养物，经菌落形态观察、生化鉴定、PCR鉴定及序列分析，证实其均为牛支原体，其分离率为6.90%(10/145）。2.5 生长曲线测定
【参考文献】：
期刊论文
[1]林芝市牛支原体病流行病学调查[J]. 严明帅,苏中华,王冬经,王子,唐无双,索朗斯珠,牛家强. 高原农业. 2020(02)
[2]牛支原体检测方法研究进展[J]. 王桂玲,吴胜昔,梁望旺,马培杰,曾政,黄恒,李志. 重庆理工大学学报(自然科学). 2019(01)
[3]西藏牦牛牛支原体感染的血清学调查分析[J]. 王冬经,陈建春,徐业芬,索朗斯珠,苏中华,牛家强. 甘肃畜牧兽医. 2018(06)
[4]新疆不同地区牛支原体分离株oppD/F基因的克隆和序列分析[J]. 师燕霞,凌晨,杨铭伟,张锐,朱玲,阮东,王静梅,剡根强. 中国兽医学报. 2018(02)
[5]畜禽支原体耐药性及耐药机制研究进展[J]. 宫晓炜,马文瑛,陈启伟,郑福英,刘永生. 中国畜牧兽医. 2017(08)
[6]牛支原体TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立[J]. 李建,高航飞,安维雪,牛同州,赵永春,遇培之,满都拉图,乌力吉那仁,王建国,申之义. 中国兽医学报. 2017(06)
[7]宁夏某肉牛场牛支原体分离鉴定及病理组织学观察[J]. 郭亚男,曹思婷,何生虎,王爽,张鑫,孙鹏. 动物医学进展. 2017(03)
[8]牦牛分布特点及其种群数量[J]. 孟庆辉,陈永杏,董红敏,白加德,刘艳菊,郭青云,成振华. 家畜生态学报. 2017(03)
[9]西藏和四川红原牦牛支原体感染的血清学检测[J]. 李坤,韩照清,赵晓东,谢荣清,官久强,李家奎. 畜牧与兽医. 2015(12)
[10]西藏牦牛遗传多样性的ISSR分析[J]. 姚慧,钟金城,姬秋梅,张成福,信金伟,陈智华,柴志欣. 生态学杂志. 2015(11)
博士论文
[1]宁夏地区永宁县牛支原体病流行病学调查及防治技术研究[D]. 邵倩.甘肃农业大学 2017
硕士论文
[1]牛支原体重组酶聚合酶扩增（RPA）检测方法的建立和样品DNA提取方法的研究[D]. 翟肖辉.中国农业科学院 2019
[2]牛支原体LAMP检测方法的建立及体外传代致弱菌株的特性鉴定[D]. 白智迪.华中农业大学 2011
本文编号：3516305
【文章来源】：中国农业大学学报. 2020,25(12)北大核心CSCD
【文章页数】：9 页
【部分图文】：
图1 分离株菌落形态（40X)
16SrRNA基因同源性分析结果显示，10株西藏牦牛牛支原体分离株之间序列同源性为99.4%～100%；与我国牛支原体地方株的同源性为99.1%～100%；与日本株同源性为99.2%～100%；与匈牙利株的同源性为99.1%～100%；与瑞士株同源性为99.2%～100%；与PG45株同源性为99.1%～99.9%；与PG2株的同源性为98.2%～98.7%；与PG1、PG3、G5的同源性为80.1%～80.7%。2.4.2 基因进化树分析
本试验从145份样品中得到的10份纯培养物，经菌落形态观察、生化鉴定、PCR鉴定及序列分析，证实其均为牛支原体，其分离率为6.90%(10/145）。2.5 生长曲线测定
【参考文献】：
期刊论文
[1]林芝市牛支原体病流行病学调查[J]. 严明帅,苏中华,王冬经,王子,唐无双,索朗斯珠,牛家强. 高原农业. 2020(02)
[2]牛支原体检测方法研究进展[J]. 王桂玲,吴胜昔,梁望旺,马培杰,曾政,黄恒,李志. 重庆理工大学学报(自然科学). 2019(01)
[3]西藏牦牛牛支原体感染的血清学调查分析[J]. 王冬经,陈建春,徐业芬,索朗斯珠,苏中华,牛家强. 甘肃畜牧兽医. 2018(06)
[4]新疆不同地区牛支原体分离株oppD/F基因的克隆和序列分析[J]. 师燕霞,凌晨,杨铭伟,张锐,朱玲,阮东,王静梅,剡根强. 中国兽医学报. 2018(02)
[5]畜禽支原体耐药性及耐药机制研究进展[J]. 宫晓炜,马文瑛,陈启伟,郑福英,刘永生. 中国畜牧兽医. 2017(08)
[6]牛支原体TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立[J]. 李建,高航飞,安维雪,牛同州,赵永春,遇培之,满都拉图,乌力吉那仁,王建国,申之义. 中国兽医学报. 2017(06)
[7]宁夏某肉牛场牛支原体分离鉴定及病理组织学观察[J]. 郭亚男,曹思婷,何生虎,王爽,张鑫,孙鹏. 动物医学进展. 2017(03)
[8]牦牛分布特点及其种群数量[J]. 孟庆辉,陈永杏,董红敏,白加德,刘艳菊,郭青云,成振华. 家畜生态学报. 2017(03)
[9]西藏和四川红原牦牛支原体感染的血清学检测[J]. 李坤,韩照清,赵晓东,谢荣清,官久强,李家奎. 畜牧与兽医. 2015(12)
[10]西藏牦牛遗传多样性的ISSR分析[J]. 姚慧,钟金城,姬秋梅,张成福,信金伟,陈智华,柴志欣. 生态学杂志. 2015(11)
博士论文
[1]宁夏地区永宁县牛支原体病流行病学调查及防治技术研究[D]. 邵倩.甘肃农业大学 2017
硕士论文
[1]牛支原体重组酶聚合酶扩增（RPA）检测方法的建立和样品DNA提取方法的研究[D]. 翟肖辉.中国农业科学院 2019
[2]牛支原体LAMP检测方法的建立及体外传代致弱菌株的特性鉴定[D]. 白智迪.华中农业大学 2011
本文编号：3516305
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