西部白眉长臂猿支气管败血波氏杆菌的分离鉴定及其耐药基因检测
发布时间：2021-12-10 16:20
为探究某动物园西部白眉长臂猿死亡的可能原因,无菌采集病死白眉长臂猿肺脏组织进行细菌分离鉴定。通过分离纯化、培养特性观察、革兰染色镜检、生化试验以及16S rDNA克隆测定对分离菌株进行鉴定;进一步研究分离株的致病性、耐药性,并进行超广谱β-内酰胺酶耐药基因检测及测序分析。结果表明,分离得到1株革兰阴性小杆菌,命名为J181121,该分离菌的培养及生化特性符合支气管败血波氏杆菌,其16S rDNA基因序列与Genbank中支气管败血波氏杆菌（登录号:CP018761.1）的同源性为99%,对小鼠致病力强。药敏试验结果显示,分离株对β-内酰胺类抗生素耐药,PCR检测到超广谱β-内酰胺酶耐药基因bla-SHV。
【文章来源】：西北农业学报. 2020,29(05)北大核心CSCD
【文章页数】：7 页
【部分图文】：
图1 分离株在TSA(A)、MAC(B)培养基上的生长特性及分离株的革兰染色镜检结果(C)
采用引物16S rDNA-P1/P2扩增分离株16S rDNA基因序列,产物经琼脂糖凝胶电泳检测,在1 500 bp左右有1条特异性扩增条带(图2),产物测序后经BLAST比对分析,结果显示分离株的16S rDNA基因序列与Genbank中支气管波氏杆菌的同源性为99%,将所得的分离株命名为J181121。进一步选取具有代表性的同属不同种的副百日咳波氏杆菌(B. parapertussis)、来源不同的支气管败血波氏杆菌等14株菌株与分离株构建16S rDNA系统进化树(图3)。从所建进化树模型可见,分离株J181121与支气管败血波氏杆菌(登录号:CP018761.1)位于同一进化分支上,同源性为99%。结合菌落特点、细菌形态及培养特性、生化试验鉴定,判定分离株为支气管败血波氏杆菌。2.4 分离株J181121药敏试验
对所得分离菌株进行 β-内酰胺类、氨基糖苷类、四环素类、氟喹诺酮类、氯霉素类药物的敏感性检测,结果显示分离菌对 β-内酰胺类抗生素耐药(表3)。表3 分离菌株J181121药敏试验结果Table 3 Antimicrobial susceptible tests of isolate J181121 药物名称Drug 判定标准 Assessment criteria 抑菌圈直径/mmDiameter of inhibition zone 结果判定Result determination R I S 头孢唑林Cefazolin ≤14 15～17 ≥18 6 R 头孢噻吩Cefalotin ≤14 15～17 ≥18 6 R 头孢呋辛Cefuroxime ≤14 15～17 ≥18 6 R 头孢曲松Ceftriaxone ≤13 14～20 ≥21 19 I 头孢噻肟Cefotaxime ≤14 15～22 ≥23 8 R 头孢吡肟Cefepime ≤14 15～17 ≥18 22 S 氨苄西林Ampicilin ≤13 14～16 ≥17 7 R 阿莫西林Amoxicillin ≤13 14～17 ≥18 6 R 亚胺培南Imipenem ≤13 14～15 ≥16 19 S 庆大霉素Gentamycin ≤12 13～14 ≥15 18 S 卡那霉素Kanamycin ≤13 14～17 ≥18 22 S 妥布霉素Tobramycin ≤12 13～14 ≥15 16 S 四环素Tetracycline ≤11 12～14 ≥15 28 S 环丙沙星Ciprofloxacin ≤15 16～20 ≥21 22 S 左氧氟沙星Levifloxacin ≤13 14～16 ≥17 29 S 诺氟沙星Norfloxacin ≤12 13～16 ≥17 22 S 加替沙星Gatifloxacin ≤14 15～17 ≥18 23 S 氯霉素Chloramphenicol ≤12 13～17 ≥18 24 S 注:S. 敏感; I. 中介; R. 耐药。Note: S.Susceptible; I.Intermediate; R.Resistant.
