沙门菌优势抗原NmpC蛋白的免疫特性

发布时间：2022-01-01 11:24

　　NmpC是沙门菌编码的外膜蛋白,也是沙门菌诱导体液免疫的主要抗原。为研究沙门菌NmpC蛋白的免疫特性,本试验对沙门菌nmpC基因进行扩增,并将其克隆到pET-28a载体上,利用大肠杆菌表达系统表达重组蛋白rNmpC,进一步将rNmpC免疫小鼠,检测特异性抗体水平;用肠炎沙门菌C50336菌株感染rNmpC免疫小鼠评测其免疫保护效果。结果显示,成功表达和纯化出肠炎沙门菌NmpC重组蛋白,rNmpC大小为38 000;将rNmpC蛋白免疫小鼠,可以刺激小鼠产生高水平特异性抗体;细菌感染试验表明,rNmpC蛋白免疫小鼠可使其产生针对肠炎沙门菌感染的保护力,保护率为70%。本试验证实沙门菌NmpC蛋白的免疫潜力,为进一步研制沙门菌新型疫苗提供了参考。 

【文章来源】：中国兽医学报. 2020,40(08)北大核心CSCD

【文章页数】：5 页

【部分图文】：

不同菌株NmpC蛋白同源性分析

PCR扩增沙门菌nmpC基因

对pET-28a-nmpC/BL21菌株扩大培养,进行可溶性分析。SDS-PAGE电泳分析结果显示,表达的重组蛋白主要存在于沉淀中,而上清中不表达(图5),表明该蛋白为包涵体表达。用包涵体纯化试剂盒纯化目的蛋白,得到纯化蛋白(图6)。Western blot分析rNmpC蛋白是否能被多抗阳性血清识别,rNmpC蛋白泳道出现特异性条带,而Hexon-penton蛋白泳道无此条带(图7),表明NmpC蛋白在自然感染中能激发机体免疫反应。图4 Western blot分析NmpC蛋白在大肠杆菌中的表达

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3562273