益生屎肠球菌胆盐耐受调控机制的研究
发布时间：2021-11-28 03:00
益生菌具有改善肠道健康的益生性能,在养殖业中应用已经日渐广泛,可作为饲用抗生素促生长剂的潜在替代物。益生菌饲喂后,通过胃肠到达作用部位的活菌数量直接影响其益生效果,而由宿主肝脏分泌、促进脂肪代谢的胆盐是细菌在胃肠道中必须面临的抑菌物质之一,因此胆盐耐受是益生菌在肠道中发挥益生作用的基础,然而目前关于益生菌抵抗胆盐的分子机制尚不清楚,因此,阐明益生菌胆盐耐受的分子机制对益生菌的筛选及应用具有重要意义。屎肠球菌属于鸡肠道的正常微生物区系,能改善鸡肠道健康,提高生产效率,可作为饲用益生菌使用。因此,本研究以肉鸡肠道屎肠球菌为研究对象,通过检测其益生特性和安全性,筛选出可用于饲料添加的益生屎肠球菌;进一步通过多种分子生物学手段阐明屎肠球菌双组分系统介导的胆盐耐受调控机制和胆盐水解酶介导的胆盐耐受机制。主要研究结果如下:1.通过耐酸试验和16s rDNA序列种属鉴定,从健康肉鸡肠道分离的106株乳酸菌中筛选出8株屎肠球菌作为候选菌株,通过耐胆盐试验、粘附试验、抑菌试验、溶血试验、生物被膜形成试验、药敏试验、毒力因子检测,获得一株屎肠球菌NW2。NW2菌株对上皮细胞粘附率高,对4种病原菌（肠炎沙门...
【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：131 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
游离型和结合型胆酸（KoeppenandStanton2018）
收后的胆盐通过门静脉回到肝脏，被肝脏细胞吸收结程被称为肠肝循环（图 1-2）表 1-2 胆汁酸的种类Table 1-2 Different forms of bile acid甘氨酸结合胆汁酸 牛磺酸结合胆汁Glycocholic acid甘氨胆酸 GCATaurocholic aci牛磺胆酸 TCAholic acidCDAGlycochenodeoxycholic acid甘氨鹅脱氧胆酸 GCDATaurochenodeo牛磺鹅脱氧胆酸acidAGlycodeoxycholic acid甘氨脱氧胆酸 GDCATaurodeoxycho牛磺脱氧胆酸 cidGlycolithocholic acid甘氨石胆酸 GLATaurolithocholi牛磺石胆酸 Tolic acidUAGlycoursodeoxycholic acid甘氨熊脱氧胆酸 GUATauroursodeoxy牛磺熊脱氧胆酸
S 由两种蛋白质组成：位于细胞膜上，负责信号传感的组氨酸蛋白激酶（Histinase，HK），可感知环境变化；位于细胞质内的应答调节蛋白（Response regulator，R调节适当的反应，通常是调控下游基因的表达。HK 响应环境因子，其自激酶结构保守的组氨酸残基发生自磷酸化，然后将磷酸基团转移到相应 RR 上的天冬氨酸，RR 在磷酸化后活化，通常会结合到下游靶基因的启动子区域，调控靶基因的转而启动对环境因子的应答反应（图 1-3）。TCS 在细菌细胞膜应激反应中起到重要作用。研究表明，大肠杆菌的 Cpx 双组统能被细胞膜刺激因子诱导，如碱性 pH、特异性相关蛋白和膜结构变化。这些因变化导致组氨酸蛋白激酶 CpxA 自磷酸化，然后将磷酸基团转移至反应调节子 C保守天冬氨酸残基，CpxR 磷酸化后，上调几个涉及蛋白折叠、降解和转录的基MacRitchie et al. 2008）。在枯草芽孢杆菌中，BceRS 是首先被描述的 TCS，它能调BC 转运蛋白 BceAB，使其对杆菌肽产生抗性（Papadimitriou et al. 2016）。另外， CG 含量的革兰氏阳性菌中，双组分系统 WalRK 对于维持肽聚糖稳态至关重要，能调节细胞壁相关应激（Wayne et al. 2012）。这些发现表明 TCS 在细胞膜和细胞激反应中起重要作用。
【参考文献】：
期刊论文
