铝对大鼠成骨细胞矿化过程的影响

发布时间：2022-01-07 18:45

　　本研究以新生SD乳鼠颅骨培养的成骨细胞（OB）为研究对象,在培养至第4代的OB培养液（DMEM）中添加促矿化液（10mmol·L-1β-甘油磷酸钠、50μg·mL-1抗坏血酸、0.1μmol·L-1地塞米松）和终浓度为0（对照组,CG）,0.52mmolΛL-1（染铝组,TG）的三氯化铝（AlCl3·6H2O）。分别在OB染铝的第7、14和21d,采用茜素红染色法检测矿化结节；EL1SA法检测上清中B-ALP活性；比色法和磷钼酸法检测上清液中钙离子（Ca）和无机磷（Pi）含量；采用蛋白免疫印记法检测骨桥蛋白（OPN）的蛋白表达量；实时荧光定量PCR法检测Ⅰ型胶原（CoLI）、OPN、骨唾蛋白（BSP）、骨钙素（OCN）和转化生长因子-β1（TGF-β1）的基因表达水平。旨在探讨铝对大鼠OB矿化作用的影响,结果表明：1、在OB培养的第7、14和21d,TG矿化结节均少于CG。随染铝时间的延长,CG的矿化结节逐渐增加,而TG的逐渐减少,说明染铝可抑制OB矿化结节的形成。2、在OB培养的第7、14和21d,TG的细胞外Ca浓度低于CG （P<0.01）,Pi浓度高于CG（P<0.... 

【文章来源】：东北农业大学黑龙江省 211工程院校

【文章页数】：43 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
1 前言
    1.1 铝对骨的毒性
    1.2 铝与成骨细胞矿化
        1.2.1 铝与钙磷
        1.2.2 铝与CoL Ⅰ
        1.2.3 铝与非胶原蛋白
        1.2.4 铝与骨源性碱性磷酸酶
        1.2.5 铝与细胞调控因子
    1.3 研究目的及意义
2 材料与方法
    2.1 实验主要仪器与材料
        2.1.1 主要仪器
        2.1.2 主要试剂
    2.2 大鼠成骨细胞的培养及处理
        2.2.1 成骨细胞的提取
        2.2.2 成骨细胞培养及处理
    2.3 检测项目与方法
        2.3.1 OB矿化结节染色观察
        2.3.2 OB细胞外钙磷浓度的检测
        2.3.3 CoL Ⅰ、OCN、BSP、OPN和TGF-β_1基因mRNA表达的检测
        2.3.4 成骨细胞OPN蛋白表达的检测
        2.3.5 B-ALP活性的检测
    2.4 实验数据的分析及统计
3 结果
    3.1 OB矿化结节的观察
    3.2 细胞外钙和磷的浓度
    3.3 OB CoL Ⅰ、OCN、BSP、OPN和TGF-β_1 mRNA表达
    3.4 成骨细胞OPN蛋白表达结果
    3.5 B-ALP活性
4 讨论
    4.1 染铝对OB矿化结节的影响
    4.2 染铝对OB外钙磷浓度的影响
    4.3 染铝对CoL Ⅰ mRNA表达的影响
    4.4 染铝对非胶原蛋白表达的影响
    4.5 染铝对B-ALP活性的影响
    4.6 染铝对OB调控因子TGF-β_1的影响
5 结论
致谢
参考文献
附录
攻读硕士学位期间发表的学术论文


【参考文献】：
期刊论文
[1]杭州市三类面制品中铝含量的调查分析[J]. 黄闽燕,钟小伶,沈利明.  中国卫生检验杂志. 2010(04)
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[3]万州区部分市售食品中铝污染检测结果分析[J]. 樊毅.  中国卫生检验杂志. 2009(09)
[4]镉对体外培养成骨细胞增殖、凋亡、分化及矿化的影响[J]. 陈晓,朱国英,王莉华,金泰廙.  复旦学报(医学版). 2007(04)
[5]不同大小机械牵张力对成骨细胞增殖及碱性磷酸酶的影响[J]. 唐林,林珠,李永明,王华.  解放军医学杂志. 2006(06)
[6]补肾中药血清对体外培养成骨细胞合成碱性磷酸酶及骨钙素的调控[J]. 余克强.  中国临床康复. 2005(34)
[7]铝的生物学作用研究概况[J]. 王劲.  卫生研究. 2002(04)
[8]抗酒石酸酸性磷酸酶测定及在骨质疏松症诊断中的应用[J]. 荣墨克,孙志,杨文思,迟迪,刘也,梁淑媛,毛瑞涛.  中国老年学杂志. 2001(05)
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[10]铝对体外培养人胚成骨细胞毒性作用的研究[J]. 黄国伟,康静,董亚利,张文治.  中国公共卫生. 2000(04)

硕士论文
[1]铝暴露致大鼠骨损伤的分子机制[D]. 李心慰.东北农业大学 2010
[2]新生儿血清骨碱性磷酸酶、骨钙蛋白和瘦素水平的变化及临床意义[D]. 王文英.河北医科大学 2007



本文编号：3575069