RNA干扰对绵羊抑制素α亚基基因（INHA）表达的抑制效果

发布时间：2022-01-05 03:59

　　抑制素（inhibin，INH）是由绵羊的卵巢颗粒细胞和睾丸支持细胞分泌的糖蛋白质激素，它是由一个α亚基和一个β亚基通过二硫键构成的，其中抑制素α亚基（INHA）是抑制素发挥生理功能必不可少的。抑制素能抑制雌性动物促卵泡素（FSH）的释放，调节卵泡的生成；对雄性动物表现为抑制精子的发生，降低睾丸的生精能力。可见，可通过抑制抑制素α亚基基因的表达，来降低动物体内的抑制素水平，从而促进卵泡发育和精子的生成，继而提高动物的繁殖力。RNA干扰技术是内源性或外源性双链RNA诱发的mRNA水平上的基因沉默技术，具有高度的特异性。然而，根据以前的研究报告显示shRNA表达载体只能转录生成一种特异性的小干扰RNA，来阻断单一靶点的表达，干扰效率比较低。为了提高shRNA的干扰效率，我们在一个载体上插入两个靶点shRNA表达序列，即构建含有双启动子的shRNA表达载体，并将其与单个靶点shRNA载体的干扰效率作比较。本研究利用RNA干扰技术，根据绵羊INHA基因的cDNA序列设计构建shRNA重组质粒，通过双重PCR方法扩增启动子序列，构建含有U6和H1双启动子的不同靶特异干扰序列shRNA表达载体pG... 

【文章来源】：河北农业大学河北省

【文章页数】：51 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

RNAi作用机制Fig.l-1RNAinterferencemechanism

pGenesil1.2质粒载体结构图

pUC18-4p质粒载体结构图

【参考文献】：
期刊论文
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硕士论文
[1]黄牛和水牛INHA基因RNAi慢病毒载体的构建与鉴定及功能研究[D]. 赵延森.华中农业大学 2011
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[3]体外构建U6/H1双启动子SECs及其对HepG2细胞端粒酶活性抑制的研究[D]. 张琴.中南大学 2008
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本文编号：3569679