miRNA-148a-3p对梅花鹿TGF-β2基因调控作用的研究
发布时间：2021-12-22 19:42
鹿茸为雄鹿的第二性征,是鹿进入青春期后在额骨顶部长出的包括血管、皮层、软骨等多个组织形成的器官。梅花鹿鹿茸是哺乳动物中唯一可完全再生的骨质器官,有着其它动物不可比拟的生长速度和超强的稳定性,是研究器官再生和创伤修复的理想模型。鹿茸经过特殊的骨形成方式完成周期性的再生,这个过程是由多种因素共同作用的结果。转化生长因子（Transforming growth factor,TGF）广泛分布于成纤维及上皮细胞内。研究表明TGF-β2存在于鹿茸顶端组织中,可与Wnt信号通路协同促进上皮细胞向间充质细胞的转化,并使细胞维持在间充质状态。而鹿茸顶端软骨组织形成的最初阶段源于间充质的快速生长。故TGF-β对鹿茸软骨快速生长阶段的调控机理需要进一步的研究。本实验应用PCR技术克隆获得梅花鹿TGF-β2基因编码区全长cDNA序列,将其纯化回收并构建重组质粒pMD-18T-TGF-β2,转化大肠杆菌DH5a中后进行PCR及双酶切鉴定,最后进行核苷酸序列测定。应用免疫组织化学法检测TGF-β2在梅花鹿鹿茸顶端不同组织的表达。应用Trizol试剂法提取鹿茸顶端软骨及间充质细胞总RNA,并进行HiSeq深度测序...
【文章来源】：吉林农业大学吉林省
【文章页数】：70 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
TGF-β信号通路图
%的血清进行封闭，37℃孵，室温孵育 20min，PBS 冲育 20 min，PBS 冲洗三次，in，显微镜下观测结果。涤过后，将切片放于 1%盐酸90%、95%、无水乙醇中， Olympus 对结果进行分析。提取法得到梅花鹿鹿茸顶端组织中可以看出，所得到的总 现象。
图 2-2 TGF-β2 基因 PCR 扩增NA Marker（DL2000）；1.PCR.2-2 PCR amplification of TGF-β2 DNA Marker (DL2000);1. PCR pTGF-β2 的 PCR 鉴定与双酶切为模板，进行 PCR 反应，P现目的条带。结果如图 2-3β2，同样于 1245bp 处出现目1245bp2000bp1000bp750bp500bp
【参考文献】：
期刊论文
[1]梅花鹿VEGF基因的克隆及其在鹿茸顶端组织的表达[J]. 韩香玉,吴炎,李璐,闫语多,胡薇. 吉林农业大学学报. 2017(04)
[2]血管化鹿茸软骨组织与骨组织修复[J]. 付晶,褚文辉,孙红梅,李春义,马丽娟. 中国组织工程研究. 2016(46)
[3]鹿茸组织microRNA的研究进展[J]. 闫语多,韩香玉,吴雷,胡薇. 中国畜牧杂志. 2016(21)
[4]不同生长时期梅花鹿鹿茸差异蛋白质组学分析[J]. 张然然,刘华淼,邵元臣,周盼伊,苏莹,王磊,邢秀梅. 畜牧兽医学报. 2016(03)
[5]西丰鹿茸,世代相传的“中医钻石”[J]. 弥耳. 品牌与标准化. 2015(10)
[6]猪MiR-148a对肝脏发育调控的初步研究[J]. 李艳华,赵俊生,周辉云,徐宁迎. 农业生物技术学报. 2015(04)
[7]鹿茸成骨过程及其相关调控机制研究进展[J]. 张伟,褚文辉,李春义. 中国农学通报. 2015(08)
[8]microRNA定量检测方法的研究进展[J]. 祝申蓉,吴旭日,陈依军. 中国药科大学学报. 2015(01)
[9]《双禄壶》的造型寓意[J]. 沈艳萍. 山东陶瓷. 2014(06)
[10]微骨折技术联合IGF-1修复兔关节软骨缺损的实验研究[J]. 张复文,刘德宝,王刚,任振华. 中国修复重建外科杂志. 2014(05)
