水牛睾丸间质细胞体外分离培养的初步研究

发布时间：2022-01-08 17:16

　　本实验以广西水牛睾丸作为研究材料。通过分析比较多个不同物种睾丸间质细胞的培养方法,首次体外成功培养出水牛睾丸间质细胞,并对其进行冷冻保存等相关研究,然后通过质谱联用技术鉴定出该细胞内总蛋白的种类,本研究主要分为四个试验。试验一：初步建立水牛睾丸间质细胞体外培养体系。通过综合参考不同物种睾丸间质细胞的体外培养方法,对培养皿的选择、胶原酶的消化时间长短、Percoll的使用方法等一一对比。结果发现,选择CORNING公司的培养皿,胶原酶Ⅳ消化30-40min, Percoll配置成1.090、1.080、1.065、1.045四个梯度,并在培养6h之后更换细胞培养液,能够得到最大纯度的水牛睾丸间质细胞。试验二：对试验一中生长状态良好的水牛睾丸间质细胞进行冻融操作。结果发现：①生长天数小于3d时,用0.25%胰蛋白酶与4倍体积的PBS相结合,需要消化3min左右。生长天数大于7d时,消化时间需延长至30-40min。②与原代培养的睾丸间质细胞相比,传代之后,细胞的生殖及增殖能力明显下降。③间质细胞冷冻保护剂配方为：70%DMEM/F12培养液（无血清）+20%FBS（胎牛血清）+10%DMS... 

【文章来源】：广西大学广西壮族自治区 211工程院校

【文章页数】：66 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

促性腺激素的调节作用示意图

图1-1 Percoll密度梯度离心Figure. 1-1 The density gradient centrifiigation of percoll率检测

细胞活率鉴定Figure.1-2Theidentificationoflivecell

【参考文献】：
期刊论文
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博士论文
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硕士论文
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本文编号：3576958