猪圆环病毒2型ORF5蛋白诱导猪肺泡巨噬细胞内质网应激和未折叠蛋白反应的作用研究
发布时间：2021-11-29 03:19
猪圆环病毒2型（Porcine circovirus type 2,PCV2）是引起猪圆环病毒相关疾病的主要传染因子,也是严重危害养猪业的重要病毒之一,主要引起以断奶仔猪多系统衰竭综合征（PMWS）为主的系列疾病。PCV2属于圆环病毒科（Circoviridae）圆环病毒属（Circovirus）成员,为单股负链DNA病毒,基因组长度为1767 bp1768 bp,呈闭合环状结构。PCV2基因组中存在多个开放阅读框（Open reading frame,ORF）,目前已经有6个ORFs编码产物被鉴定和进行了功能研究。其中,ORF1编码病毒的复制酶（Rep）,与病毒的毒力和复制有关;ORF2编码病毒的衣壳蛋白（Cap）,诱导中和抗体的产生;ORF3编码蛋白与细胞的凋亡相关,可诱导宿主细胞的凋亡;ORF4编码蛋白具有抗凋亡作用;ORF6编码蛋白可能参与细胞凋亡的调控。ORF5是本课题组鉴定和命名的一个非结构蛋白,在PCV2感染的猪肺泡巨噬细胞（Porcine alveolar macrophages,PAMs）中存在该编码产物的表达,能够使细胞S期阻滞,上调内质网应激...
【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：67 页
【学位级别】：硕士
【图文】：
PCV2基因组结构图(引自Lvetal.,2015)
PERK 是一种 I 型跨膜蛋白(Harding et al. 1999)，在 ERS 和 UPR 期间发生自化，并形成同源二聚体，活化的 PERK 能够磷酸化 Ser-51 位点上的真核起始因子 2亚基（Eukaryoticinitiationfactor2subunitalpha,eIF2α），从而抑制整体翻译水平(Haet al. 2000; Tsukumo et al. 2014; 潘玲 et al. 2017)。但是，磷酸化的 eIF2α 能够同时酸和蛋白质水平上促进活化转录因子 4（Activatingtranscriptionfactor4,ATF4）的表随后 ATF4 激活下游效应分子，如介导细胞凋亡的前凋亡分子 CHOP/GADD153（Chomologous protein/ growth arrest- and DNA damage-inducible gene 153），CHOP 蛋白通过与其他转录调节因子的相互作用来诱导或抑制基因的表达，参与纠正(Oyadomari et al. 2004)。ATF4 和 CHOP 作用的一个关键调控因子是可以对 eIF2α 去化的生长停滞和 DNA 损伤诱导蛋白 34（Growth arrest and DNAdamage-inducible p34, GADD34），可以解除前面对蛋白翻译的抑制，从而恢复蛋白质的合成，并将 降回基础水平(Kojima et al. 2003; Novoa et al. 2001)。因此，PERK/eIF2α/ATF4 通路图 1-2 未折叠蛋白反应（UPR）信号通路模式图（引自 Herz, 2012）Fig. 1-2 Signaling pathways of unfolded protein response (UPR) pattern (From Herz, 2012)
6 本研究的目的意义在前期研究中，我们发现并鉴定了 ORF5 蛋白，发现缺失后并不影响病毒的以引起细胞内质网应激标志基因 GRP78 的表达上调，细胞周期阻滞(Lv et al.们推测 ORF5 蛋白可能会诱导宿主细胞 ERS 的发生。故在此基础上对 ORF5 ERS 的作用进行研究，并探究具体的诱导机制和通路，以期为 PCV2 致病机理释提供新的科学资料。另外，ERS 在 PCV2 感染中的具体作用目前也还不清楚内质网应激、病毒的持续性感染和自我增殖之间可也能存在着某种联系。基于，我们开展了 ORF5 蛋白诱导内质网应激的研究，以更好地了解 ORF5 蛋白染中的作用。本研究的技术路线如图 1-3 所示。
【参考文献】：
期刊论文
[1]猪流行性腹泻病毒S蛋白诱导内质网应激的研究[J]. 马艳龙,薛美,符芳,尹灵丹,郭珊珊,冯力,刘平黄. 中国预防兽医学报. 2018(11)
[2]抗猪圆环病毒2型病毒样颗粒单克隆抗体的制备及鉴定[J]. 侯强,侯绍华,贾红,姜一曈,鑫婷,李明,陈青,朱鸿飞. 中国预防兽医学报. 2018(04)
[3]P58IPK通过PERK/eIF2α通路调控猪圆环病毒2型所诱导的细胞自噬[J]. 杨了寒,王凯,许苏童,张敏,胡林,何启盖,张淑君. 畜牧兽医学报. 2017(11)
[4]猪圆环病毒3型检测及其Cap结构序列和抗原性预测分析[J]. 湛洋,王东亮,王乃东,蒋一凡,黄坤,崔尚金,姜平,杨毅. 畜牧兽医学报. 2017(06)
[5]内质网应激诱导自噬的分子机制[J]. 潘玲,张翠薇,马程功,文雪,马跃荣. 现代生物医学进展. 2017(13)
[6]猪圆环病毒2型衣壳蛋白通过未折叠蛋白反应诱导凋亡（英文）[J]. Ying-shan ZHOU,Yuan-xing GU,Bao-zhu QI,Yi-kai ZHANG,Xiao-liang LI,Wei-huan FANG. Journal of Zhejiang University-Science B（Biomedicine & Biotechnology）. 2017(04)
[7]我国猪圆环病毒病的流行病学分析[J]. 张志,孙启峰,张美晶,吴发兴,刘爽,董雅琴,邵卫星,李晓成,王树双. 中国动物检疫. 2015(11)