博士论文
[1]小RNA深度测序在柑橘新发病毒的鉴定及TuMV诱导的抗病毒新机制中的研究[D]. 于云奇.西南大学 2017
[2]miR-125a-5p通过靶向调控VEGF-A影响胃癌血管新生的研究[D]. 戴俊.华中科技大学 2016
[3]马鹿（Cervus elaphus）鹿茸快速生长期生长点软骨和茸皮组织microRNA表达谱研究[D]. 陈艳霞.东北林业大学 2016
[4]鹿茸形态发生及生物电对其影响的研究[D]. 赵海平.中国农业科学院 2015
[5]microRNA的肿瘤表达研究及协同调控网络分析[D]. 崔洪亮.中南大学 2014
[6]一个新克隆的microRNA调节破骨细胞分化的作用及机制研究[D]. 梁梦柯.中南大学 2014
[7]骨骼肌发育中miR-148a功能与qPCR内参基因的研究[D]. 张晶.华中农业大学 2012
[8]鹿茸中有效成分的提取与分离关键技术及其抗氧化活性的研究[D]. 周冉.天津大学 2009
[9]梅花鹿茸多肽的化学结构及其抗肝纤维化作用[D]. 段冷昕.吉林大学 2007
硕士论文
[1]MiRNA-19a和miRNA-19b对梅花鹿鹿茸组织中TGF-βRⅡ调控作用的研究[D]. 闫语多.吉林农业大学 2017
[2]鹿茸样品采集及使用抗雄激素提高二茬茸茸重技术的研究[D]. 张伟.中国农业科学院 2016
[3]CGI99在鹿茸软骨组织生成中的作用[D]. 路晓.中国农业科学院 2016
[4]联合应用外源性TGF-β2及IGF-Ⅰ对大鼠骨折愈合的影响[D]. 刘亚军.蚌埠医学院 2015
[5]TGFβ1诱导胰腺癌细胞株EMT相关机制的研究[D]. 孟茜茜.第二军医大学 2015
[6]加味芍药甘草汤联合膝三针治疗老年膝骨关节炎临床研究[D]. 罗力.广州中医药大学 2015
[7]梅花鹿VEGF基因的克隆、原核表达及对细胞增殖的影响[D]. 吴炎.吉林农业大学 2015
[8]驯鹿茸顶端间充质组织雌雄差异表达基因的初步筛选[D]. 高力.东北林业大学 2015
[9]MicroRNA介导的IGF-1R基因沉默对鹿茸软骨细胞增殖抑制的影响[D]. 李婷.吉林农业大学 2013
[10]鹿茸分裂层细胞的分离培养及褪黑激素对间充质细胞的影响[D]. 王春雷.华中农业大学 2013
本文编号：3546976
【文章来源】：吉林农业大学吉林省
【文章页数】：70 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
TGF-β信号通路图
%的血清进行封闭，37℃孵，室温孵育 20min，PBS 冲育 20 min，PBS 冲洗三次，in，显微镜下观测结果。涤过后，将切片放于 1%盐酸90%、95%、无水乙醇中， Olympus 对结果进行分析。提取法得到梅花鹿鹿茸顶端组织中可以看出，所得到的总 现象。
图 2-2 TGF-β2 基因 PCR 扩增NA Marker（DL2000）；1.PCR.2-2 PCR amplification of TGF-β2 DNA Marker (DL2000);1. PCR pTGF-β2 的 PCR 鉴定与双酶切为模板，进行 PCR 反应，P现目的条带。结果如图 2-3β2，同样于 1245bp 处出现目1245bp2000bp1000bp750bp500bp
【参考文献】：
期刊论文
[1]梅花鹿VEGF基因的克隆及其在鹿茸顶端组织的表达[J]. 韩香玉,吴炎,李璐,闫语多,胡薇. 吉林农业大学学报. 2017(04)
