狐源兔脑炎微孢子虫分离鉴定及极管蛋白基因遗传变异分析
发布时间：2021-12-11 23:00
兔脑炎微孢子虫（Encephalitozoon cuniculi,E.cuniculi）又称兔脑炎原虫,属脑炎微孢子虫属,能够引起家兔、狐、人和犬的机会性感染,是重要的人畜共患胞内寄生虫。E.cuniculi对蓝狐极易感染,在2013年辽宁省出现了中国首例蓝狐脑炎微孢子虫病。该病主要寄生于幼狐肾脏、脑组织,经胎盘、尿液传播,引起蓝狐大量淘汰,给蓝狐养殖业造成了巨大的经济损失,目前国内对该病报道极少,且没有相关的免疫预防措施。吉林省九台、白城和黑龙江省漠河部分蓝狐养殖场发生疑似蓝狐脑炎微孢子虫病疫情,本试验通过临床症状观察、病理剖检、PCR检测,之后对病料进行虫株纯化、染色观察、虫株分离、电镜观察以及分离株PTP1、PTP2、PTP4基因的核苷酸序列分析,为免疫诊断打下理论基础。本研究调查了吉林省九台、白城和黑龙江省漠河部分蓝狐养殖场发生的疫情,病狐表现不同程度脱水、生长停滞、眼睛失明,剖检可见肾脏苍白、肿大,将肾脏、肝脏等病料固定制备石蜡切片并进行HE染色、改良Masson三色染色、革兰染色比较观察,肾脏、肝脏等主要脏器检测到微孢子虫。根据Genebank登陆的E.cuniculi I...
【文章来源】：吉林农业大学吉林省
【文章页数】：53 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
至4月龄蓝狐呈现精神萎靡、生长停滞、消瘦和被毛粗乱等症状Fig.2-13to4monthsoldbluefoxeswithsymptomssuchaswilting,stagnantgrowth,weight
至 2-3 月仍与初断奶幼狐没有区别（如图 2-1），饮水量增加性感染趋势。 2-1 3 至 4 月龄蓝狐呈现精神萎靡、生长停滞、消瘦和被毛粗乱等症 to 4 months old blue foxes with symptoms such as wilting, stagnant growtloss and rough hair病理变化蓝狐进行剖检，观察到肾脏肿大，比正常的大 2~3 倍，呈苍白
脏切片的革兰染色Fig.2-3Aand B: Blue fox kidney pathology section (400 x)Aand B：Modified Marssontrichrome staining of kidney sections , C and D: Gram staining of kidney sections ；E and F:Gram staining of spleen sections2.3.2 蓝狐脑炎微孢子虫病的 PCR 检测不同地区蓝狐养殖区域的 35 份肾脏组织研磨提取 DNA 作为模板，进行 PCR检测，成功克隆 762bp 大小的片段，检测到阳性样品共 12 份（如图 2-4）。其中九台市某养殖场 11 只剖检蓝狐肾脏中检测出 5 份为阳性，漠河市某养殖场 12 只剖检蓝狐肾脏中检测出 4 份为阳性，白城市某养殖场 12 只蓝狐中检测出 3 份为阳性。使用毕氏微孢子虫、肠脑炎微孢子虫 ITS 基因特异性引物和细菌 16sDNA 通用引物 27F、1492R 检测肾脏中毕氏微孢子虫、肠脑炎微孢子虫细菌的感染，将PCR 扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳验证结果显示并未扩增出 392bp、930bp 和1500bp 左右大小的目的条带。
【参考文献】：
期刊论文
[1]2种在组织切片上鉴别兔脑炎原虫的新方法[J]. 李瑞珍,刘志科,梁莹莹,郝军红,赵俊江,潘耀谦. 安徽农业科学. 2015(16)
[2]微孢子虫研究进展[J]. 张志芳,沈中元,何家禄. 蚕业科学. 2000(01)
[3]与艾滋病相关的人微孢子虫研究[J]. 余南. 中山大学研究生学刊(自然科学版). 1994(03)
[4]与艾滋病相关的人微孢子虫研究[J]. 余南. 中山大学研究生学刊(自然科学版). 1994 (03)
本文编号：3535553
【文章来源】：吉林农业大学吉林省
【文章页数】：53 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
至4月龄蓝狐呈现精神萎靡、生长停滞、消瘦和被毛粗乱等症状Fig.2-13to4monthsoldbluefoxeswithsymptomssuchaswilting,stagnantgrowth,weight
至 2-3 月仍与初断奶幼狐没有区别（如图 2-1），饮水量增加性感染趋势。 2-1 3 至 4 月龄蓝狐呈现精神萎靡、生长停滞、消瘦和被毛粗乱等症 to 4 months old blue foxes with symptoms such as wilting, stagnant growtloss and rough hair病理变化蓝狐进行剖检，观察到肾脏肿大，比正常的大 2~3 倍，呈苍白
脏切片的革兰染色Fig.2-3Aand B: Blue fox kidney pathology section (400 x)Aand B：Modified Marssontrichrome staining of kidney sections , C and D: Gram staining of kidney sections ；E and F:Gram staining of spleen sections2.3.2 蓝狐脑炎微孢子虫病的 PCR 检测不同地区蓝狐养殖区域的 35 份肾脏组织研磨提取 DNA 作为模板，进行 PCR检测，成功克隆 762bp 大小的片段，检测到阳性样品共 12 份（如图 2-4）。其中九台市某养殖场 11 只剖检蓝狐肾脏中检测出 5 份为阳性，漠河市某养殖场 12 只剖检蓝狐肾脏中检测出 4 份为阳性，白城市某养殖场 12 只蓝狐中检测出 3 份为阳性。使用毕氏微孢子虫、肠脑炎微孢子虫 ITS 基因特异性引物和细菌 16sDNA 通用引物 27F、1492R 检测肾脏中毕氏微孢子虫、肠脑炎微孢子虫细菌的感染，将PCR 扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳验证结果显示并未扩增出 392bp、930bp 和1500bp 左右大小的目的条带。
【参考文献】：
期刊论文
[1]2种在组织切片上鉴别兔脑炎原虫的新方法[J]. 李瑞珍,刘志科,梁莹莹,郝军红,赵俊江,潘耀谦. 安徽农业科学. 2015(16)
[2]微孢子虫研究进展[J]. 张志芳,沈中元,何家禄. 蚕业科学. 2000(01)
[3]与艾滋病相关的人微孢子虫研究[J]. 余南. 中山大学研究生学刊(自然科学版). 1994(03)
[4]与艾滋病相关的人微孢子虫研究[J]. 余南. 中山大学研究生学刊(自然科学版). 1994 (03)
本文编号：3535553
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