[8]内质网应激与乙型肝炎关系的研究进展[J]. 陈然,邓鑫,彭佩纯. 广西医学. 2014(10)
[9]猪圆环病毒2型靶细胞及其受体的研究进展[J]. 李鹏,王利平,朱艳平,王选年,张改平. 中国畜牧兽医. 2013(01)
[10]内质网应激与吸入麻醉药引起的认知功能障碍的研究进展[J]. 张云珍,孔飞娟,程远,邓芳,卫法泉. 现代实用医学. 2012(10)
硕士论文
[1]猪圆环病毒2型的分离鉴定及增殖特性的研究[D]. 汤智慧.西北农林科技大学 2011
本文编号：3525735
【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：67 页
【学位级别】：硕士
【图文】：
PCV2基因组结构图(引自Lvetal.,2015)
PERK 是一种 I 型跨膜蛋白(Harding et al. 1999)，在 ERS 和 UPR 期间发生自化，并形成同源二聚体，活化的 PERK 能够磷酸化 Ser-51 位点上的真核起始因子 2亚基（Eukaryoticinitiationfactor2subunitalpha,eIF2α），从而抑制整体翻译水平(Haet al. 2000; Tsukumo et al. 2014; 潘玲 et al. 2017)。但是，磷酸化的 eIF2α 能够同时酸和蛋白质水平上促进活化转录因子 4（Activatingtranscriptionfactor4,ATF4）的表随后 ATF4 激活下游效应分子，如介导细胞凋亡的前凋亡分子 CHOP/GADD153（Chomologous protein/ growth arrest- and DNA damage-inducible gene 153），CHOP 蛋白通过与其他转录调节因子的相互作用来诱导或抑制基因的表达，参与纠正(Oyadomari et al. 2004)。ATF4 和 CHOP 作用的一个关键调控因子是可以对 eIF2α 去化的生长停滞和 DNA 损伤诱导蛋白 34（Growth arrest and DNAdamage-inducible p34, GADD34），可以解除前面对蛋白翻译的抑制，从而恢复蛋白质的合成，并将 降回基础水平(Kojima et al. 2003; Novoa et al. 2001)。因此，PERK/eIF2α/ATF4 通路图 1-2 未折叠蛋白反应（UPR）信号通路模式图（引自 Herz, 2012）Fig. 1-2 Signaling pathways of unfolded protein response (UPR) pattern (From Herz, 2012)
6 本研究的目的意义在前期研究中，我们发现并鉴定了 ORF5 蛋白，发现缺失后并不影响病毒的以引起细胞内质网应激标志基因 GRP78 的表达上调，细胞周期阻滞(Lv et al.们推测 ORF5 蛋白可能会诱导宿主细胞 ERS 的发生。故在此基础上对 ORF5 ERS 的作用进行研究，并探究具体的诱导机制和通路，以期为 PCV2 致病机理释提供新的科学资料。另外，ERS 在 PCV2 感染中的具体作用目前也还不清楚内质网应激、病毒的持续性感染和自我增殖之间可也能存在着某种联系。基于，我们开展了 ORF5 蛋白诱导内质网应激的研究，以更好地了解 ORF5 蛋白染中的作用。本研究的技术路线如图 1-3 所示。
【参考文献】：
期刊论文
[1]猪流行性腹泻病毒S蛋白诱导内质网应激的研究[J]. 马艳龙,薛美,符芳,尹灵丹,郭珊珊,冯力,刘平黄. 中国预防兽医学报. 2018(11)
[2]抗猪圆环病毒2型病毒样颗粒单克隆抗体的制备及鉴定[J]. 侯强,侯绍华,贾红,姜一曈,鑫婷,李明,陈青,朱鸿飞. 中国预防兽医学报. 2018(04)
[3]P58IPK通过PERK/eIF2α通路调控猪圆环病毒2型所诱导的细胞自噬[J]. 杨了寒,王凯,许苏童,张敏,胡林,何启盖,张淑君. 畜牧兽医学报. 2017(11)
[4]猪圆环病毒3型检测及其Cap结构序列和抗原性预测分析[J]. 湛洋,王东亮,王乃东,蒋一凡,黄坤,崔尚金,姜平,杨毅. 畜牧兽医学报. 2017(06)
[5]内质网应激诱导自噬的分子机制[J]. 潘玲,张翠薇,马程功,文雪,马跃荣. 现代生物医学进展. 2017(13)
[6]猪圆环病毒2型衣壳蛋白通过未折叠蛋白反应诱导凋亡（英文）[J]. Ying-shan ZHOU,Yuan-xing GU,Bao-zhu QI,Yi-kai ZHANG,Xiao-liang LI,Wei-huan FANG. Journal of Zhejiang University-Science B（Biomedicine & Biotechnology）. 2017(04)
[7]我国猪圆环病毒病的流行病学分析[J]. 张志,孙启峰,张美晶,吴发兴,刘爽,董雅琴,邵卫星,李晓成,王树双. 中国动物检疫. 2015(11)
[8]内质网应激与乙型肝炎关系的研究进展[J]. 陈然,邓鑫,彭佩纯. 广西医学. 2014(10)
[9]猪圆环病毒2型靶细胞及其受体的研究进展[J]. 李鹏,王利平,朱艳平,王选年,张改平. 中国畜牧兽医. 2013(01)
[10]内质网应激与吸入麻醉药引起的认知功能障碍的研究进展[J]. 张云珍,孔飞娟,程远,邓芳,卫法泉. 现代实用医学. 2012(10)
硕士论文
[1]猪圆环病毒2型的分离鉴定及增殖特性的研究[D]. 汤智慧.西北农林科技大学 2011
本文编号：3525735
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/dongwuyixue/3525735.html