[2]血管化鹿茸软骨组织与骨组织修复[J]. 付晶,褚文辉,孙红梅,李春义,马丽娟. 中国组织工程研究. 2016(46)
[3]鹿茸组织microRNA的研究进展[J]. 闫语多,韩香玉,吴雷,胡薇. 中国畜牧杂志. 2016(21)
[4]不同生长时期梅花鹿鹿茸差异蛋白质组学分析[J]. 张然然,刘华淼,邵元臣,周盼伊,苏莹,王磊,邢秀梅. 畜牧兽医学报. 2016(03)
[5]西丰鹿茸,世代相传的“中医钻石”[J]. 弥耳. 品牌与标准化. 2015(10)
[6]猪MiR-148a对肝脏发育调控的初步研究[J]. 李艳华,赵俊生,周辉云,徐宁迎. 农业生物技术学报. 2015(04)
[7]鹿茸成骨过程及其相关调控机制研究进展[J]. 张伟,褚文辉,李春义. 中国农学通报. 2015(08)
[8]microRNA定量检测方法的研究进展[J]. 祝申蓉,吴旭日,陈依军. 中国药科大学学报. 2015(01)
[9]《双禄壶》的造型寓意[J]. 沈艳萍. 山东陶瓷. 2014(06)
[10]微骨折技术联合IGF-1修复兔关节软骨缺损的实验研究[J]. 张复文,刘德宝,王刚,任振华. 中国修复重建外科杂志. 2014(05)
博士论文
[1]小RNA深度测序在柑橘新发病毒的鉴定及TuMV诱导的抗病毒新机制中的研究[D]. 于云奇.西南大学 2017
[2]miR-125a-5p通过靶向调控VEGF-A影响胃癌血管新生的研究[D]. 戴俊.华中科技大学 2016
[3]马鹿（Cervus elaphus）鹿茸快速生长期生长点软骨和茸皮组织microRNA表达谱研究[D]. 陈艳霞.东北林业大学 2016
[4]鹿茸形态发生及生物电对其影响的研究[D]. 赵海平.中国农业科学院 2015
[5]microRNA的肿瘤表达研究及协同调控网络分析[D]. 崔洪亮.中南大学 2014
[6]一个新克隆的microRNA调节破骨细胞分化的作用及机制研究[D]. 梁梦柯.中南大学 2014
[7]骨骼肌发育中miR-148a功能与qPCR内参基因的研究[D]. 张晶.华中农业大学 2012
[8]鹿茸中有效成分的提取与分离关键技术及其抗氧化活性的研究[D]. 周冉.天津大学 2009
[9]梅花鹿茸多肽的化学结构及其抗肝纤维化作用[D]. 段冷昕.吉林大学 2007
硕士论文
[1]MiRNA-19a和miRNA-19b对梅花鹿鹿茸组织中TGF-βRⅡ调控作用的研究[D]. 闫语多.吉林农业大学 2017
[2]鹿茸样品采集及使用抗雄激素提高二茬茸茸重技术的研究[D]. 张伟.中国农业科学院 2016
[3]CGI99在鹿茸软骨组织生成中的作用[D]. 路晓.中国农业科学院 2016
[4]联合应用外源性TGF-β2及IGF-Ⅰ对大鼠骨折愈合的影响[D]. 刘亚军.蚌埠医学院 2015
[5]TGFβ1诱导胰腺癌细胞株EMT相关机制的研究[D]. 孟茜茜.第二军医大学 2015
[6]加味芍药甘草汤联合膝三针治疗老年膝骨关节炎临床研究[D]. 罗力.广州中医药大学 2015
[7]梅花鹿VEGF基因的克隆、原核表达及对细胞增殖的影响[D]. 吴炎.吉林农业大学 2015
[8]驯鹿茸顶端间充质组织雌雄差异表达基因的初步筛选[D]. 高力.东北林业大学 2015
[9]MicroRNA介导的IGF-1R基因沉默对鹿茸软骨细胞增殖抑制的影响[D]. 李婷.吉林农业大学 2013
[10]鹿茸分裂层细胞的分离培养及褪黑激素对间充质细胞的影响[D]. 王春雷.华中农业大学 2013
本文编号：3546976
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