沙冬青总生物碱抗BPIV-3病毒和亚急性毒性研究

发布时间：2021-12-25 00:35

　　病毒病是目前影响畜牧业生产的重要疾病之一。许多研究表明某些天然植物的活性成分具有良好的抗病毒功效。沙冬青是天然植物的一种。已有报道表明，沙冬青总生物碱具有抗病毒特性。为了进一步深入研究沙冬青生物碱的抗病毒活性特点和安全性，本研究进行了沙冬青体内、外抗BPIV-3病毒试验及亚急性毒性试验研究。本文的主要研究内容如下：1.沙冬青种子总生物碱体外抗牛副流感病毒（III型）的试验研究采用MTT法和细胞病变法测定沙冬青种子总生物碱对MDBK细胞的毒性,以病毒唑为阳性对照物，通过沙冬青总生物碱与MDBK细胞的四种作用方式，观察病毒引起的细胞毒性效应（CPE）,测定OD值检测细胞活性，计算病毒抑制率，半数毒性浓度（TC50），半数抑制浓度（IC50），治疗指数（TI），结果表明，生物碱的安全浓度为0.31mg/mL，半数毒性浓度TC50=2.19mg/ml，病毒TCI5=10-7.733/0.1mL，直接作用方式给药IC50=0.25mg/mL，最高病毒抑制率为66.15%，TI为8.76；抑制作用方式给药IC50=0.203mg/mL，最高病毒抑制率为52.91%，TI为10.79；阻断作用方式给... 

【文章来源】：甘肃农业大学甘肃省

【文章页数】：57 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Summary
缩略词表
第一部分 综述
    1.生物碱的研究进展
        1.1 生物碱的概述
        1.2 生物碱理化特性和提取方法
        1.3 生物碱分类和功能
    2.沙冬青的研究进展
        2.1 沙冬青的概述
        2.2 沙冬青化学成分的研究概况
        2.3 沙冬青化学成分药理作用研究概况
    3.中药抗病毒研究进展
    4 试验研究目的和意义
    5 研究内容
第二部分 试验部分
    第一章 沙冬青总生物碱体外抗牛副流感病毒3型（BPIV-3）的试验研究
        1 材料
            1.1 试验药物
            1.2 毒株与细胞
            1.3 主要试剂
            1.4 试验仪器及器械
            1.5 主要溶液配制
        2 方法
            2.1 细胞的复苏与传代
            2.2 生长曲线的绘制
            2.3 沙冬青生物碱对MDBK细胞的毒性试验
            2.4 细胞活性试验
            2.5 病毒TCID50测定[77]
            2.6 生物碱抗病毒活性的测定
            2.7 试验分析方法
            2.8 统计学处理
        3. 试验结果
            3.1 细胞生长曲线结果
            3.2 沙冬青生物碱对MDKB细胞毒性测定结果
            3.3 病毒唑（利巴韦林Ribavirin）对牛肾细胞毒性测定结果
            3.4 病毒TCID50结果
            3.5 沙冬青生物碱对病毒感染细胞直接作用的测定结果
            3.6 沙冬青生物碱对病毒感染细胞抑制作用的测定结果
            3.7 沙冬青生物碱对病毒感染细胞阻断作用的测定结果
            3.8 沙冬青生物碱对病毒感染细胞综合作用的测定结果
        4.讨论
    第二章 沙冬青种子总生物碱体内抗牛副流感病毒Ⅲ型(BPIV-3)的试验研究
        1 材料
            1.1 试验药物
            1.2 毒株
            1.3 试验动物
            1.4 实验仪器
        2 实验方法
            2.1 实验分组
            2.2 小鼠病毒LD50的测定[82-83]
            2.3 肺炎模型的建立及沙冬青生物碱对病毒感染小鼠肺指数的测定[84]
            2.4 沙冬青生物碱对小鼠保护作用的测定
            2.5 统计学处理
        3.实验结果
            3.1 病毒LD50的测定结果
            3.2 肺炎模型的建立及其肺指数的测定
            3.3 沙冬青生物碱对小鼠保护作用的测定
        4.讨论
    第三章 沙冬青总生物碱对小鼠亚急性毒性试验研究
        1 材料与方法
            1.1 试验药品
            1.2 试验动物
            1.3 试验方法
            1.4 数据处理
        2 结果与分析
            2.1 沙冬青种子总生物碱对小鼠自然状况和体重的影响
            2.2 沙冬青种子总生物碱对小鼠血液生化指标的影响
            2.3 沙冬青种子总生物碱对小鼠血液生理的影响
            2.4 沙冬青种子总生物碱对小鼠病理组织学的影响
        3 讨论与结论
全文结论
附图
参考文献
致谢
作者简介
导师简介


【参考文献】：
期刊论文
[1]沙冬青种子总生物碱对小鼠急性毒性试验研究[J]. 相猛,鲁延刚,石广亮,刘宇,王学红,梁剑平,贾宁.  甘肃农业大学学报. 2012(01)
[2]沙冬青生物碱对MDCC-MSB1端粒酶活性和细胞凋亡的影响[J]. 亢恺,方梅,贾宁.  中国兽医科学. 2011(04)
[3]沙冬青生物碱对MDCC-MSB1细胞增殖及细胞线粒体膜电位的影响[J]. 哈利,张惠英,贾宁,方梅.  中国兽医学报. 2011(02)
[4]蒙药沙冬青的化学成分研究[J]. 张兴群,杨晓霞,陈婷,邵志宇.  西北植物学报. 2010(05)
[5]牛副流感病毒3型的分离鉴定[J]. 刘鹏,侯喜林,周玉龙,朴范泽.  微生物学通报. 2009(09)
[6]沙冬青地上部分的化学成分研究[J]. 田晓明,陈世忠,屠鹏飞,雷连娣.  中国中药杂志. 2008(19)
[7]JA1对体外培养的Hep细胞和小鼠皮下移植性Hep细胞凋亡的影响[J]. 贾宁,方梅,薛妍.  中国兽医科学. 2008(04)
[8]JA1对体外培养肝癌细胞线粒体膜电位及wt-p53基因表达的影响[J]. 贾宁,方梅.  甘肃农业大学学报. 2008(02)
[9]黄芩苷体内抗流感病毒作用[J]. 初正云,初明,滕宇.  中国中药杂志. 2007(22)
[10]奶牛无浆体病PCR诊断方法的建立及应用[J]. 周玉龙,侯喜林,朴范泽.  中国预防兽医学报. 2007(09)



本文编号：3551479