羊种布鲁杆菌介导的mmu-miR-149-3p靶基因的初步鉴定

发布时间：2021-12-29 02:46

　　布鲁杆菌病是由布氏杆菌（Brucella）引起的一种急性或慢性人兽共患传染病,在我国,羊种布鲁杆菌（Brucella melitensis,B.melitensis）最为流行。前期研究发现,mmu-miR-149-3p的潜在靶基因有10个,分别为:Bcl6b、Nos2、Slc7a11、Olr1、Ikbke、Slc31a2、IL1rl1、Dusp16、Ifit1和Rhoc。本试验通过X-treme Gene高效转染试剂,分别将5, 50和100 nmol/L,Cy3标记的mimics转染至RAW264.7细胞24 h后,流式细胞仪分析,筛选出最佳转染mimics的浓度;并将mmu-miR-149-3p mimics与mmu-miR-NC mimics,按照最佳转染浓度,转染至RAW264.7细胞24 h后,加入TRIzol裂解细胞,提取总RNA,转录组获得cDNA;利用NCBI primer设计mmu-miR-149-3p的10个潜在靶基因的特异性引物,运用qRT-PCR方法,进行验证试验。结果发现,转染Cy3标记的mimics最佳浓度为100 nmol/L,其阳性率为49.94%,平均... 

【文章来源】：中国兽医学报. 2020,40(11)北大核心CSCD

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

流式细胞仪筛选Cy3标记的mimics的最佳转染浓度

qRT-PCR检测Olr1、Slc7a11和IL1rl1的相对表达量


本文编号：3555244