内蒙古绒山羊皮肤毛囊毛乳头细胞系的建立及其基因表达谱型的研究

发布时间：2021-12-10 10:36

　　毛乳头控制毛囊的新生和毛囊的大小,是毛囊生长和毛囊周期的控制中枢。内蒙古绒山羊体表皮肤具有两种大小和质地差异显著的毛囊,初级毛囊（产粗毛）和次级毛囊（产绒）。绒山羊初级毛囊与次级毛囊大小上的显著差异使其成为研究毛囊形态发生发育机制的优良模型。而次级毛囊比初级毛囊更为明确的毛囊年生长周期及每个周期的易于划分等特点也为研究毛囊周期机制提供了良好的实验材料。本研究通过Ⅱ型胶原酶消化结合机械分离的方法,共建立了三种毛乳头细胞系,分别为毛囊生长期初级毛囊毛乳头细胞、生长期次级毛囊毛乳头细胞和休止期次级毛囊毛乳头细胞。我们对三种毛乳头细胞的形态和生长情况进行了检测,发现体外培养条件下所有三种毛乳头细胞均呈三角形或多角形,均高表达毛乳头细胞特异性标记分子α-平滑肌肌动蛋白。不同的是,只有毛囊生长期初级毛囊毛乳头细胞和生长期次级毛囊毛乳头细胞能够在体外培养条件下形成细胞凝集块,休止期次级毛囊毛乳头细胞在任何代次均不能形成。随后的细胞增殖能力检测发现休止期次级毛囊毛乳头细胞较另外两种毛乳头细胞增殖能力弱。高通量转录组测序技术在检测基因表达水平的方面具有高效、全面和精确的特点。以山羊基因组全序列测序结果为... 

【文章来源】：内蒙古大学内蒙古自治区 211工程院校

【文章页数】：84 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
摘要
Abstract
缩略词表
前言
    参考文献
第一部分 文献综述
    一、毛囊的结构和功能
    二、毛乳头与毛囊的发生发育
    三、毛乳头与毛囊的生长周期
    四、毛乳头与毛囊干细胞的联系
    五、常见的基因表达鉴定技术
        1 反转录差异显示技术(Different Display Reverse Transcription-PCR,DDRT-PCR)
        2 抑制性消减杂交技术(Suppression Subtractive Hybridization,SSH)
        3 高通量转录组测序技术(Transcriptome Sequencing,RNA-Seq)
        4 基因芯片技术(Microarray)
    参考文献
第二部分 研究论文
    第一章 绒山羊初级毛囊、次级毛囊毛乳头细胞的分离、培养和鉴定
        摘要
        1 材料与方法
            1.1 材料
            1.2 方法
        2 结果与讨论
            2.1 绒山羊初级毛囊、次级毛囊毛乳头细胞的分离、培养
            2.2 毛乳头细胞的冻存和复苏能力
            2.3 毛乳头细胞的鉴定
            2.4 毛乳头细胞的增殖能力
        3 本章小结
        参考文献
    第二章 毛囊生长期初级毛囊毛乳头细胞与次级毛囊毛乳头细胞基因表达差异研究
        摘要
        1 材料与方法
            1.1 材料
            1.2 方法
        2 结果
            2.1 毛囊生长期初级毛囊毛乳头细胞和生长期次级毛囊毛乳头细胞转录组测序结果
            2.2 转录组测序数据的校验
        3 讨论
            3.1 初级毛囊毛乳头细胞和次级毛囊毛乳头细胞之间参与血管新生和可能的毛囊形态发生的差异表达基因
            3.2 ECM基因在初级毛囊毛乳头细胞和次级毛囊毛乳头细胞中存在表达差异
            3.3 Wnt/β-catenin/Lefl信号通路里的差异表达基因参与毛囊形态发生或重建
        4 本章小结
        参考文献
    第三章 次级毛囊生长期毛乳头细胞与休止期毛乳头细胞基因表达差异研究
        摘要
        1 材料和方法
            1.1 材料
            1.2 方法
        2 结果和讨论
            2.1 两种毛乳头细胞转录组谱型
            2.2 ana-SHFDPCs和tel-SHFDPCs两者中参与细胞周期通路的差异表达基因
            2.3 ana-SHFDPCs和tel-SHFDPCs两者中参与细胞黏附分子通路的差异表达基因
            2.4 ana-SHFDPCs和tel-SHFDPCs两者中参与细胞因子-细胞因子受体相互作用通路的差异表达基因
            2.5 ana-SHFDPCs和tel-SHFDPCs两者中参与p53信号通路的差异表达基因
            2.6 转录组测序数据的校验
        3 本章小结
        参考文献
结论
致谢
攻读博士学位期间发表的学术论文


【参考文献】：
期刊论文
[1]内蒙古阿尔巴斯绒山羊毛囊结构及形态发生过程研究[J]. 张燕军,尹俊,李金泉,李长青.  中国农业科学. 2007(05)



本文编号：3532453