犬DEA1.1血型抗体间接ELISA检测方法的建立

发布时间：2022-01-04 06:40

　　为探求减少宠物临床中犬因血型错配发生的输血反应,本试验以DEA1.1阳性红细胞膜作为抗原建立能检测DEA1.1抗体的间接ELISA方法。试验以犬DEA1.1血型为主要研究对象,提取犬红细胞膜,以DEA1.1阳性红细胞膜作为抗原,用醛化技术包被抗原,优化间接ELISA反应条件。结果显示,最佳固定剂为浓度0.062 5%和0.125%的戊二醛,最佳抗原包被量为4～8μg/孔,最佳封闭液为5%的脱脂奶粉,最佳温度为37℃,最适反应时间为90 min。与间接抗球蛋白试验相比,优化后的间接ELISA法有更高的灵敏性,本试验建立的间接ELISA方法可以对犬DEA1.1血型抗体进行高通量检测。 

【文章来源】：中国兽医杂志. 2020,56(06)北大核心

【文章页数】：5 页

【部分图文】：

P/N值随戊二醛浓度变化

表2 抗原包被浓度的优化Table 2 Optimize the concentration of antigen-coated 抗原包被量(μg/孔) 1 2 4 8 16 32 P/N 1.5±0.07 1.65±0.12 2.16±0.11 2.3±0.12 2.15±0.51 2.16±0.33图3 间接ELISA方法灵敏度测定

图2 抗原包被量的优化表3 间接ELISA方法灵敏度测定Table 3 Sensitivity measurement of ELISA 血清稀释倍数 100 200 400 800 1 600 3 200 P/N 2.90±0.49 2.82±0.26 2.15±0.36 2.03±0.16 1.10±0.26 0.79±0.28

【参考文献】：
期刊论文
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[4]不同醛化剂对红细胞性能及其保存时间的影响[J]. 王丽荣,董永军,刘丽艳.  河北畜牧兽医. 2003(04)
[5]ABC-ELISA法定量检测红细胞相关IgG及临床意义[J]. 杨国元,王昌富,张万胜,黄知平,虞咏知,李良凤,鲁志英,邓明凤.  中华血液学杂志. 2000(10)

硕士论文
[1]红细胞冰冻干燥保存研究[D]. 陈燕.第一军医大学 2006



本文编号：3567868