【参考文献】：
期刊论文
[1]SHVβ-内酰胺酶的研究进展[J]. 潘红,黄静芳,杜文娇. 江苏预防医学. 2018(05)
[2]兔支气管败血波氏杆菌的分离鉴定及耐药性分析[J]. 牛江婷,方词,伊淑帅,张双,何羽扬,董国英,胡桂学. 中国兽药杂志. 2018(02)
[3]猪支气管败血波氏杆菌生物被膜态和常规培养比较蛋白组学分析[J]. 宁建刚,高翔,肖敏,冯娜,温峰琴,包世俊,邢小勇,胡永浩. 农业生物技术学报. 2018(01)
[4]云南高黎贡山东白眉长臂猿鸣声声谱研究[J]. 李旭,周伟,彭超,李云臣. 河南师范大学学报(自然科学版). 2017(02)
[5]猪支气管败血波氏杆菌的分离鉴定及部分生物学特性的研究[J]. 诸明欣,张焕容,张斌,徐凤. 中国兽医科学. 2017(03)
[6]中国长臂猿科动物种群监测现状分析[J]. 管振华,阎璐,黄蓓. 四川动物. 2017(02)
[7]白眉长臂猿感染戊型肝炎病毒的病理学观察[J]. 安俊卿,戴榕全,汤金,卢岩,佘锐萍,田纪景,石蕊寒,常玲玲,张成林. 野生动物学报. 2017(01)
[8]高黎贡山赧亢东白眉长臂猿活动区秋季潜在可选果实食物研究[J]. 李明会,周伟,李柳,李正波. 林业调查规划. 2016(06)
[9]幼龄白眉长臂猿的人工抚育初探[J]. 滕萍. 中国畜牧兽医文摘. 2016(11)
[10]SHV型超广谱β-内酰胺酶的研究进展[J]. 张玲,黄永茂. 国际检验医学杂志. 2016(07)
本文编号：3532973
【文章来源】：西北农业学报. 2020,29(05)北大核心CSCD
【文章页数】：7 页
【部分图文】：
图1 分离株在TSA(A)、MAC(B)培养基上的生长特性及分离株的革兰染色镜检结果(C)
采用引物16S rDNA-P1/P2扩增分离株16S rDNA基因序列,产物经琼脂糖凝胶电泳检测,在1 500 bp左右有1条特异性扩增条带(图2),产物测序后经BLAST比对分析,结果显示分离株的16S rDNA基因序列与Genbank中支气管波氏杆菌的同源性为99%,将所得的分离株命名为J181121。进一步选取具有代表性的同属不同种的副百日咳波氏杆菌(B. parapertussis)、来源不同的支气管败血波氏杆菌等14株菌株与分离株构建16S rDNA系统进化树(图3)。从所建进化树模型可见,分离株J181121与支气管败血波氏杆菌(登录号:CP018761.1)位于同一进化分支上,同源性为99%。结合菌落特点、细菌形态及培养特性、生化试验鉴定,判定分离株为支气管败血波氏杆菌。2.4 分离株J181121药敏试验
对所得分离菌株进行 β-内酰胺类、氨基糖苷类、四环素类、氟喹诺酮类、氯霉素类药物的敏感性检测,结果显示分离菌对 β-内酰胺类抗生素耐药(表3)。表3 分离菌株J181121药敏试验结果Table 3 Antimicrobial susceptible tests of isolate J181121 药物名称Drug 判定标准 Assessment criteria 抑菌圈直径/mmDiameter of inhibition zone 结果判定Result determination R I S 头孢唑林Cefazolin ≤14 15～17 ≥18 6 R 头孢噻吩Cefalotin ≤14 15～17 ≥18 6 R 头孢呋辛Cefuroxime ≤14 15～17 ≥18 6 R 头孢曲松Ceftriaxone ≤13 14～20 ≥21 19 I 头孢噻肟Cefotaxime ≤14 15～22 ≥23 8 R 头孢吡肟Cefepime ≤14 15～17 ≥18 22 S 氨苄西林Ampicilin ≤13 14～16 ≥17 7 R 阿莫西林Amoxicillin ≤13 14～17 ≥18 6 R 亚胺培南Imipenem ≤13 14～15 ≥16 19 S 庆大霉素Gentamycin ≤12 13～14 ≥15 18 S 卡那霉素Kanamycin ≤13 14～17 ≥18 22 S 妥布霉素Tobramycin ≤12 13～14 ≥15 16 S 四环素Tetracycline ≤11 12～14 ≥15 28 S 环丙沙星Ciprofloxacin ≤15 16～20 ≥21 22 S 左氧氟沙星Levifloxacin ≤13 14～16 ≥17 29 S 诺氟沙星Norfloxacin ≤12 13～16 ≥17 22 S 加替沙星Gatifloxacin ≤14 15～17 ≥18 23 S 氯霉素Chloramphenicol ≤12 13～17 ≥18 24 S 注:S. 敏感; I. 中介; R. 耐药。Note: S.Susceptible; I.Intermediate; R.Resistant.
【参考文献】：
期刊论文
[1]SHVβ-内酰胺酶的研究进展[J]. 潘红,黄静芳,杜文娇. 江苏预防医学. 2018(05)
[2]兔支气管败血波氏杆菌的分离鉴定及耐药性分析[J]. 牛江婷,方词,伊淑帅,张双,何羽扬,董国英,胡桂学. 中国兽药杂志. 2018(02)
[3]猪支气管败血波氏杆菌生物被膜态和常规培养比较蛋白组学分析[J]. 宁建刚,高翔,肖敏,冯娜,温峰琴,包世俊,邢小勇,胡永浩. 农业生物技术学报. 2018(01)
[4]云南高黎贡山东白眉长臂猿鸣声声谱研究[J]. 李旭,周伟,彭超,李云臣. 河南师范大学学报(自然科学版). 2017(02)
[5]猪支气管败血波氏杆菌的分离鉴定及部分生物学特性的研究[J]. 诸明欣,张焕容,张斌,徐凤. 中国兽医科学. 2017(03)
[6]中国长臂猿科动物种群监测现状分析[J]. 管振华,阎璐,黄蓓. 四川动物. 2017(02)
[7]白眉长臂猿感染戊型肝炎病毒的病理学观察[J]. 安俊卿,戴榕全,汤金,卢岩,佘锐萍,田纪景,石蕊寒,常玲玲,张成林. 野生动物学报. 2017(01)
[8]高黎贡山赧亢东白眉长臂猿活动区秋季潜在可选果实食物研究[J]. 李明会,周伟,李柳,李正波. 林业调查规划. 2016(06)
[9]幼龄白眉长臂猿的人工抚育初探[J]. 滕萍. 中国畜牧兽医文摘. 2016(11)
[10]SHV型超广谱β-内酰胺酶的研究进展[J]. 张玲,黄永茂. 国际检验医学杂志. 2016(07)
本文编号：3532973
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