一株单核细胞增生李斯特菌分离株的分子分型鉴定及其生物学特性

发布时间：2021-11-26 23:39

　　从上海某羊养殖场获得了一株单核细胞增生李斯特菌分离株CMG47。为了确定该单核细胞增生李斯特菌分离株的分子分型,了解其生物学特性,本研究通过多重PCR对该菌株进行谱系和血清型分析,利用多位点序列分型（MLST）方法鉴定其分子分型。采用PCR方法对主要毒力基因进行检测,并通过体外观察和荧光定量PCR对菌株溶脂溶血特性进行分析。将菌株通过腹腔注射ICR小鼠和静脉注射斑马鱼,测定其毒力。研究结果表明该分离株属于谱系Ⅰ,1/2b血清型;序列分型为ST619;携带prfA、inlA、inlB、plcA、plcB、mpl、actA、hly等主要毒力因子;体外无明显溶脂活性,溶血活性较弱;小鼠和斑马鱼试验均显示,该分离株属于强毒株,与强毒参考株EGDe的毒力相当（P>0.05）。该分离株的谱系/血清型为引起李斯特菌病的主要型别,拥有整套主要毒力因子,为单增李斯特菌强毒株。本研究为李斯特菌病散发病例的流行和传播特征分析提供了分子生物学基础,对建立健全李斯特菌监测体系和风险评估意义重大。 

【文章来源】：畜牧兽医学报. 2020,51(05)北大核心CSCD

【文章页数】：9 页

【部分图文】：

图1 分离株CMG47谱系和血清型的多重PCR鉴定结果

为探明分离株CMG47毒力的分子基础,对参考菌株EGDe和分离株CMG47的主要毒力基因、内化素基因以及应激调控基因(prfA-plcA-hly-mpl-plcB-actA-inlA-inlB-sigB)进行PCR扩增。结果显示,分离株CMG47中含有LIPI-1的完整毒力基因,包含6个主要毒力基因actA、hly、mpl、plcA、plcB和prfA ,两个内化素基因inlA和inlB以及应激调控基因sigB(图2),表明分离株CMG47具有潜在致病性和侵袭性。2.4 分离株生长特性分析

与参考菌株EGDe相比,分离株CMG47在12 h内的生长趋势和生长速度与参考株相当(图3),未见显著性差异(P>0.05),提示分离株具有正常的生长能力。2.5 分离株溶血和溶脂特性分析

【参考文献】：
期刊论文
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硕士论文
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本文编号：3521150