[1]细菌耐药性监测工作高度布局 禁抗在提速——《全国遏制动物源细菌耐药行动计划（2017-2020年）》全文及解读[J]. 饲料与畜牧. 2018(01)
博士论文
[1]氧浓度和益生菌对高海拔地区肉鸡的影响及益生菌缓解仔鸡沙门氏菌性肠炎的研究[D]. 王利红.西北农林科技大学 2018
[2]免疫活性乳酸菌的筛选及其抗肉鸡沙门氏菌感染的研究[D]. 冯军厂.西北农林科技大学 2016
硕士论文
[1]鸡源乳酸菌的分离筛选及其对肉鸡生产性能的影响[D]. 王利红.西北农林科技大学 2014
本文编号：3523569
【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：131 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
游离型和结合型胆酸（KoeppenandStanton2018）
收后的胆盐通过门静脉回到肝脏，被肝脏细胞吸收结程被称为肠肝循环（图 1-2）表 1-2 胆汁酸的种类Table 1-2 Different forms of bile acid甘氨酸结合胆汁酸 牛磺酸结合胆汁Glycocholic acid甘氨胆酸 GCATaurocholic aci牛磺胆酸 TCAholic acidCDAGlycochenodeoxycholic acid甘氨鹅脱氧胆酸 GCDATaurochenodeo牛磺鹅脱氧胆酸acidAGlycodeoxycholic acid甘氨脱氧胆酸 GDCATaurodeoxycho牛磺脱氧胆酸 cidGlycolithocholic acid甘氨石胆酸 GLATaurolithocholi牛磺石胆酸 Tolic acidUAGlycoursodeoxycholic acid甘氨熊脱氧胆酸 GUATauroursodeoxy牛磺熊脱氧胆酸
S 由两种蛋白质组成：位于细胞膜上，负责信号传感的组氨酸蛋白激酶（Histinase，HK），可感知环境变化；位于细胞质内的应答调节蛋白（Response regulator，R调节适当的反应，通常是调控下游基因的表达。HK 响应环境因子，其自激酶结构保守的组氨酸残基发生自磷酸化，然后将磷酸基团转移到相应 RR 上的天冬氨酸，RR 在磷酸化后活化，通常会结合到下游靶基因的启动子区域，调控靶基因的转而启动对环境因子的应答反应（图 1-3）。TCS 在细菌细胞膜应激反应中起到重要作用。研究表明，大肠杆菌的 Cpx 双组统能被细胞膜刺激因子诱导，如碱性 pH、特异性相关蛋白和膜结构变化。这些因变化导致组氨酸蛋白激酶 CpxA 自磷酸化，然后将磷酸基团转移至反应调节子 C保守天冬氨酸残基，CpxR 磷酸化后，上调几个涉及蛋白折叠、降解和转录的基MacRitchie et al. 2008）。在枯草芽孢杆菌中，BceRS 是首先被描述的 TCS，它能调BC 转运蛋白 BceAB，使其对杆菌肽产生抗性（Papadimitriou et al. 2016）。另外， CG 含量的革兰氏阳性菌中，双组分系统 WalRK 对于维持肽聚糖稳态至关重要，能调节细胞壁相关应激（Wayne et al. 2012）。这些发现表明 TCS 在细胞膜和细胞激反应中起重要作用。
【参考文献】：
期刊论文
[1]细菌耐药性监测工作高度布局 禁抗在提速——《全国遏制动物源细菌耐药行动计划（2017-2020年）》全文及解读[J]. 饲料与畜牧. 2018(01)
博士论文
[1]氧浓度和益生菌对高海拔地区肉鸡的影响及益生菌缓解仔鸡沙门氏菌性肠炎的研究[D]. 王利红.西北农林科技大学 2018
[2]免疫活性乳酸菌的筛选及其抗肉鸡沙门氏菌感染的研究[D]. 冯军厂.西北农林科技大学 2016
硕士论文
[1]鸡源乳酸菌的分离筛选及其对肉鸡生产性能的影响[D]. 王利红.西北农林科技大学 2014
本文编号：3523569
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